摘要
海洋是当今世界生物资源的第一宝库。由于海洋生态系统的特殊性(高压、高盐、低氧)对海洋生物之间的生存造成了激烈的竞争，致使很多海洋生物在其生命活动过程中，产生了大量的结构特殊和生物活性较强的次生代谢产物，并且这些次级代谢产物在药物合成及新药研究等领域有着不可或缺的作用。 在本课题组前期研究中，通过TLC香兰素显色分析法筛选得到富含多种次级代谢产物的枯草芽孢杆菌Bacillussubtilissp.18。采用ISP2培养(1L)，含麦芽提取物10g，酵母4g，葡萄糖4g，在初始pH7.2，28℃，180r/min的条件下培养14d，发酵完成后过滤菌体，将得到的菌液进行浓缩，用乙酸乙酯进行萃取，最后得到浸膏约14.16g。总浸膏经石油醚和乙酸乙酯分级萃取后，再系统的分离纯化乙酸乙酯相浸膏，交叉使用硅胶柱，C18柱和凝胶柱，最后采用高效液相色谱纯化，通过核磁共振谱(NMR)及质谱(MS)，红外光谱(IR)和紫外(UV)等方法确定全部化合物的平面结构，一共分离鉴定了9个化合物的结构，分别为macrolactinX(1),(R)-2-ethylhexyl2H-1,2,3-triazole-4-carboxylate(2),Bis(2-ethylhexyl)terephthalate(3),3-propyl-indole(4),cyclo(Benzyl-Gly)(5),cyclo(D)-Pro-(D)-Phe(6),macrolactinF(7),macrolactinA(8),Tyrosol(9)，其中macrolactinX为新化合物。对所得化合物进行生物学活性评价，结果表明macroactinX(1)对革兰氏阳性枯草芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌有强烈的抑菌活性，MIC值均为2.5μg/mL，化合物cyclo(Benzyl-Gly)(5)和cyclo(D)-Pro-(D)-Phe(6)分别对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌有较好抑菌效果，MIC值为2.5μg/mL。 同时由于极地极端的自然条件，致使极地生物在演化过程中形成了特有的防御能力，从而产生许多结构新颖、具有明显活性的次级代谢产物。本实验室从中国北极地区分离出一株真菌Eutypellasp.D-1。选取PDB培养基，于20℃，180r/min的恒温振荡培养箱中培养10d。发酵完成后，将菌体与菌液过滤，分别经乙酸乙酯萃取3次，最后萃取液进行合并浓缩，得到总浸膏约4.27g。分别采用凝胶柱层析、反相ODS柱层析、正相硅胶柱层析及高效液相色谱等方法进行分离纯化，再由核磁共振谱(NMR)及质谱(MS)和其他波谱分析方法，最后鉴定出5个化合物结构，分别为4α-hydroxyamorph-5-ene(10),dihydroxylaureonitol(11),cyclo(Pro-Leu)(12),cyclo(D)-Pro-(D)-Val(13),plancyindoleD(14)。其中化合物11为新化合物。通过生物学活性测试，发现化合物12对枯草芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌有显著抑菌活性，MIC值为2.5μg/mL，化合物14对金黄色葡萄球菌及大肠杆菌具有明显抑菌活性，MIC值为2.5μg/mL，同时化合物14对AChE也具有较好的抑制活性，IC50为70.7μM。
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