期刊,吉林大学学报（医学版） 2024年卷6期_国家学术搜索

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期刊信息/Journal information

吉林大学学报（医学版）

吉林大学

主办单位：吉林大学

主　　编：李玉林

出版周期：双月刊

国际刊号：1671-587X

电子邮箱：xuebao@jlu.edu.cn

电　　话：0431-85619278

邮政编码：130021

地　　址：吉林省长春市新民大街828号

吉林大学学报（医学版）/Journal Journal of Jilin University(Medicine Edition)CSCD北大核心CSTPCD

查看更多>>本刊是由教育部主管、吉林大学主办的综合性医药卫生类学术期刊。办刊宗旨是遵循党和国家的办刊政策及法规，报道医学科学研究的新理论、新方法和新技术,不断促进医学科学的发展和国内外学术交流。本刊创刊于1959年，在发展过程中提高办刊质量。本刊已被多家国内外著名的检索机构及数据库收录。本刊国内外公开发行，国外代号BM4177，国内代号12-23，10元/期，全年6期，全国各地邮局均可订阅。

正式出版

收录年代

香叶木素对RSL3诱导小鼠精母细胞GC-2铁死亡的抑制作用及其机制

马宝莲胡晓雪艾霄文张永兰...

1481-1490页

查看更多>>摘要：目的:探讨香叶木素(DIO)对谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)抑制剂(1S,3R)-RSL3(RSL3)诱导小鼠精母细胞GC-2铁死亡的抑制作用,并阐明相关作用机制.方法:GC-2细胞分为对照组、RSL3组、RSL3+0.8 nmol·L-1 DIO组、RSL3+4.0 nmol·L-1 DIO组、RSL3+20.0 nmol·L-1 DIO组和RSL3+铁死亡抑制剂Ferrostain-1(Fer-1)组(200 nmol·L-1 Fer-1).分别采用 0、1、5、10、50、100、500 和 1 000 nmol·L-1 RSL3 溶液及 0、0.1、0.5、1.0、5.0、10.0 和 50.0 μmol·L-1 DIO溶液处理细胞.另取GC-2细胞,分为空白组、模型组和给药组,给药组GC-2细胞按照处理方式分为 0.8、4.0和 20.0 nmol·L-1 DIO组及RSL3+0.8 nmol·L-1 DIO组、RSL3+4.0 nmol·L-1 DIO组和RSL3+20.0 nmol·L-1 DIO组.噻唑蓝(MTT)法检测各组GC-2细胞存活率.采用100 nmol·L-1 RSL3分别作用GC-2细胞0、6、12、24、36和48 h,Western blotting法检测各组GC-2细胞中铁死亡相关蛋白表达水平.试剂盒检测各组GC-2细胞中超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)水平及谷胱甘肽(GSH)/氧化型谷胱甘肽(GSSG)比值,免疫荧光法观察各组GC-2细胞中酰基辅酶A合成酶长链家族成员4(ACSL4)蛋白荧光强度.结果:MTT法检测,与0 nmol·L-1 RSL3组比较,50、100、500 和 1 000 nmol·L-1 RSL3 组GC-2 细胞存活率均明显降低(P<0.01);与 0 μmol·L-1 DIO组比较,0.5、1.0、5.0、10.0和50.0 μmol·L-1 DIO组GC-2细胞存活率均明显降低(P<0.01),后续实验中选择100 nmol·L-1 RSL3作用GC-2细胞,DIO作用浓度<0.1 μmol·L-1.与空白组比较,模型组GC-2细胞存活率明显降低(P<0.01);与模型组比较,RSL3+20.0 nmol·L-1 DIO组细胞存活率明显升高(P<0.01).Western blotting法检测,与0 h比较,RSL3作用6 h时GC-2细胞中GPX4蛋白表达水平明显降低(P<0.01),RSL3作用12 h时GC-2细胞中HO-1蛋白表达水平明显升高(P<0.05),GPX4和FTH1蛋白表达水平均明显降低(P<0.05或P<0.01),RSL3作用24 h时GC-2细胞中GPX4和HO-1蛋白表达水平明显降低(P<0.05或P<0.01),RSL3作用36和48 h时GC-2细胞中HO-1蛋白表达水平均明显降低(P<0.01);将100 nmol·L-1 RSL3作用GC-2细胞12 h作为后续实验条件.与对照组比较,RSL3组GC-2细胞中MDA水平明显升高(P<0.01),SOD活性和GSH/GSSG比值均明显降低(P<0.05);与RSL3组比较,RSL3+0.8 nmol·L-1 DIO组、RSL3+4.0 nmol·L-1 DIO组、RSL3+20.0 nmol·L-1 DIO组和RSL3+Fer-1 组GC-2 细胞中SOD活性均明显升高(P<0.05或P<0.01),RSL3+20.0 nmol·L-1 DIO组和RSL3+Fer-1组GC-2细胞中MDA水平均明显降低(P<0.05或P<0.01),RSL3+4.0 nmol·L-1 DIO组、RSL3+20.0 nmol·L-1 DIO组和RSL3+Fer-1组GC-2细胞中GSH/GSSG比值均明显升高(P<0.05或P<0.01).免疫荧光法观察,与对照组比较,RSL3组GC-2细胞中ACSL4蛋白荧光强度明显增强;与RSL3组比较,RSL3+0.8 nmol·L-1 DIO组、RSL3+4.0 nmol·L-1 DIO组、RSL3+20.0 nmol·L-1 DIO组和RSL3+Fer-1组GC-2细胞中ACSL4蛋白荧光强度均明显减弱.Western blotting法检测,与对照组比较,RSL3组GC-2细胞中HO-1蛋白表达水平升高(P<0.05),GPX4和FTH1蛋白表达水平均明显降低(P<0.05或P<0.01);与RSL3组比较,RSL3+0.8 nmol·L-1 DIO组、RSL3+4.0 nmol·L-1 DIO组、RSL3+20.0 nmol·L-1 DIO组和RSL3+Fer-1组GC-2细胞中HO-1蛋白表达水平均明显降低(P<0.05或P<0.01),GPX4和FTH1蛋白表达水平均明显升高(P<0.05或P<0.01).结论:DOI能够减轻RSL3诱导的小鼠精母细胞GC-2铁死亡,其机制可能与抑制HO-1蛋白表达,上调GPX4和FTH1蛋白表达有关.

