摘要
【目的】本试验旨在探讨氟暴露致小鼠肝脏线粒体自噬紊乱的确切机制以及几丁聚糖-纳米硒（CS-SeNps）对氟致小鼠肝脏损伤的缓解效果。 【方法】拟开展以下两方面的研究： （1）以C57BL/6野生型（WT）雄性小鼠为受试对象，随机分为C组（饮用蒸馏水）、F组（饮用100mg/LNaF）、Se组（灌胃1μg/gbw/d的CS-SeNps）、FSe组（饮用100mg/LNaF并灌胃1μg/gbw/d的CS-SeNps），试验连续处理三个月后，观察小鼠肝脏组织的病理形态，检测肝功能和氧化应激状态、线粒体自噬相关因子和NLRP3炎症小体的表达；（2）以Parkin-/-的C57BL/6雄性小鼠为受试对象，将其分为Cq组（饮用蒸馏水）、Fq组（饮用100mg/LNaF）、Seq组（灌胃1μg/gbw/d的CS-SeNps）、FSeq组（饮用100mg/LNaF并灌胃1μg/gbw/d的CS-SeNps），试验连续处理三个月后，检测小鼠肝脏损伤情况、氧化应激状态、线粒体自噬相关因子表达。 【结果】试验结果如下： （1）野生型小鼠试验结果 1）与C组相比，F组小鼠精神沉郁，活动迟缓，肝脏显微及超微结构损伤显著，肝脏中AST和ALT活性显著增高（*P＜0.05）；与F组相比，FSe组小鼠毛色光亮，且活泼敏捷，肝脏显微及超微结构损伤有所缓解。 2）与C组相比，F组小鼠肝脏MDA（**P＜0.01）、ROS（*P＜0.05）含量显著增高，T-SOD活性显著降低（*P＜0.05）；与F组相比，FSe组小鼠肝脏MDA、ROS含量显著降低（#P＜0.05），GSH-Px活性极显著升高（###P＜0.001）。 3）与C组相比，F组小鼠肝脏PINK1、Atg5、LC3、TAX1BP1、NLRP3、IL-1βmRNA表达水平显著升高（*P＜0.05），Parkin、Atg3、OPTN、P62、IL-18mRNA表达水平极显著升高（**P＜0.01）；与F组相比，FSe组小鼠肝脏LC3、Atg3、Atg5、NLRP3、IL-1β、IL-18mRNA表达水平显著降低（#P＜0.05），ParkinmRNA表达水平极显著降低（##P＜0.01）。 4）F组小鼠肝脏PINK1、Parkin、P62、LC3-Ⅰ、LC3-Ⅱ、ASC、Pro-IL-1β、IL-18蛋白表达水平较C组显著升高（*P＜0.05）；与F组相比，FSe组小鼠肝脏Parkin、P62、LC3-Ⅰ、NLRP3、ASC蛋白表达水平显著降低（#P＜0.05），PINK1、LC3-Ⅱ、Pro-IL-1β蛋白表达水平极显著降低（##P＜0.01）（###P＜0.001）。 （2）Parkin-/-型小鼠试验结果 1）与Cq组相比，Fq组小鼠状态萎靡不振，反应迟钝，肝索排列紊乱，中央静脉周围部分肝细胞局部坏死和肿胀，肝脏中AST和ALT活性无显著变化（P＞0.05）；FSeq组小鼠毛色光亮，且活泼敏捷，肝脏显微中病理现象有所缓解，AST和ALT活性较Fq组也无显著变化（P＞0.05）。 2）Fq组小鼠肝脏中T-SOD水平较Cq组显著降低（*P＜0.05）；与Fq组相比，FSeq组小鼠肝脏中T-SOD（##P＜0.01）、GSH-Px（#P＜0.05）活性显著升高，MDA极显著降低（##P＜0.01）。 3）与Cq组相比，各处理组间线粒体自噬相关基因均无显著变化（P＞0.05）；FSeq组小鼠肝脏Atg3mRNA表达水平较Fq组显著降低（#P＜0.05），其余各处理组无显著变化（P＞0.05）。 4）Fq组小鼠肝脏P62蛋白表达水平较Cq组极显著升高（**P＜0.01）；与Fq组相比，FSeq组小鼠肝脏PINK1、P62、LC3-Ⅰ蛋白表达水平显著降低（#P＜0.05），LC3-Ⅱ蛋白表达水平极显著降低（##P＜0.01）。 【结论】（1）氟暴露可诱导小鼠肝细胞线粒体自噬紊乱、组织与超微结构破坏，激活NLRP3炎症小体，导致小鼠肝脏受损，而1μg/gbw/d的CS-SeNps补充可缓解氟诱导的肝脏损伤。（2）氟化钠通过促进PINK1/Parkin自噬通路中Parkin的表达导致小鼠肝脏线粒体自噬紊乱，CS-SeNps通过降低自噬相关因子表达缓解氟致肝损伤。
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