摘要
桃仁是桃果实加工过程中的副产物，通常会被作为废弃物遗弃。近些年研究表明桃仁中含有丰富的活性成分，如油酸，亚麻酸，蛋白质，苦杏仁苷等，其中苦杏仁苷的含量约为1.2-2.4 %，是一种新型的农业资源。因苦杏仁苷具有良好的药理活性，自发现以来便受到了众多学者的广泛关注。然而，受某些因素的影响，苦杏仁苷会发生异构化进而导致药理活性的改变，因此如何开展桃仁资源的综合利用值得深入研究。本文探究影响苦杏仁苷异构化的因素，明确不同构型苦杏仁苷的抗肿瘤活性与体外酶解速率差异，以水蜜桃（‘湖景蜜露’）桃仁为原料，基于影响苦杏仁苷异构化的因素来优化桃仁苦杏仁苷的超声波提取和纯化技术，进一步构建海藻酸钠水凝胶珠，包埋苦杏仁苷，以期提高其热稳定性和改善缓释效果。具体研究结果如下： 1. 高温和碱性条件会促进苦杏仁苷的异构化。pH7.0 ，温度高于 40 ℃，或是室温下溶液pHgt;9, 苦杏仁苷均会发生异构化，当苦杏仁苷的pH为2时，即使加热也不会引起异构化。当乙醇浓度超过80 %时，苦杏仁苷也几乎不发生异构化；以塑料离心管或不锈钢瓶作为苦杏仁苷的储存容器能有效避免异构化，玻璃容器会促进苦杏仁苷的异构化，当溶液中硅酸盐的浓度高于50 μM，苦杏仁苷易发生异构化。 2. 体外抗肿瘤细胞试验发现，D-苦杏仁苷与L/D-苦杏仁苷（异构比=1）对人肝癌细胞（HepG2）的生长抑制效果存在较大差异。在给药24 h后，D-苦杏仁苷对 HepG2 细胞的 IC50为 6.370 mg/mL ， L/D-苦杏仁苷对 HepG2 细胞的 IC50为9.138 mg/mL。体外酶解结果表明，β-葡萄糖苷酶对D-苦杏仁苷的酶解速率要大于L-苦杏仁苷。 3.超声波辅助提取桃仁苦杏仁苷，通过单因素与正交试验进行提取工艺参数优化，优化后的提取条件为：乙醇浓度80 %，料液比1：25 g/mL，超声温度40℃，超声功率 432 W。验证试验结果表明，桃仁苦杏仁苷得率为 1.67 %，异构比为0.052。 4. 选取 NKA-9、AB-8、D101和 X-5四种树脂用于桃仁苦杏仁苷的纯化，发现D101树脂的纯化效果最好，其吸附和解吸平衡时间分别为4 h和6 h。乙醇浓度90 %，样品浓度4 mg/mL，吸附速度1 mL/min，解吸附速度为0.5 mL/min时，纯化桃仁苦杏仁苷的效果最好，纯度从58.9 %提高至82.9 %。 5.利用海藻酸钠制备水凝胶珠包埋苦杏仁苷，优化海藻酸钠浓度为2%，获得包埋率为85.93 %，载药率为19.21 %的海藻酸钠-苦杏仁苷水凝胶珠，该条件制备的水凝胶珠直径在4 mm左右，干燥后的水凝胶表面光滑无裂痕。苦杏仁苷经海藻酸钠水凝胶包埋后热稳定性与缓释效果显著提升。
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