关键词：

铁死亡香叶木素小鼠精母细胞GC-2谷胱甘肽过氧化酶4铁蛋白重链1酰基辅酶A合成酶长链家族成员4

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万方数据

抑制miR-193a-5p表达对急性呼吸窘迫综合征大鼠肺纤维化的改善作用及其机制

龙光文张谦杨秀林孙鸿鹏...

1491-1498页

查看更多>>摘要：目的:探讨抑制微小RNA(miR)-193a-5p表达对急性呼吸窘迫综合征(ARDS)大鼠肺纤维化的影响,并阐明相关作用机制.方法:60只雄性SD大鼠分为假手术组、模型组、miR-193a-5p拮抗剂组(Antagomir组)和阴性对照组(Antagomir-NC组),每组15只.采用暴露气管法滴注10 mg·kg-1脂多糖(LPS)诱导构建 ARDS大鼠模型,假手术组大鼠滴注等体积生理盐水,造模成功后Antagomir组和Antagomir-NC组大鼠给予miR-193a-5p Antagomir或Antagomir-NC尾静脉注射.测定各组大鼠动脉血氧分压(PaO2)和氧合指数(OI),HE和Masson染色观察各组大鼠肺组织病理形态表现及肺组织中胶原纤维沉积情况,试剂盒检测各组大鼠肺组织中羟脯氨酸(Hyp)水平,酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测各组大鼠肺泡灌洗液(BALF)中炎性因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β和IL-6水平,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测各组大鼠肺组织中miR-193a-5p表达水平,Western blotting法检测各组大鼠肺组织中β连环蛋白(β-catenin)、蜗牛家族转录抑制因子1(Snail1)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)蛋白表达水平.结果:与假手术组比较,模型组大鼠PaO2和OI均明显降低(P<0.05);与模型组比较,Antagomir组大鼠PaO2 和OI均明显升高(P<0.05).HE染色观察,假手术组大鼠肺组织结构正常,未见明显的炎性改变;与假手术组比较,模型组和Antagomir-NC组大鼠肺组织结构轻度异常,肺泡萎缩塌陷,肺泡腔内发现有大量的淋巴细胞和少量的中性粒细胞浸润,肺泡间隙增宽;与模型组比较,Antagomir组大鼠肺组织的肺泡腔内淋巴细胞明显减少,中性粒细胞浸润较少,未见明显增生.Masson染色观察,假手术组大鼠肺组织无明显蓝色胶原纤维沉积;与假手术组比较,模型组和Antagomir-NC组大鼠肺组织中出现大量蓝色胶原纤维沉积,肺泡结构损坏严重,呈现明显的肺纤维化情况;与模型组比较,Antagomir组大鼠肺组织黏液中蓝色染色的胶原纤维沉积明显减少.与假手术组比较,模型组大鼠肺组织中Hyp水平明显升高(P<0.05);与模型组比较,Antagomir组大鼠肺组织中Hyp水平明显降低(P<0.05).ELISA法检测,与假手术组比较,模型组大鼠BALF中TNF-α、IL-1β和IL-6水平均明显升高(P<0.05);与模型组比较,Antagomir组大鼠BALF中TNF-α、IL-1β和IL-6水平均明显降低(P<0.05).RT-qPCR法检测,与假手术组比较,模型组大鼠肺组织中miR-193a-5p表达水平明显升高(P<0.05);与模型组比较,Antagomir组大鼠肺组织中miR-193a-5p表达水平明显降低(P<0.05).Western blotting法检测,与假手术组比较,模型组大鼠肺组织中β-catenin、Snail1和α-SMA蛋白表达水平均明显升高(P<0.05);与模型组比较,Antagomir组大鼠肺组织中β-catenin、Snail1和α-SMA蛋白表达水平均明显降低(P<0.05).结论:抑制miR-193a-5p表达可通过降低肺组织炎症反应和下调β-catenin、Snail1及α-SMA等蛋白表达,改善ARDS大鼠肺功能和肺纤维化.

关键词：

微小RNA-193a-5p急性呼吸窘迫综合征肺纤维化Wnt/β-catenin信号通路

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万方数据

草苁蓉多糖对THP-1巨噬细胞炎症反应的抑制作用及其机制

马新月徐慧刁佳雯金爱花...

