摘要
根结线虫(Meloidogyne spp.)在全世界普遍发生,严重危害经济作物、粮食作物等农作物的安全生产,在很多设施栽培中根结线虫已成为最主要的病害。淡紫拟青霉(Paecilomyces lilacinus),异名淡紫紫孢菌(Purpureocillium lilacinum),是一类重要的生防真菌,该菌能够寄生病原线虫的卵和雌虫,毒杀二龄幼虫,同时对多种植物病原真菌也具有较强的拮抗作用。目前,淡紫拟青霉已实现商业化生产,剂型包括颗粒剂、粉剂、可湿性粉剂和水剂等,但其主要成分都是分生孢子和菌丝,存在抗逆性差和货架期短等缺点。前期研究发现,在特定的培养条件下淡紫拟青霉可形成抗性繁殖体—微菌核(Microsclertia)。微菌核是丝状真菌度过不良环境的一种抗性结构,可大幅提高生防真菌的稳定性,延长货架期。为了获得高质量的淡紫拟青霉微菌核,本研究在实验室前期研究的基础上,优化了淡紫拟青霉微菌核发酵工艺,并筛选了载体和助剂,研发出淡紫拟青霉微菌核混悬颗粒剂,通过温室大棚试验明确了菌剂的作用效果。本研究为研发高效稳定的真菌生防制剂提供了理论依据,对植物病害的绿色防控和农产品安全生产具有重要意义。本研究主要结果如下: 1.优化了淡紫拟青霉微菌核的发酵工艺。通过改变培养基中的碳氮比(C/N)、不同氮源配比和无机盐的种类与浓度,测定其对微菌核的影响。结果表明,碳氮比为 20∶1、酵母粉:豆饼粉为 7.5∶1、FeSO4·7H2O 0.4 g/L、CaCl2 0.6 g/L、ZnSO4·7H2O 0.8 g/L 时,微菌核数量最多,可达到 7.8×104 MS/mL。通过配方和工艺优化,微菌核产量提高 2 倍以上,结构更为紧实。 2.研制了淡紫拟青霉微菌核混悬颗粒剂。通过生物兼容性测定,确定了最佳的制剂配方:稳定剂为1%的羧甲基纤维素钠,黏着剂为0.5%的可溶性淀粉,润湿剂为0.5%的Wet-07,分散剂为1.5%的SF-S06,增效剂为0.2%的海藻酸钠,以淀粉为载体并常温存贮12个月后,淡紫拟青霉微菌核制剂存活率可达到89%。 3.通过温室大棚试验证明淡紫拟青霉微菌核制剂能够有效控制根结线虫,并具有促生增产的作用。当微菌核制剂施用量为 6000 MS/g 时,对线虫的防效最高,可达到 87.3%,土壤中线虫数量减少96.0%。此外,施用淡紫拟青霉及其复合制剂还可以显著促进番茄生长,增加叶面积,产量提高11.1%~41.3%。