摘要
目的：本文通过对蠲哮汤(JuanxiaoDecoction,JXD)干预肥胖哮喘小鼠气道炎症及肠道菌群的研究，从肺-肠轴IL-22+ILC3迁移途径探讨蠲哮汤治疗肥胖哮喘的作用机制，为其在防治哮喘方面提供新思路。 方法：1.将60只SPF级雄性BALB/C小鼠随机分为正常组、模型组（60%高脂饲料+OVA）、JXD组（低、中、高剂量分别为8.5、17、34g?kg-1），醋酸地塞米松组（1mg?kg-1），每组10只。除空白组，其余组高脂饲料喂养12W后，利用腹腔注射OVA致敏液联合雾化激发来建立肥胖哮喘小鼠模型。首次雾化起，JXD低、中、高剂量组及醋酸地塞米松组即进行相应药物灌胃，正常组和模型组小鼠则用等量生理盐水代替灌胃，共持续7d。 2.记录小鼠一般情况及肥胖指标，HE染色观察肺和结肠组织病理改变，全自动生化仪检测血脂四项及BALF中炎症细胞分类计数，ELISA检测BALF和血清IgE水平，肺组织中IL-1β、IL-13、CCL17水平，流式细胞术分析肺组织中IL-17A＋ILC3、IL-22＋ILC3水平。 3.采用16SrRNA高通量测序分析肥胖哮喘小鼠肠道菌群变化，免疫荧光三标法观察小肠组织中IL-22＋ILC3（RORγt+CD127+IL-22+）的表达水平，WB检测肺组织中P-STAT3蛋白表达水平。 结果：1.与正常组相比，模型组小鼠体重、腹腔脂肪重量显著增加，lee’s指数明显增高（**p＜0.01，***p＜0.001），而高剂量蠲哮汤能降低肥胖哮喘小鼠体重、lee’s指数、腹腔脂肪重量，改善血脂四项水平（#p＜0.05，##p＜0.01，###p＜0.001）。 2.与正常组相比，模型组小鼠气道炎性细胞浸润，气道壁增厚，经地塞米松和JXD中、高剂量干预后小鼠肺部炎症情况得到改善，其中高剂量效果更明显。中、高剂量蠲哮汤能显著降低肥胖哮喘小鼠BALF中炎性细胞数量（#p＜0.05，##p＜0.01，###p＜0.001）。相比于正常组，模型组小鼠肺组织中IL-1β、IL-17A＋ILC3、IL-13、CCL17水平显著升高（*p＜0.05），IL-22+ILC3比例和P-STAT3蛋白表达水平明显降低（**p＜0.01，*p＜0.05）；与模型组相比，经JXD中、高剂量干预后肥胖哮喘小鼠肺组织中IL-1β、IL-17A＋ILC3、IL-13、CCL17水平显著下降，IL-22＋ILC3比例和P-STAT3蛋白表达水平明显增加（#p＜0.05，##p＜0.01，###p＜0.001）。 3.中、高剂量蠲哮汤明显调节肥胖哮喘小鼠肠道菌群Alpha与Beta多样性，调整菌群丰度与功能回归正常，正向调节哮喘模型小鼠的7种差异菌门（拟杆菌门、厚壁菌门、脱铁杆菌门、放线菌门、螺旋体菌门、软壁菌门、疣微杆菌门）与33种差异菌属（拟杆菌属、狄氏副拟杆菌属、普雷沃氏菌属、未分类的梭状芽胞杆菌、脱硫弧菌属及Flintibacter等）。中、高剂量蠲哮汤能显著增加肥胖哮喘小鼠小肠组织中IL-22＋ILC3（RORγt+CD127+IL-22+）的表达水平（##p＜0.01）。 结论：JXD能减轻肥胖哮喘小鼠肺部炎症和过敏反应，其作用机制可能与改善肥胖哮喘小鼠机体炎症环境，下调肺部炎症细胞水平，纠正肥胖哮喘小鼠肠道菌群结构紊乱从而促进IL-22+ILC3从肠道向肺部迁移，抑制肺部Th2介导的炎症反应有关。
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