1499-1511页

查看更多>>摘要：目的:探讨草苁蓉多糖(BRPS)对脂多糖(LPS)诱导的THP-1巨噬细胞炎症反应的影响,并阐明其作用机制.方法:将THP-1单核细胞分化为巨噬细胞,采用LPS诱导THP-1巨噬细胞,建立炎症模型.CCK-8法检测不同浓度(0、100、200、500、1 000和2 000 μg·L-1)LPS及不同浓度(0、12.5、25.0、50.0、100.0和 200.0 mg·L-1)BRPS处理后THP-1巨噬细胞存活率,选取后续实验药物浓度.将THP-1巨噬细胞分为空白组、模型组、低剂量BRPS组(25.0 mg·L-1 BRPS)、中剂量BRPS组(50.0 mg·L-1 BRPS)和高剂量BRPS组(100.0 mg·L-1 BRPS).采用P38 抑制剂SB203580、ERK抑制剂U0126、c-Jun氨基末端激酶(JNK)抑制剂SP600125和核因子κB(NF-κB)抑制剂BAY11-7082对THP-1细胞进行验证.另取THP-1细胞,分为对照组、LPS组、抑制剂组、100.0 mg·L-1 BRPS组和抑制剂+100.0 mg·L-1 BRPS组.酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测各组THP-1巨噬细胞培养液中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-6和IL-1β水平,2,7-二氯荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)荧光探针法检测各组 THP-1 巨噬细胞中活性氧(ROS)水平,Hoechst33342/PI荧光染色法观察各组THP-1巨噬细胞膜损伤情况,JC-1荧光染色法观察各组THP-1巨噬细胞线粒体膜电位,蛋白印迹法检测各组THP-1巨噬细胞中环氧合酶2(COX-2)、高迁移率族蛋白B1(HMGB1)、NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白酶(Caspase)-1、消皮素D(GSDMD)-N、IL-1β、丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)和NF-κB相关蛋白表达水平.结果:CCK-8法检测,LPS浓度为100～2 000 μg·L-1时,THP-1巨噬细胞存活率均>90%;与0 μg·L-1 LPS组比较,100、200、500、1 000和2 000 μg·L-1 LPS组THP-1巨噬细胞培养液中IL-6水平均明显升高(P<0.05),提示巨噬细胞炎症反应明显增强,因此选用100 μg·L-1 LPS构建炎症模型;12.5、25.0、50.0、100.0和200.0 mg·L-1 BRPS处理THP-1巨噬细胞,THP-1巨噬细胞存活率分别为91.2%、93.8%、91.4%、90.6%和91.8%,选取25.0、50.0和100.0 mg·L-1 BRPS作为后续实验中低、中和高剂量BRPS组药物浓度.ELISA法检测,与空白组比较,模型组THP-1巨噬细胞培养液中IL-6、TNF-α和IL-1β水平均明显升高(P<0.05);与模型组比较,低、中和高剂量BRPS组THP-1巨噬细胞培养液中IL-6、TNF-α和IL-1β水平均明显降低(P<0.05).DCFH-DA荧光探针法检测,与空白组比较,模型组THP-1巨噬细胞中ROS水平明显升高(P<0.05);与模型组比较,低、中和高剂量BRPS组THP-1巨噬细胞中ROS水平均明显降低(P<0.05).Hoechst33342/PI荧光染色法观察,与空白组比较,模型组THP-1巨噬细胞膜损伤程度明显增加;与模型组比较,低、中和高剂量BRPS组THP-1 巨噬细胞膜损伤程度明显减少.JC-1 荧光染色法观察,空白组THP-1巨噬细胞线粒体膜电位较高;与空白组比较,模型组THP-1巨噬细胞线粒体跨膜电位明显降低;与模型组比较,低、中和高剂量BRPS组THP-1巨噬细胞线粒体跨膜电位逐渐升高.蛋白印迹法检测,与空白组比较,模型组THP-1巨噬细胞中COX-2、HMGB1、NLRP3、Caspase-1、GSDMD-N和IL-1β蛋白表达水平及p-P38/P38、p-ERK/ERK、p-JNK/JNK和p-NF-κB/NF-κB比值均明显升高(P<0.05);与模型组比较,中和高剂量BRPS组THP-1巨噬细胞中HMGB1、NLRP3、Caspase-1、GSDMD-N和IL-1β蛋白表达水平及p-P38/P38、p-ERK/ERK、p-JNK/JNK和p-NF-κB/NF-κB比值均明显降低(P<0.05),低剂量BRPS组THP-1巨噬细胞中NLRP3、Caspase-1和IL-1β蛋白表达水平均明显降低(P<0.05),高剂量BRPS组THP-1巨噬细胞中COX-2蛋白表达水平明显降低(P<0.05);与对照组比较,LPS组THP-1巨噬细胞p-P38/P38、p-ERK/ERK、p-JNK/JNK和p-NF-κB/NF-κB比值及IL-1β蛋白表达水平均明显升高(P<0.05);与LPS组比较,抑制剂组、100 mg·L-1 BRPS组和抑制剂+100 mg·L-1 BRPS组THP-1 巨噬细胞中p-P38/P38、p-ERK/ERK、p-JNK/JNK和p-NF-κB/NF-κB比值及IL-1β蛋白表达水平均明显降低(P<0.05);与抑制剂组比较,抑制剂+100 mg·L-1 BRPS组THP-1巨噬细胞p-P38/P38、p-ERK/ERK、p-JNK/JNK和p-NF-κB/NF-κB比值均明显降低(P<0.05).结论:BRPS抑制THP-1细胞巨噬细胞的炎症反应,其机制可能与BRPS调控MAPK和NF-κB信号通路有关.

