摘要
第一部分阿司匹林与颈动脉粥样硬化斑块稳定性的相关性分析 目的：本部分研究旨在探究阿司匹林在治疗颈动脉斑块中的具体影响，揭示阿司匹林和患者斑块稳定性的关系及阿司匹林对患者术后出现缺血性脑卒中的影响。 方法：选取我院 2021 年 6 月至 2023 年 3 月收治的长期口服阿托伐他汀钙的颈动脉狭窄需行颈动脉内膜剥脱术的患者，根据患者入院时自诉入院前是否同时口服阿司匹林大于3个月分为对照组（患者口服阿司匹林≤3 个月或未口服阿司匹林定义为阿托伐他汀组共 35 例）及治疗组（患者口服阿司匹林＞3个月定义为阿托伐他汀+阿司匹林组共35例）两组。比较两组一般资料、阿托伐他汀钙治疗时长、术后剥离斑块的稳定斑块数、术后1个月新发缺血性脑卒中发生率。对符合正态分布的计量数据，采用独立样本t检验行统计学分析，对不符合正态分布的计量数据行Wilcoxon秩和检验。对计数数据的组间比较为卡方检验。 结果：共70例患者入选本项研究，其中对照组35例，治疗组35例。经统计学分析，两组患者在一般资料、阿托伐他汀钙治疗时长方面无统计学差异，但治疗组术后剥离斑块的稳定斑块数显著高于对照组（P＜0.05），对照组术后1个月新发缺血性脑卒中的发生率显著高于治疗组（P＜0.05）。 结论：阿司匹林有助于增强阿托伐他汀稳定动脉粥样硬化斑块的作用，并降低颈动脉内膜剥脱术后新发缺血性脑卒中的发生率。 第二部分阿司匹林对动脉粥样硬化斑块中铁死亡相关基因的影响及铁死亡对斑块稳定性的影响 目的：本研究旨在探究阿司匹林对动脉粥样硬化斑块的调控作用，阐明阿司匹林对动脉粥样硬化斑块中铁死亡基因的具体影响并揭示铁死亡与斑块稳定性的关系。 方法： 1. 将颈动脉硬化性狭窄患者根据治疗方法分为阿托伐他汀钙组、阿托伐他汀钙+阿司匹林组，比较两组患者动脉粥样硬化斑块中细胞外基质蛋白（FN、Col-1）、斑块组织病理学、铁死亡相关基因（GPX4、SLC7A11、COX-2）的差异、氧化应激指标（ROS、MDA、SOD、GSH）、Fe2+含量。 2. 根据术后剥离斑块稳定性将患者分为易损斑块组及稳定斑块组，比较两组患者动脉粥样硬化斑块中细胞外基质蛋白（FN、Col-1）、斑块组织病理学、铁死亡相关基因的差异、氧化应激指标、Fe2+含量。采用独立样本t检验行统计学分析。 结果：阿托伐他汀钙组共35例，阿托伐他汀钙+阿司匹林组共35例。与阿托伐他汀钙组相比，阿托伐他汀钙+阿司匹林组 FN 及 Col-1 上调（P＜0.05），斑块中钙盐积聚、胶原沉积、炎性浸润等现象有所缓解， MDA、ROS及Fe2+水平显著降低，GSH及SOD显著升高，GPX4、SLC7A11蛋白水平升高（P＜0.05），COX-2蛋白水平降低（P＜0.05）。 易损斑块组共31例，稳定斑块组共39例。与稳定斑块组相比，易损斑块FN及Col-1下调（P＜0.05），斑块中钙盐积聚、胶原沉积、炎性浸润等加剧，MDA、ROS、Fe2+水平显著升高，GSH及SOD显著降低，GPX4及SLC7A11蛋白下调（P＜0.05），COX-2蛋白上调（P＜0.05）。 结论：在阿托伐他汀治疗颈动脉粥样硬化过程中，阿司匹林有助于上调细胞外基质蛋白，减少斑块钙化、胶原沉积、炎性浸润，并有效地的抑制了动脉粥样斑块中铁死亡的发生，从而促进斑块稳定，并降低易损斑块形成率。 