摘要
随着我国进入“饲料无抗”时代，植物源饲料添加剂的开发已成为市场和研究的热点。石香薷[Mosla chinensis Maxim]是唇形科石荠苎属植物之一，既是《中华人民共和国药典》（2020版）收录的药材，又是农业农村部颁布的《饲料原料品种目录》中117种其他可饲用天然植物之一。目前，石香薷的研究主要集中在其挥发油成分上，而对其他成分的研究较少。提取完精油后的植物余料常被视为废液或废渣处理，但该部分仍含有黄酮、酚酸类等活性物质，是基于资源综合利用策略，开发植物源饲料添加剂产品的潜在资源。因此，本研究旨在优化石香薷提取物（MCE）提取工艺，进行质量控制研究，并初步评估其对白羽肉鸡生长性能、屠宰率、肉品质、免疫功能、抗氧化能力的影响及对肠道微生物的调控作用，以探究石香薷提取物作为饲料添加剂开发的可行性，具体内容和结果如下: 1.在单因素试验基础上，通过正交试验优化了石香薷提取精油后对剩余物的提取工艺，考察了浸泡时间、液料比、提取次数、提取时间四个因素对石香薷提取物的精油得率、浸膏得率、迷迭香酸提取率及总黄酮含量的影响。结果表明，石香薷提取物最佳提取工艺条件为浸泡2小时，料液比1∶20（g∶mL）,提取3次，第一次提取时间为60min,第二次和第三次提取时间各30min。试验得到的石香薷提取物提取工艺稳定可行，在分离精油的同时能够对余料进行综合利用获得其他活性组分。 2.通过DPPH自由基清除率和ABTS法、FRAP法的总抗氧化能力的测定，且以相同浓度的Vc为阳性对照，来评价石香薷提取物的体外抗氧化活性。石香薷提取物浓度为62.5 μg/mL时与浓度为6.250 μg/mL的VC对DPPH清除率相当;石香薷提取物在浓度为1.00 mg/mL时，Vc浓度为0.125 mg/mL时，两者对FRAP的还原抗氧化能力相当;Vc与石香薷提取物对ABTS自由基的清除率基本相同。表明石香薷提取物具有良好的体外抗氧化活性，可作为潜在的天然抗氧化资源进行综合开发利用。 3.建立了石香薷提取物的HPLC特征图谱，保障了其质量的可控性和规范性。确定了 8个特征峰，指认迷迭香酸作为参照峰，计算了各特征峰的相对保留时间，且相对保留时间RSD均小于3％,符合规定要求。按国标要求对石香薷提取物进行质量标准研究，根据24批样品测定的初步结果确定石香薷提取物中:水分含量不超过10％，总灰分含量不超过25％，重金属镉≤0.2mg/kg、汞≤0.006μg/kg、砷≤0.6mg/kg、铅≤0.5mg/kg,黄曲霉素B1≤3.36μg/kg，迷迭香酸含量不低于0.124％,野黄芩苷含量不得低于0.097％,霉菌总数≤10CFU/g，沙门氏菌不得检出。该研究建立的HPLC特征图谱具有良好的精密度、稳定性和重复性，能够为石香薷提取物的质量控制提供依据，为石香薷的资源综合利用和新饲料添加剂的开发奠定前期研究基础。 4.考察肉鸡日粮中添加不同水平的石香薷提取物（C组:0mg/kg、S1组:500 mg/kg、S2组:1000mg/kg、S3组:2000mg/kg）对白羽肉鸡生产性能、免疫性能、肠道健康等的影响，结果如下: 1）.生长性能、肉品质、屠宰率、器官指数、血清生化指标等:与C组相比，S3组的平均日增重在22～42日龄和1～42日龄中显著升高（P＜0.05）;MCE对肉鸡屠宰率、全净膛率、半净膛率、胸肌和腿肌率有提高趋势，无显著差异（P＞0.05）。对于器官指数，S2组、S3组肾脏指数显著提高（P＜0.05）。各剂量组与C组相比，胸肌和腿肌在pH45min均有显著差异（P＜0.01）;对腿肌剪切力、蒸煮损失、肉色黄度值均有显著性差异（P＜0.05）。对于血清生化，各剂量组中ALT、GLB浓度降低（P＜0.01），ALB、HDL-C浓度显著提高（P＜0.01）。试验结果显示，饲料中添加一定剂量MCE能提高肉鸡的生产性能。 2）.抗氧化能力、免疫因子及肠道健康指标:相较于C组，三个剂量组的肝脏和血清GSH-PX活性均显著提高（P＜0.05）。MCE对肉鸡血清免疫因子的影响与C组相比，IgA、IgM、IL-4、IL-10和IFN-γ水平均显著提高（P＜0.05）。此外，MCE还能提高肉鸡紧密连接蛋白相关基因的表达量;对于肠道微生物，前肠菌群以厚壁菌门、变形菌门和放线菌门为主，后肠内容物主要包含厚壁菌门、拟杆菌门、变形菌门、脱硫杆菌门和蓝藻门，且后肠微生物门属种类比前肠多;与C组相比，后肠菌群的Alpha多样性指数和Beta多样性指数均差异显著（P＜0.05）。表明在饲料中添加MCE能在一定程度上提高肉鸡免疫力、改善肠道健康及菌群组成。 综上所述，通过提取工艺优化、质量标准制定研究以及对肉鸡有效性初步评价研究结果表明，石香薷提取物有开发成饲料添加剂的价值。
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