关键词：

草苁蓉多糖NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3丝裂原活化蛋白激酶核因子κB焦亡

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万方数据

大黄酚对H2O2诱导EA.hy926细胞凋亡的改善作用及其机制

李思琪陈广道曾其毅

1512-1518页

查看更多>>摘要：目的:探讨大黄酚对过氧化氢(H2O2)诱导EA.hy926细胞氧化损伤的作用,并阐明其对支气管肺发育不良(BPD)的治疗作用及其相关机制.方法:分别采用25、50、100、200、400、800和1 600 μmol·L-1 H2O2及0、8、16、32、64、128和256 μmol·L-1大黄酚诱导EA.hy926细胞,CCK-8法检测不同浓度H2O2和大黄酚处理后EA.hy926细胞活性.将细胞分为对照组、模型组(200 μmol·L-1 H2O2)、低剂量大黄酚组(8 μmol·L-1大黄酚和200 μmol·L-1 H2O2)和高剂量大黄酚组(256 μmol·L-1大黄酚和200 μmol·L-1 H2O2).Western blotting法检测各组细胞质和细胞核中凋亡诱导因子(AIF)蛋白表达水平,免疫荧光法检测各组细胞AIF核转位情况,试剂盒检测各组细胞中超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白酶(Caspase)-8及Caspase-9水平.结果:不同浓度H2O2 作用下,EA.hy926细胞呈倒置S形细胞活性曲线,细胞活性良好,半数抑制浓度(IC50)为261.52 μmol·L-1,采用200 μmol·L-1 H2O2 干预24 h诱导建立细胞模型.随着大黄酚药物浓度升高,EA.hy926细胞活性无明显变化(P>0.05),采用 8和 256 μmol·L-1 大黄酚进行细胞干预.Western blotting法检测,与对照组比较,模型组细胞核中AIF蛋白表达水平明显升高(P<0.05),细胞质中AIF蛋白表达水平明显降低(P<0.05);与模型组比较,低和高剂量大黄酚组细胞核中AIF蛋白表达水平均明显降低(P<0.05),细胞质中AIF蛋白表达水平均明显升高(P<0.05).免疫荧光法检测,对照组细胞AIF定位于细胞核内较少;与对照组比较,模型组细胞AIF核转位阳性值明显升高(P<0.05);与模型组比较,低和高剂量大黄酚组细胞AIF核转位阳性值均明显降低(P<0.05).与对照组比较,模型组细胞中SOD活性明显降低(P<0.05),MDA水平明显升高(P<0.01);与模型组比较,低和高剂量大黄酚组细胞中SOD活性均明显升高(P<0.05),MDA水平均明显降低(P<0.05或P<0.01);各组细胞中Caspase-8和Caspase-9水平比较差异均无统计学意义(P>0.05).结论:大黄酚通过抑制氧化应激和AIF核转位改善H2O2诱导的EA.hy926细胞凋亡,有助于治疗BPD.

关键词：

大黄酚支气管肺发育不良凋亡诱导因子核转位细胞凋亡氧化应激

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3D打印PLA/PTMC-Ca3(PO4)2复合支架制备及其对兔骨髓间充质干细胞成骨分化的影响

刘鑫钢陈旭刘亚东苗锦虎...

1519-1525页

查看更多>>摘要：目的:探讨通过 3D打印技术制备的聚乳酸(PLA)/聚三亚甲基碳酸酯(PTMC)和PLA/PTMC-磷酸三钙[Ca3(PO4)2]复合多孔支架对兔骨髓间充质干细胞(BMSCs)的影响,阐明其在骨缺损修复中的应用价值.方法:混合材料后使用桌面挤丝机制备PLA/PTMC和PLA/PTMC-Ca3(PO4)2 线材,使用CATIA V5-6R2019建模软件设计支架,并使用CreatBot F430 3D打印机进行支架制作.红外光谱检测PLA/PTMC-Ca3(PO4)2 支架化学结构,体外降解实验检测2种支架降解失重率和pH值,角接触测量仪检测2种支架亲水性.取 3只出生2～5 d的白色新西兰乳兔,提取BMSCs,CCK-8法检测2种支架共培养细胞增殖活性,茜素红染色观察2种支架共培养细胞成骨分化情况.结果:红外光谱检测证实成功制备出含有PLA、PTMC和β-Ca3(PO4)2 3种物质的复合支架.降解 6～14周,与PLA/PTMC支架比较,PLA/PTMC-Ca3(PO4)2 支架在脂肪酶溶液和磷酸盐缓冲液(PBS)中的降解速率均明显升高(P<0.05或P<0.01);降解 8～14周,与PLA/PTMC支架比较,PLA/PTMC-Ca3(PO4)2 支架在脂肪酶溶液中的pH值明显升高(P<0.01).与PLA/PTMC支架比较,PLA/PTMC-Ca3(PO4)2 支架接触角明显减小(P<0.01).细胞共培养第5和7天时,与PLA/PTMC支架比较,PLA/PTMC-Ca3(PO4)2支架共培养细胞增殖活性均明显升高(P<0.05或P<0.01).共培养21 d后,2种支架与BMSCs重叠生长,局部均形成钙化结节,茜素红将其局部染成橘红色;与PLA/PTMC支架比较,PLA/PTMC-Ca3(PO4)2 支架共培养细胞矿化钙结节数量增多,密度增大,颜色加深.结论:通过3D打印技术成功制备出含有PLA、PTMC和β-Ca3(PO4)2 的PLA/PTMC-Ca3(PO4)2复合多孔支架,其降解性能良好,在生物相容性、亲水性和成骨诱导性等方面均表现出优势,是一种性能优良的骨缺损修复材料.