第三部分体外实验研究阿司匹林及阿托伐他汀钙对血管内皮细胞及平滑肌细胞铁死亡的影响及机制研究 目的：本研究旨在证实阿司匹林对血管内皮细胞及血管平滑肌细胞中铁死亡的调控作用，明确阿司匹林通过抑制铁死亡调控细胞的生长及存活，从而促进斑块稳定的作用机制。 方法：取血管内皮细胞及血管平滑肌细胞，采用氧化低密度脂蛋白（oxLDL）诱导细胞以建立动脉粥样硬化细胞模型，对 oxLDL诱导的细胞分别给予阿司匹林、阿托伐他汀、铁死亡抑制剂 Fer-1、阿托伐他汀+阿司匹林治疗。为研究oxLDL对细胞铁死亡的影响，采用铁死亡激动剂Erastin-1 处理正常细胞以诱导铁死亡，并在此基础上分别给予阿司匹林、阿托伐他汀、阿托伐他汀钙+阿司匹林。观察各组细胞活力、线粒体膜电位、氧化应激指标（MDA、GSH、SOD）、ROS含量、铁死亡相关基因（GPX4、FTH1、SLC7A11、COX-2）的变化。采用单因素方差分析进行组间比较，事后两两比较为Turkey检验。 结果：oxLDL 导致内皮细胞活力、GSH、SOD、线粒体膜电位均显著降低（P＜0.05），引起MDA、ROS升高（P＜0.05）。此外，oxLDL还引起内皮细胞中GPX4、SLC7A11、FTH-1表达降低（P＜0.05），COX-2升高（P＜0.05）。与oxLDL 组相比，oxLDL+阿托伐他汀钙组、oxLDL+阿司匹林组、oxLDL+阿司匹林+阿托伐他汀钙组引起内皮细胞活力、GSH、SOD、线粒体膜电位升高（P＜0.05），MDA 及 ROS 降低（P＜0.05）， GPX4、SLC7A11、FTH-1表达上调（P＜0.05），COX2表达下调（P＜0.05）。与oxLDL+阿托伐他汀钙组相比，oxLDL+阿司匹林+阿托伐他汀钙组内皮细胞活力、GSH、SOD、线粒体膜电位升高（P＜0.05），MDA及ROS降低（P＜0.05），GPX4、SLC7A11、FTH-1 表达上调（P＜0.05），COX2表达下调（P＜0.05）。 oxLDL 导致平滑肌细胞 GSH、SOD、线粒体膜电位均显著降低（P＜0.05），引起细胞活力、MDA、ROS升高（P＜0.05）。此外，oxLDL还引起平滑肌细胞中GPX4、SLC7A11、FTH-1表达降低（P＜0.05），COX-2升高（P＜0.05）。与oxLDL 组相比，oxLDL+阿托伐他汀钙组、oxLDL+阿司匹林组、oxLDL+阿司匹林+阿托伐他汀钙组引起 GSH、SOD、线粒体膜电位升高（P＜0.05），细胞活力、MDA、ROS降低（P＜0.05），GPX4、SLC7A11、FTH-1表达上调（P＜0.05），COX2表达下调（P＜0.05）。与oxLDL+阿托伐他汀钙组相比，oxLDL+阿司匹林+阿托伐他汀钙组平滑肌中 GSH、SOD、线粒体膜电位升高（P＜0.05），细胞活力、MDA、ROS降低（P＜0.05），GPX4、SLC7A11、FTH-1表达上调（P＜0.05），COX2表达下调（P＜0.05）。 结论：阿司匹林可通过抑制铁死亡逆转oxLDL诱导的血管内皮细胞死亡，并抑制oxLDL诱导的血管平滑肌细胞增殖，这一调控机制有助于减轻动脉粥样硬化及促进动脉粥样硬化斑块的稳定。
NETL