摘要
新型氰基丙烯酸酯类杀菌剂氰烯菌酯具有低毒、环境友好、与多种杀菌剂无交互抗性、对部分镰孢菌属植物病原真菌有较高抑菌活性等特点，在多种由镰孢菌引起的病害防治上具有良好的应用前景。玉米茎基腐病和花生根腐病是两种由镰孢菌引起的重要病害。为探究氰烯菌酯能否用于这两种病害的防治，并明确其对这两种病害主要致病菌的抗药性风险，本文对这两种病害的主要致病镰孢菌进行了分离鉴定，评估了抗药性风险，并对氰烯菌酯抗性突变体进行了分子机制探究，具体结果如下： 1.对2021年至2023年分离自河南、山东和河北的玉米茎基腐病菌进行鉴定后发现，拟轮枝镰孢菌（Fusariumverticillioides)和层出镰孢菌（F.proliferatum）的分离频率较高。对获得的100株拟轮枝镰孢菌对氰烯菌酯的敏感性进行测定后，根据测定结果将100株拟轮枝镰孢的EC50平均值2.46μg/mL作为敏感性基线。 2.通过药剂驯化获得的5株拟轮枝镰孢菌抗氰烯菌酯突变体，抗性倍数范围为37.11~116.89。药剂驯化获得的突变体抗药性均能够稳定遗传。通过对拟轮枝镰孢菌进行紫外诱变后获得6株抗药性突变体，抗性突变频率为4.28×10-6。交互抗性研究结果显示，氰烯菌酯与多菌灵、丙硫菌唑和吡唑醚菌酯这三种杀菌剂均不存在交互抗性。对抗药性突变体及其亲本的生物适合度研究发现，整体而言，拟轮枝镰孢抗性突变体的生物适合度低于亲本菌株，相关试验结果表明玉米茎基腐病原拟轮枝镰孢菌对氰烯菌酯具有中至高等的固有抗性风险。 3.通过对抗性突变体和亲本敏感菌株的myosin-5基因进行测序比对后发现，myosin-5上的S73P、S73L、V161I、T274S、I437V突变可能导致拟轮枝镰孢对氰烯菌酯抗药性的产生。 4.对2021年至2023年分离自辽宁、北京、河南、山东和河北的花生根腐病菌进行鉴定后发现，尖镰孢菌（F.oxysporum）和腐皮镰孢菌（F.solani）的分离频率较高。对104株尖镰孢菌对氰烯菌酯的敏感性进行测定后，根据测定结果将104株尖镰孢菌的EC50平均值2.95μg/mL作为花生根腐病原尖镰孢菌对氰烯菌酯的敏感性基线。 5.通过药剂驯化获得的5株尖镰孢菌抗氰烯菌酯突变体，抗性倍数范围为18.65~54.24。药剂驯化获得的突变体抗药性均能够稳定遗传。通过对尖镰孢菌进行紫外诱变获得11株抗药性突变体，抗性突变频率为7.86×10-6。交互抗性研究结果显示，氰烯菌酯与多菌灵、丙硫菌唑和吡唑醚菌酯这三种杀菌剂均不存在交互抗性。对抗药性突变体及其亲本的生物适合度研究发现，整体而言，尖镰孢菌抗性突变体在菌丝生长速率、孢子产生和萌发能力上弱于亲本菌株，但在致病力上强于亲本菌株。相关试验结果表明花生根腐病原尖镰孢菌对氰烯菌酯均具有中至高等的固有抗性风险。 6.通过对抗性突变体和亲本敏感菌株的myosin-5基因进行测序比对后发现，myosin-5上的T418S和I434M突变可能导致尖镰孢菌对氰烯菌酯抗药性的产生。
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