关键词：

骨缺损骨再生3D打印聚乳酸聚三亚甲基碳酸酯

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过表达SLC7A5基因对大鼠卵巢颗粒细胞凋亡的影响及其机制

张京顺邹颖刚郑连文

1526-1534页

查看更多>>摘要：目的:探讨过表达溶质载体家族7成员5(SLC7A5)基因对大鼠卵巢颗粒细胞凋亡的影响,并阐明其相关机制.方法:4只3周龄SPF级SD雌性大鼠,提取原代大鼠卵巢颗粒细胞,分为阴性对照组(NC组)和促卵泡激素受体(FSHR)染色组(FSHR组).免疫荧光染色法观察大鼠卵巢颗粒细胞中FSHR蛋白表达情况,鉴定原代大鼠卵巢颗粒细胞是否成功分离.将大鼠卵巢颗粒细胞分为对照组(转染空载体质粒)和OE-SLC7A5组(转染SLC7A5过表达质粒),采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法和Western blotting法验证细胞转染效率.流式细胞术检测2组卵巢颗粒细胞凋亡率,流式细胞术检测 2组不同细胞周期卵巢颗粒细胞百分率,RT-qPCR法检测 2组卵巢颗粒细胞中SLC7A5、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白酶(Caspase)-3、Caspase-8和肿瘤坏死因子α(TNF-α)mRNA表达水平,Western blotting法检测2组卵巢颗粒细胞中SLC7A5、Caspase-3、cleaved Caspase-3、Caspase-8、cleaved Caspase-8和TNF-α蛋白表达水平.结果:荧光显微镜下卵巢颗粒细胞呈长梭形或者不规则形,特异性表达FSHR,NC组未见FSHR绿色荧光表达,FSHR组可见FSHR绿色荧光表达,提示大鼠原代卵巢颗粒细胞成功分离.与对照组比较,OE-SLC7A5组卵巢颗粒细胞中SLC7A5 mRNA和蛋白表达水平均明显升高(P<0.05),提示SLC7A5过表达质粒成功转染卵巢颗粒细胞.流式细胞术检测,与对照组比较,OE-SLC7A5组细胞凋亡率明显升高(P<0.05).与对照组比较,OE-SLC7A5组S期卵巢颗粒细胞百分率明显降低(P<0.05).RT-qPCR法检测,与对照组比较,OE-SLC7A5组卵巢颗粒细胞中TNF-α、Caspase-3 和Caspase-8 mRNA表达水平均明显升高(P<0.05).Western blotting法检测,与对照组比较,OE-SLC7A5组卵巢颗粒细胞中TNF-α、Caspase-8、cleaved Caspase-8、Caspase-3、cleaved Caspase-3和SLC7A5蛋白表达水平均明显升高(P<0.05).结论:SLC7A5蛋白表达增加能够通过上调TNF-α、Caspase-8和Caspase-3凋亡通路表达,促进颗粒细胞凋亡.

关键词：

溶质载体家族7成员5大鼠卵巢颗粒细胞细胞凋亡肿瘤坏死因子α含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白酶3含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白酶8

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万方数据

浓缩生长因子联合骨髓间充质干细胞膜片的生物学性能及其在骨缺损修复中的作用

石剑虹田原野陈楷孙高...

