摘要
研究目的： 1.基于辛开苦降理论，运用黄连干姜汤治疗寒热错杂型溃疡性结肠炎(ulcerativecolitis,UC)，并对其临床疗效进行总结分析。通过观察患者治疗前后临床疗效、Mayo评分、Baron内镜评分和炎症性指标变化等情况，来证实黄连干姜汤的临床疗效。 2.利用网络药理学和分子对接技术，探讨黄连干姜汤治疗UC的活性成分、靶点及生物学作用机制，为其阐明药效与临床合理用药提供科学理论依据。 研究方法： 1.（1）本研究观察70例患者均来自江西省中医院肛肠科门诊，时间自2021年12月1日至2023年11月30日，并符合条件的寒热错杂型UC患者，随机数字法确立观察组和对照组，每组各35例；（2）观察组口服黄连干姜汤联合美沙拉嗪肠溶片，对照组单纯口服美沙拉嗪肠溶片，连续治疗12周；对照组用药：美沙拉嗪肠溶片1gqid，口服；观察组用药：黄连干姜汤(黄连6g、黄柏10g、干姜10g、当归10g、乌梅12g)，每日1剂，分早晚两次饭后温服，西药同对照组；（3）观察两组患者的临床疗效、Mayo评分、Baron内镜评分、炎症性指标（ESR、CRP、FC）变化、中医证候、生存质量评分以及安全性情况，所得数据经统计学分析，评价黄连干姜汤治疗寒热错杂型UC的临床疗效。 2.（1）在TCMSP数据库中筛选黄连干姜汤中黄连、黄柏、干姜、当归、乌梅的活性成分，获得黄连干姜汤中有效成分对应的靶点；在GeneCards、OMIM、PharmGKB、TTD及Drugbank五大数据库中，获取5个数据库UC疾病相关靶基因，汇总所有靶基因并去掉重复靶点，构建UC疾病基因数据库；（2）对黄连干姜汤中五味药物潜在活性成分与UC疾病基因取交集，准备“黄连干姜汤-活性成分-靶基因-UC”数据文件及绘制药物与疾病共同靶点Venn图；（3）将构建“黄连干姜汤-活性成分-靶基因-UC”的文件导入Cytoscape3.8.0软件中，构建“药物-化合物-疾病靶点”中药复方调控网络；（4）将黄连干姜汤中药物潜在作用靶点与UC疾病相交的靶基因导入STRING数据库，制作PPI蛋白互作网络；（5）运用Bioconductor在R软件中将交集靶基因名转化为基因标识号，在R软件进行GO/KEGG富集分析和通路图绘制；（6）选取核心靶基因MAPK1和AKT1，与黄连干姜汤内核心活性成分槲皮素和山奈酚使用PyMOL软件分别进行分子对接，再分别计算出结合自由能。 结果： 1.（1）在研究期间，有1名患者因未遵循医嘱而中止了临床研究，另有2名患者因不愿再次接受肠镜检查而退出实验。因此，实际参与观察的患者共有67例，其中对照组33例，观察组34例；（2）治疗前两组患者的一般资料显示：性别、年龄、病程、病情、Mayo评分和Baron内镜评分比较未见明显差异，可进行后续对比分析（P＞0.05）；（3）临床疗效比较：治疗后，观察组的临床总有效率高达94.1%，相比之下对照组仅为72.7%。此外，观察组的临床缓解率也达到了91.2%，而对照组仅为69.7%，说明观察组在促进临床有效率和临床缓解率方面优于对照组（P＜0.05）；（4）内镜评分比较：治疗后，观察组和对照组均能降低Baron评分（均P＜0.05），且观察组Baron评分改善情况优于对照组（P＜0.05）；（5）炎症指标比较：治疗前后，炎症指标ESR均无明显变化；治疗后，观察组在降低炎症指标CRP和FC上优于对照组（均P＜0.05）；（6）中医证候比较：治疗前，两组患者在中医症状总积分比较有可比性（P＞0.05）；治疗后，两组中医症状总积分均下降且观察组改善更显著（均P＜0.05）；治疗后，观察组的总有效率达85.3%，显著高于对照组的63.6%，观察组的中医证候疗效亦更优（P＜0.05）；（7）生存质量评分比较：治疗前，两组患者在生存质量评分比较有可比性（P＞0.05）；治疗后，两组生存质量评分均升高且观察组改善更显著（均P＜0.05）；（8）在治疗期间患者均未出现各类不良反应，治疗后的各项化验结果也均处于正常范围。 2.（1）通过TCMSP数据库检索，得到黄连干姜汤中66种有效活性成分及对应的靶点4521个，对靶点进行名称标准化并删除重复项，最后得到1028个有效成分靶点，在五大数据库中删除重复项一共获得3510个UC疾病相关基因，并得到药物与疾病共同靶点129个；（2）通过Cytoscape3.8.0软件构建得到的中药复方调控网络显示，黄连干姜汤参与治疗UC的有效活性成分有32种，靶点有326个；（3）将药物与基因相交的靶基因导入STRING数据库，经过筛选最后得到核心靶点7个，分别为MAPK1、AKT1、TP53、ESR1、BCL2、IL6、TNF；（4）富集分析结果显示：GO生物学功能条目共有2388条，KEGG通路富集分析共得到172条通路，黄连干姜汤干预UC主要参与对外源性刺激的反应、对细菌来源分子的反应等生物过程；主要涉及膜微区、膜笩等细胞组分；分子功能以DNA结合转录因子结合等，其中主要调控IL-17、TNF和P53等信号通路来治疗UC；（5）分子对接结果显示MAPK1与槲皮素嵌合最为紧密且结构稳定。 结论： 1.黄连干姜汤联合美沙拉嗪肠溶片可提高临床疗效、诱导机体炎症缓解、促进患者内镜下黏膜愈合、提高生存质量、改善中医症状且具有较好的安全性，可作为轻、中度寒热错杂型UC患者的治疗选择，为中医药在治疗寒热错杂型UC的临床实践上提供了新的参考方向。 2.网络药理学与分子对接技术验证，黄连干姜汤中主要有效活性成分槲皮素和山奈酚通过调控IL-17、TNF、P53和PI3K-Akt等信号通路来参与治疗UC，进而影响UC的发病与进展，其治疗UC的有效性也进一步得到理论证实，为黄连干姜汤在临床上的运用和UC的治疗提供新的理论依据。
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