摘要
弧菌广泛存在于海洋环境中，属于条件致病菌，被认为是水产养殖业发展的阻碍。溶藻弧菌居海洋三大优势弧菌首位，能够诱发多种海洋生物的流行性疾病。近年来，抗生素滥用让研究者再次及其对噬菌体的兴趣并在畜牧、水产养殖等领域开展应用，但这也促使细菌产生了多种噬菌体抗性机制，主要集中于对噬菌体受体和噬菌体DNA复制阶段的调控。其中，在种群水平上，细菌的群体感应系统发挥着重要的调控作用。而溶藻弧菌的群体感应系统调控噬菌体-宿主相互作用的机制研究较少，因此本论文以高致病性的溶藻弧菌AP-1和两种不同受体的噬菌体BX-1和KVP40为研究对象，探究溶藻弧菌AP-1的群体感应系统对不同受体噬菌体-宿主相互作用的调控，为防控溶藻弧菌引发的细菌性疾病和噬菌体应用提供更多参考。 通过基因敲除和同源重组，获得了溶藻弧菌AP-1的群体感应调控基因缺失株ΔhapR、ΔluxO和信号分子合成酶基因缺失株ΔluxM、ΔcqsA、ΔluxS。噬菌体敏感性测定和抑菌的结果明确了溶藻弧菌 AP-1 的群体感应系统能够促进噬菌体 BX-1 的抑菌作用，且由信号分子CAI-1和AI-2介导的通路发挥主要作用。吸附率测定的结果表明，群体感应系统调控噬菌体初始的吸附阶段。实时荧光定量 PCR 的实验结果进一步验证溶藻弧菌AP-1的群体感应系统提高了受体基因bcsE的表达，促进噬菌体BX-1对溶藻弧菌AP-1的吸附和裂解作用。 通过构建溶藻弧菌AP-1的受体缺失株ΔompK，进一步验证了噬菌体KVP40是外膜蛋白K（OmpK）作为受体侵染溶藻弧菌AP-1。通过敏感性和抑菌实验证明了溶藻弧菌AP-1的群体感应系统会抑制噬菌体KVP40的裂解；通过吸附曲线以及实时荧光定量PCR 的结果，初步明确了溶藻弧菌 AP-1 的群体感应系统能够下调噬菌体 KVP40 受体基因ompK表达量，从而抑制噬菌体KVP40吸附和裂解宿主AP-1。 利用实时荧光定量 PCR 检测不同菌株内噬菌体总 DNA 含量，结果表明溶藻弧菌AP-1的群体感应系统对噬菌体BX-1侵染的吸附阶段起主要作用，对感染后的DNA复制无明显影响；但会阻碍感染后的噬菌体KVP40的DNA复制。这表明溶藻弧菌AP-1的群体感应系统对噬菌体-宿主互作的调控不同。 本论文的研究结果表明溶藻弧菌AP-1的群体感应系统能够调控不同噬菌体-宿主的互作，且对于不同受体噬菌体的调控作用不同，为进一步研究群体感应系统与噬菌体-宿主互作的关系奠定了基础。
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