1535-1546页

查看更多>>摘要：目的:探讨浓缩生长因子(CGF)对骨髓间充质干细胞(BMSCs)膜片性能的影响,并阐明含CGF复合细胞膜片(CS)在骨缺损修复中的作用.方法:体外实验,选取2只3周龄SD大鼠,分离培养获得BMSCs,茜素红和油红O染色鉴定BMSCs成骨和成脂能力.选取3只3周龄SD大鼠,制备CGF液态提取物(CGFe),将细胞分为对照组、传统CS(BMSC-CS)组和含CGF复合CS(CGF/BMSC-CS)组.HE染色观察2组CS形态表现,茜素红和碱性磷酸酶(ALP)染色检测各组CS体外成骨情况,细胞划痕实验检测各组细胞迁移能力,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测各组细胞中ALP、胶原酶Ⅰ型(COL-1)、Runt相关转录因子2(RUNX2)和骨钙蛋白(OCN)mRNA表达水平.体内实验,选取15只SD大鼠随机分为对照组、BMSC-CS组和CGF/BMSC-CS组,显微计算机断层扫描(Micro-CT)检测各组大鼠颅骨缺损处骨形成参数,HE染色和Masson染色观察各组大鼠颅骨缺损组织形态表现.结果:第3代BMSCs为梭形,排列紧密,呈漩涡团簇状生长;茜素红染色有明显的钙结节生成,油红O染色有红色脂滴形成,证实细胞具有良好的成骨和成脂分化的能力.CS为白色半透明状,边缘轻微卷曲,剥离后的CS卷曲皱缩为不规则状.与BMSC-CS组比较,CGF/BMSC-CS组CS白色更深,透明程度较低,在厚度和延展性方面明显增加,不易破损,有一定黏性和可塑性.HE染色观察,与BMSC-CS组比较,CGF/BMSC-CS组CS细胞数增加,排列密集,细胞外基质(ECM)更丰富,包裹连接细胞形成一个整体的片状结构.茜素红和ALP染色检测,与对照组比较,BMSC-CS组CS的ALP活性和矿化提升值均明显升高(P<0.05);与对照组和BMSC-CS组比较,CGF/BMSC-CS组CS成骨细胞及红色矿化结节数明显增多,染色明显加深,阳性面积增大,ALP活性和矿化提升值均明显升高(P<0.05).细胞划痕实验检测,培养24 h,与对照组比较,BMSC-CS组和CGF/BMSC-CS组细胞迁移率均明显升高(P<0.05);与BMSC-CS组比较,CGF/BMSC-CS组细胞迁移率明显升高(P<0.01);培养48 h,与对照组比较,CGF/BMSC-CS组细胞迁移率明显升高(P<0.05).RT-qPCR法检测,与对照组比较,BMSC-CS组细胞中COL-1和OCN mRNA表达水平均明显升高(P<0.01),CGF/BMSC-CS组细胞中ALP、COL-1、OCN和RUNX2 mRNA表达水平均明显升高(P<0.01);与BMSC-CS组比较,CGF/BMSC-CS组细胞中ALP、COL-1和OCN mRNA表达水平均明显升高(P<0.01).Micro-CT检测,对照组大鼠颅骨缺损区域边界清晰,几乎无新骨生成;BMSC-CS组大鼠颅骨仅在骨缺损边缘有少量新骨形成,缺损中心区域有明显空缺;CGF/BMSC-CS组大鼠颅骨新骨沿骨缺损边缘向中心区域生成,修复大部分骨缺损;与对照组比较,BMSC-CS组大鼠颅骨骨体积分数[骨体积(BV)/组织体积(TV)]和骨小梁间距(Tb.N)均明显升高(P<0.05),CGF/BMSC-CS组大鼠颅骨BV、BV/TV、骨小梁数目(Tb.Th)和Tb.N均明显升高(P<0.05);与BMSC-CS组比较,CGF/BMSC-CS组大鼠颅骨BV、BV/TV、Tb.Th和Tb.N均明显升高(P<0.01).HE和Masson染色观察,对照组大鼠颅骨缺损组织几乎无新骨生成,仅见大量胶原纤维连接两侧骨断端;BMSC-CS组大鼠颅骨缺损组织仅在骨缺损边缘有少量新骨形成,中央为致密的胶原纤维与缺损边缘的新生骨连接;CGF/BMSC-CS组大鼠颅骨缺损组织除在骨缺损边缘可以看到新生骨组织外,缺损中央亦有骨岛形成,骨岛周围可见骨细胞及大量的胶原纤维.Masson染色观察,细胞质和类骨质呈红色,胶原呈蓝色;CGF/BMSC-CS组大鼠颅骨缺损组织中可见明显的新形成的类骨质,新骨形成量最高.结论:CGF可以促进BMSCs膜片的成骨分化和ECM的丰富度,含CGF复合CS可以高效修复大鼠颅骨缺损,是一种理想和安全的促骨再生材料.

关键词：

浓缩生长因子细胞膜片骨髓间充质干细胞骨缺损再生修复

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万方数据

白藜芦醇对颞下颌关节骨关节炎的治疗作用及其机制

孙高何静赵琪石剑虹...

