摘要
增强宿主免疫功能可以预防和抵抗疾病、有效减少抗生素使用，这是一种健康的养殖策略。甲壳动物依赖非特异免疫功能预防和抵抗感染，探究如何提高甲壳动物免疫功能对其病害防控具有重要意义。本研究以克氏原螯虾（Procambarus clarkii）为研究对象，从在体和细胞两个层面研究不同浓度的丹参多糖（Salvia Miltiorrhiza Polysaccharides，SMP）对其免疫相关组织血淋巴、肝胰腺和肠道的影响，从非特异性免疫、抗氧化和微生物菌群角度阐释丹参多糖对虾的免疫功能。主要结果如下： （1）SMP拌料田间投喂克氏原螯虾后，出肉率、THC、吞噬活性和呼吸爆发水平均显著升高，感染弗氏柠檬酸杆菌7天存活率提高了30%，田间试验表明SMP投喂可以提高克氏原螯虾抗感染免疫水平。 （2）0%、0.3%、0.7%、1.1%和 1.5% SMP 的剂量投喂克氏原螯虾后，0.7%、1.1%和 1.5% SMP 组血细胞吞噬活性显著升高，0.3% SMP 组 GST 活性和 ctsb、lamp、mas、lyz 和 ctl 基因表达均显著升高，0.7% SMP 组 ROS 水平和 LZM 活性显著升高。1.1% SMP 组的半颗粒细胞比例显著降低，颗粒细胞比例显著升高。1.5%SMP组呼吸爆发、T-SOD、CAT、GST和酚氧化酶原活性显著升高。血细胞研究结果表明SMP通过促进血细胞识别、形成吞噬小体和吞噬溶酶体，以及促进吞噬溶酶体内的氧化途径和非氧化途径降解颗粒，从而促进吞噬作用。0.3% SMP 组肝胰腺crustin 基因表达量显著升高，0.3 和 0.7% SMP 组 GPT 活性显著降低。0.7% SMP组肝胰腺指数、T-SOD和CAT活性显著升高，GSH活性显著降低。0.7%和1.1% SMP 组T-AOC 活性显著上升。1.1% SMP 组alf 和lyz 基因表达量显著升高。肝胰腺研究结果表明 SMP 通过降低肝胰腺 GPT 酶活性、提高肝胰腺抗氧化能力以及提高免疫相关基因的表达增强免疫功能。0.3% SMP 组肠道 muc-19、crustin 和 ctl 2 基因表达量显著升高，0.7% SMP 组肠褶高度和 CAT 活性显著升高。1.5% SMP组T-AOC、T-SOD和 GST 活性显著升高。0.3% SMP 组 α多样性指数值最高，厚壁菌门和拟杆菌门丰度增加，变形菌门丰度下降。肠道研究结果表明SMP通过促进肠绒毛生长提升物理屏障功能，通过促进免疫相关基因表达提升免疫屏障功能，通过促进有益菌增殖，抑制有害菌增殖，提升微生物屏障功能。 （3）1、2 和 4 mg/mL SMP 体外处理血细胞后，各组吞噬活性、呼吸爆发和酚氧化酶原活性均显著升高，转录组结果揭示差异基因主要富集在内吞作用、吞噬小体和溶酶体信号通路中，提示这三条信号通路可能与 SMP 促进吞噬作用有关。 综上所述，本研究显示丹参多糖可促进克氏原螯虾血细胞吞噬作用、肝胰腺和肠道抗氧化和非特异性免疫，研究结果为丹参多糖在克氏原螯虾养殖中的科学应用提供理论依据和数据参考。
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