摘要
细毡毛忍冬是一种落叶藤本植物，属忍冬科，药用功效为清凉解热，抗病毒，保肝利胆。忍冬的药效成分近年来被广泛研究，发现含有多种类型的化合物，主要成分绿原酸在临床上被广泛应用，具有多种生物学功能，如抗氧化、消炎、抑菌等，一直以来忍冬花作为西南地区“金银花”中药材的主要来源，研究指出，细毡毛忍冬的茎叶中同样也含有绿原酸等成分，同样具有广泛的药理作用。但由目前实际生产中还没有充分利用茎叶，导致每年大量的茎叶荒废，造成资源浪费。因此本研究以细毡毛忍冬叶为试验材料，以绿原酸为质量指标，探究其绿原酸提取的最佳工艺，并以该工艺制备得到细毡毛忍冬叶提取物，并研究其对热应激肉鸡生产性能、屠宰性能、肉品质、免疫性能、抗氧化性能以及肠道屏障方面的作用影响，为功能性饲料添加剂或抗生素替代品的研制提供了基础性的支持，具有天然、环保的特点。 1.响应面法优化超声醇提细毡毛忍冬叶绿原酸工艺 在本研究中，由单因素实验确定了细毡毛忍冬叶绿原酸的提取温度，提取时间，液料比的提取中心值是：70℃、60 min、25 mL/g，运用响应面法优化超声醇提工艺，以液料比 25 mL/g、提取时间 62 min、提取温度 71℃为最佳提取工艺条件，该工艺下绿原酸提取率可达到 6.94%。在该提取条件下制备得到的细毡毛忍冬叶提取物中绿原酸的含量 33.22%，总黄酮含量为23.08%，蛋白质含量为2.68%，多酚含量为 5.90%。因此后续采用此方法制备细毡毛忍冬叶提取物用于后续在肉鸡上的实际应用研究。 2.细毡毛忍冬叶提取物对热应激肉鸡生长性能、屠宰性能、肉质指标的影响 此次试验共选取180只1 日龄肉鸡，按每组30只，随机分为 6组。其中1组为空白组（喂食基础饲料，正常温度），1 组为模型组（喂食基础饲料，热应激），3 组为细毡毛忍冬叶提取物组，分别为低、中、高剂量组（饲料中添加 0.05%、0.1%、0.15%的细毡毛忍冬叶提取物，热应激），另一组为阳性对照组（饲料中添加0.1%的杜仲叶提取物，热应激）共计饲喂42天，每隔 7 天对体重进行一次记录，评价屠宰性能和肉类品质，实验第 42 天从每组随机抽取 6 个样本进行解剖测定。结果表明，肉鸡体重和日增重在热应激环境下明显下降，但添加了细毛毡忍冬叶提取物的日粮，对肉鸡体重的影响有有效的缓解作用，提高饲料利用效率，提高生长性能，提高热应激肉鸡胸肌重量，提高适应热应激能力(P＜0.05)，改善肉色。 3.细毡毛忍冬叶提取物对热应激肉鸡免疫性能、抗氧化性能的影响 实验结果表明，热应激环境下，肉鸡脾脏、胸腺、法氏囊指数有差异，血清中HSP-70浓度升高，而免疫球蛋白含量降低。细毡毛忍冬叶提取物和杜仲提取物提高了热应激肉鸡血清中免疫球蛋白含量，且细毡毛忍冬叶提取物效果优于杜仲提取物。另外，研究结果显示，热应激会导致肉鸡的抗氧化能力下降，而添加细毡毛忍冬叶提取物和杜仲提取物可以提高肉鸡血清的总抗氧化能力以及CAT和GPX的酶活力(P＜0.05)。在肠道抗氧化基因mRNA相对转录水平结果表明，细毡毛忍冬叶提取物普遍提高肉鸡SOD、CAT、Nrf2、GSR等抗氧化功能相关基因的mRNA相对转录水平(P＜0.05)。 4.细毡毛忍冬叶提取物对热应激肉鸡肠道组织形态、肠道菌群的影响 添加细毡毛忍冬叶提取物以及杜仲提取物使热应激条件下的肉鸡肠绒毛长度恢复，隐窝深度降低，绒毛长度/隐窝深度（V/C）比值也随之升高，其中0.1%细毡毛忍冬叶提取物效果最好。通过16S 测序技术分析肉鸡盲肠内容物中菌群变化发现，热应激降低了肉鸡盲肠菌群的物种丰富度，使厚壁菌门/拟杆菌门的比值升高，瘤胃球菌属相对丰度增加，添加细毡毛忍冬叶提取物提取物后，肉鸡肠道菌群多样性有所恢复，厚壁菌门/拟杆菌门的比值降低至正常水平，乳杆菌属相对丰度增加，维护了肠道菌群的健康。 综上所述，本研究优化了以绿原酸为主要成分的细毡毛忍冬叶的提取工艺，以提取时间为62 min、提取温度为 71℃、液料比25 mL/g条件，得到实际绿原酸提取率为6.94%。同时将细毡毛忍冬叶提取物饲喂到热应激肉鸡饲料中可以提高肉鸡的生长性能、增强肉鸡的免疫功能、抗氧化应激能力、改善肠道屏障、增加盲肠菌群的丰富度和多样性，为细毡毛忍冬叶的利用提供了理论依据。
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