1547-1556页

查看更多>>摘要：目的:探讨白藜芦醇对颞下颌关节骨关节炎(TMJOA)的治疗作用,并阐明相关作用机制.方法:45只SD大鼠随机分为对照组、模型组和白藜芦醇组,每组15只.模型组和白藜芦醇组大鼠关节腔内注射20 g·L-1 碘乙酸钠(MIA)50 μL,构建TMJOA大鼠模型;对照组大鼠注射等量生理盐水.造模3周后,白藜芦醇组大鼠注射80 μL白藜芦醇溶液,每周1次,连续3周,对照组和模型组大鼠注射等量生理盐水.微型计算机断层扫描技术(Micro-CT)系统检测各组大鼠髁突结构,计算感兴趣区的骨体积分数(BV/TV)、骨小梁厚度(Tb.Th)、骨小梁间距(Tb.p)和骨小梁数(Tb.N).HE染色和甲苯胺蓝染色观察各组大鼠颞下颌关节(TMJ)组织病理形态表现,免疫组织化学法检测各组大鼠TMJ组织中性别决定区Y框蛋白(SOX)-9、基质金属蛋白酶(MMP)-13、沉默信息调节因子(Sirt)1、磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)和磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(p-mTOR)蛋白表达水平,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测各组大鼠TMJ组织中SOX-9、MMP-13、Sirt1、PI3K、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)和蛋白激酶B(Akt)mRNA表达水平.结果:造模3周后,大鼠髁突骨质破坏明显,表面粗糙不平,延续性中断,表明TMJOA大鼠模型造模成功.Micro-CT系统检测,对照组大鼠髁突表面光滑,形态规则,骨质连续完整;模型组大鼠髁突破坏明显,骨质连续性受到不同程度破坏,表面粗糙可伴有不同程度骨质缺损;白藜芦醇组大鼠髁突病变减轻,髁突形态外观得到一定的改善.与对照组比较,模型组大鼠BV/TV和Tb.Th均明显降低(P<0.05),Tb.Sp明显增加(P<0.05);与模型组比较,白藜芦醇组大鼠BV/TV和Tb.Th均明显升高(P<0.05),Tb.Sp明显减少(P<0.05).HE染色观察,对照组大鼠髁突层次清晰,软骨细胞排列规则,整齐有序;模型组大鼠髁突表面粗糙不平,缺损明显,呈现典型的TMJOA表现;白藜芦醇组大鼠髁突表面略微粗糙,整体分层大致清晰,细胞排列较为有序.甲苯胺蓝染色观察,对照组大鼠髁突肥大层软骨细胞呈蓝紫色,染色明显且均匀;模型组大鼠髁突肥大层软骨细胞淡染,部分区域甚至失染;白藜芦醇组大鼠髁突肥大细胞层染色基本明显且较为均匀.免疫组织化学法检测,与对照组比较,模型组大鼠TMJ组织中MMP-13、PI3K、p-Akt和p-mTOR蛋白表达水平均明显升高(P<0.05),SOX-9和Sirt1蛋白表达水平均明显降低(P<0.05);与模型组比较,白藜芦醇组大鼠TMJ组织中SOX-9和Sirt1蛋白表达水平均明显升高(P<0.05),MMP-13、PI3K、p-Akt和p-mTOR蛋白表达水平均明显降低(P<0.05).RT-qPCR法检测,与对照组比较,模型组大鼠TMJ组织中MMP-13、PI3K、Akt和mTOR mRNA表达水平均明显升高(P<0.05),SOX-9和Sirt1 mRNA表达水平均明显降低(P<0.05);与模型组比较,白藜芦醇组大鼠TMJ组织中SOX-9和Sirt1 mRNA表达水平均明显升高(P<0.05),MMP-13、PI3K、Akt和mTOR mRNA表达水平均明显降低(P<0.05).结论:白藜芦醇对TMJOA有治疗作用,其作用机制可能是通过激活Sirt1、抑制PI3K-Akt-mTOR信号通路实现的.

关键词：

白藜芦醇颞下颌关节骨关节炎沉默信息调节因子1磷脂酰肌醇3激酶蛋白激酶B哺乳动物雷帕霉素靶蛋白

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万方数据

双酚A对子宫内膜间充质干/基质细胞干性的影响及人脐带间充质干细胞源性上清对细胞损伤的改善作用

王爱乔米旭光林秀英付建华...

1557-1564页

查看更多>>摘要：目的:探讨双酚A(BPA)对子宫内膜间充质干/基质细胞(eMSCs)增殖活性和干性特征的影响,阐明人脐带间充质干细胞源性上清(hUCMSC-Sup)对细胞损伤的改善作用.方法:体外培养eMSCs,以0、200、250、300、350、400 μmol·L-1 BPA处理.将eMSCs分为对照组(仅培养液培养)、BPA组(含 200 μmol·L-1 BPA的等体积培养液培养)、BPA+hUCMSC-Sup组(含 200 μmol·L-1 BPA及50%体积比hUCMSC-Sup的等体积培养液培养)和BPA+CHIR-99021组(含200 μmol·L-1 BPA及10 μmol·L-1 CHIR-99021的等体积培养液培养),使用干细胞成球培养液培养eMSCs干细胞球,其余细胞均使用DMEM/F12完全培养基培养.噻唑蓝(MTT)法检测各组eMSCs存活率,球体形成实验检测各组eMSCs干细胞球数和直径,CCK-8法检测各组eMSCs干细胞球中细胞增殖活性,流式细胞术检测各组eMSCs中CD73+细胞百分率,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测各组eMSCs中性别决定区Y框蛋白2(Sox2)、八聚体结合转录因子4(Oct4)和Nanog mRNA表达水平,Western blotting法检测各组eMSCs中β-连环蛋白(β-catenin)蛋白表达水平.结果:MTT法检测,BPA作用24和48 h,与0 μmol·L-1 BPA组比较,200、250、300、350和400 μmol·L-1 BPA组eMSCs存活率均明显降低(P<0.01).药物作用24 h时,与对照组比较,BPA组eMSCs存活率明显降低(P<0.01);药物作用48 h时,与对照组比较,BPA组eMSCs存活率明显降低(P<0.01);与BPA组比较,BPA+hUCMSC-Sup组eMSCs存活率明显升高(P<0.05).球体形成实验检测,与培养3 d组比较,培养4和5 d组eMSCs干细胞球数和直径均明显增加(P<0.05或P<0.01);与对照组比较,培养48 h时BPA组eMSCs干细胞球数和直径均明显减少(P<0.05或P<0.01).CCK-8法检测,处理24和48 h时,与对照组比较,BPA组eMSCs干细胞球中细胞增殖活性均明显降低(P<0.01);与BPA组比较,BPA+hUCMSC-Sup组eMSCs干细胞球中细胞增殖活性均明显升高(P<0.01).流式细胞术检测,与对照组比较,BPA组eMSCs中CD73+细胞百分率明显降低(P<0.01);与BPA组比较,BPA+hUCMSC-Sup组eMSCs中CD73+细胞百分率明显升高(P<0.01).RT-qPCR法检测,与对照组比较,BPA组eMSCs中Sox2、Oct4和Nanog mRNA表达水平均明显降低(P<0.01);与BPA组比较,BPA+hUCMSC-Sup组和BPA+CHIR-99021组eMSCs中Sox2、Oct4及Nanog mRNA表达水平均明显升高(P<0.01).Western blotting法检测,与对照组比较,BPA组eMSCs中β-catenin蛋白表达水平明显降低(P<0.01);与BPA组比较,BPA+hUCMSC-Sup组和BPA+CHIR-99021 组 eMSCs中 β-catenin蛋白表达水平均明显升高(P<0.01).结论:BPA能够抑制eMSCs的干性特征,损伤子宫内膜的自我更新及修复作用,其机制可能与下调细胞中Wnt/β-catenin信号通路活性有关.hUCMSC-Sup可以促进受损eMSCs的增殖,并对BPA诱导的eMSCs干性损伤起到改善作用.

