摘要
在生猪养殖业中,肠道性疾病严重影响仔猪的生长发育。饲喂猪肠道源益生菌剂对维护仔猪肠道健康具有显著效果,但益生菌的特征及其改善仔猪肠道微生态的作用机制还需深入研究。本研究拟分离猪源乳杆菌,研究其生物学特性并灌服于断奶仔猪,确定其对仔猪肠道微生态的效果及缓解结肠炎的作用机制。以期为养猪业中益生菌剂应用及维护仔猪肠道健康提供参考。 从未使用抗生素的健康成年猪猪粪中分离乳杆菌,确定其生物学特性,选择灌服的乳杆菌。将24头断奶仔猪随机分为4组,分别为C组(无菌水)、T组(约氏乳杆菌)、CD 组(无菌水+DSS)、TD 组(约氏乳杆菌+DSS),其中 T 组、TD 组在试验第1~30天灌服约氏乳杆菌,CD组和TD组第31~37天使用右旋糖酐硫酸钠(DSS)诱导仔猪结肠炎;第 38 天进行屠宰,采集血清测定免疫和抗氧化指标,采集结肠内容物进行宏基因组学、代谢组学分析。 本研究所获主要结果如下: (1)成功分离出 4 株猪源乳杆菌,分别为约氏乳杆菌 ZLgz1227、嗜酸乳杆菌HYgz0212、香肠乳杆菌 KNgz0128、敏捷乳杆菌 SYgz1119;其中 ZLgz1227 耐胆盐性能最强,过胃存活率分别比菌株 HYgz0212、KNgz0128、SYgz1119 高 110.56%、44.3%和4.98%,综合性能最优。 (2)与C组相比,灌服约氏乳杆菌的 T组仔猪日增重(247.42 ± 13.01g)显著增加了 23.97%(Plt;0.05),腹泻率显著降低至 1.33%(Plt;0.05)。T组、TD组仔猪血液中 IL-10、SOD 含量显著高于 C 组和 CD 组(Plt;0.05),IL-1β、IL-6、TNF-α 和MDA含量等指标显著低于 C组、CD组(Plt;0.05);T组仔猪十二指肠绒毛长度提高,隐窝深度降低。DSS诱导结肠炎时,TD组炎症程度轻,CD组病变严重。 (3)T组乳杆菌属丰度显著高于C组、CD组、TD组(Plt;0.05)。T组动物双歧杆菌等丰度显著高于 C 组(Plt;0.05);TD 组动物联合乳杆菌、解没食子酸链球菌等丰度显著高于 CD 组(Plt;0.05)。T 组结肠菌群氨基酸代谢、糖代谢的功能显著强于C组(Plt;0.05);TD组结肠菌群氨基酸代谢功能显著强于CD组(Plt;0.05)。 (4)TD 组 β-亮氨酸、紫苏醇、姜辣素、脱氧胆酸、酮戊二酸等代谢物浓度显著高于 CD 组(Plt;0.05); TD 组代谢物在胆汁分泌、氨基酸生物合成等代谢通路显著富集(Plt;0.05)。 (5)结肠中多形拟杆菌、脆弱拟杆菌等的丰度与 IL-10、IgA、IgG、SOD、GSH-PX显著正相关(Plt;0.05),与 MDA、IFN-γ显著负相关(Plt;0.05);巴黎链球菌、嗜热链球菌与菌群天冬氨酸、苏氨酸代谢功能显著正相关(Plt;0.05);脆弱拟杆菌、解没食子酸链球菌与β-亮氨酸、紫苏醇、酮戊二酸等含量显著正相关(Plt;0.05)。 综上所述,约氏乳杆菌 ZLgz1227能通过改变仔猪结肠菌群结构、优化菌群功能、调控菌群代谢产物从而缓解仔猪结肠炎,具有维护仔猪肠道健康的巨大潜力。