关键词：

双酚A子宫内膜间充质干/基质细胞人脐带间充质干细胞干细胞球

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万方数据

人参皂苷Rh1通过激活Nrf2/HO-1信号通路对糖尿病小鼠肾脏损伤的改善作用

曲萌黄睿鞠欣达刘雨昕...

1565-1571页

查看更多>>摘要：目的:探讨人参皂苷Rh1对糖尿病(DM)小鼠肾损伤的保护作用,并阐明其作用机制.方法:应用高脂高糖饲养佐以腹腔注射链脲佐菌素(STZ)法制备糖尿病肾脏疾病(DKD)模型.将48只C57/BL6成模小鼠随机分为模型组、核因子红细胞2相关因子2(Nrf2)抑制剂ML385组(ML385组)(30 mg·kg-1 ML385)、人参皂苷Rh1组(G-Rh1组)(30 mg·kg-1人参皂苷Rh1)和G-Rh1+ML385组(30 mg·kg-1 人参皂苷Rh1+30 mg·kg-1 ML385),每组 12只,另外 12只C57/BL6小鼠作为对照组.作用8周后,全自动分析仪检测各组小鼠血清中空腹血糖(FBG)、尿素氮(BUN)和血肌酐(Scr)水平及尿液中24 h尿蛋白(24 h UP)水平,并计算肾脏指数.试剂盒检测各组小鼠肾组织中超氧化物歧化酶(SOD)和乳酸脱氢酶(LDH)活性及丙二醛(MDA)水平,Western blotting法检测各组小鼠肾组织中Nrf2和血红素加氧酶1(HO-1)蛋白表达水平.结果:与对照组比较,模型组、ML385组和G-Rh1+ML385组小鼠血清中FBG水平和肾脏指数均明显升高(P<0.01),G-Rh1组小鼠血清中FBG水平明显升高(P<0.01);与模型组比较,ML385组小鼠肾脏指数明显升高(P<0.05),G-Rh1组小鼠FBG水平和肾脏指数均明显降低(P<0.05或P<0.01);与G-Rh1组比较,G-Rh1+ML385组小鼠FBG水平和肾脏指数均明显升高(P<0.01).与对照组比较,模型组、ML385组、G-Rh1组和G-Rh1+ML385组小鼠血清中BUN和Scr水平及尿液中24 h UP水平均明显升高(P<0.01);与模型组比较,ML385组小鼠血清中BUN水平及尿液中24 h UP水平均明显升高(P<0.05),G-Rh1组小鼠血清中BUN和Scr水平及尿液中 24 h UP水平均明显降低(P<0.01);与G-Rh1 组比较,G-Rh1+ML385组小鼠血清中BUN和Scr水平及尿液中24 h UP水平均明显升高(P<0.01).与对照组比较,模型组、ML385组、G-Rh1组和G-Rh1+ML385组小鼠肾组织中SOD活性均明显降低(P<0.01),MDA水平和LDH活性均明显升高(P<0.01);与模型组比较,ML385组小鼠肾组织中SOD活性明显降低(P<0.05),MDA水平明显升高(P<0.05),G-Rh1组小鼠肾组织中SOD活性明显升高(P<0.01),MDA水平和LDH活性均明显降低(P<0.01);与G-Rh1组比较,G-Rh1+ML385组小鼠肾组织中SOD活性明显降低(P<0.01),MDA水平和LDH活性均明显升高(P<0.01).与对照组比较,模型组、ML385组、G-Rh1组和G-Rh1+ML385组小鼠肾组织中Nrf2和HO-1蛋白表达水平均明显降低(P<0.05或P<0.01);与模型组比较,ML385组和G-Rh1+ML385组小鼠肾组织中Nrf2和HO-1蛋白表达水平均明显降低(P<0.05),G-Rh1组小鼠肾组织中Nrf2和HO-1蛋白表达水平均明显升高(P<0.01);与G-Rh1组比较,G-Rh1+ML385组小鼠肾组织中Nrf2和HO-1蛋白表达水平均明显降低(P<0.01).结论:人参皂苷Rh1可降低氧化应激,改善肾功能,对DM小鼠肾脏损伤具有保护作用,其作用机制可能与激活Nrf2/HO-1信号通路有关.

关键词：

人参皂苷Rh1糖尿病肾损伤核因子红细胞2相关因子2氧化应激

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