首页期刊导航|吉林大学学报（医学版）
期刊信息/Journal information
吉林大学学报（医学版）
吉林大学
吉林大学学报（医学版）

吉林大学

李玉林

双月刊

1671-587X

xuebao@jlu.edu.cn

0431-85619278

130021

吉林省长春市新民大街828号

吉林大学学报（医学版）/Journal Journal of Jilin University(Medicine Edition)CSCD北大核心CSTPCD
查看更多>>本刊是由教育部主管、吉林大学主办的综合性医药卫生类学术期刊。办刊宗旨是遵循党和国家的办刊政策及法规，报道医学科学研究的新理论、新方法和新技术,不断促进医学科学的发展和国内外学术交流。 本刊创刊于1959年，在发展过程中提高办刊质量。本刊已被多家国内外著名的检索机构及数据库收录。 本刊国内外公开发行，国外代号BM4177，国内代号12-23，10元/期，全年6期，全国各地邮局均可订阅。
正式出版
收录年代

    生理性拉应力通过Nell-1/Ihh信号通路对ATDC5软骨细胞分化的调控作用

    董紫薇齐慧川马俊薛晴...
    1-9页
    查看更多>>摘要：目的:探讨生理性拉应力对软骨细胞分化的调控作用,并阐明其相关信号通路机制.方法:体外培养软骨ATDC5细胞,应用四点弯曲细胞力学加载仪对其施加生理性拉应力,首先分为对照组和拉应力组(2 000 μstrain/2 h组),另分为不同力值(1 000、2 000和3 000 μstrain)加力时间为2 h和力值为2 000 μstrain不同加力时间(1、2和4 h)组,同时设未加力的细胞为对照组,采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测各组细胞中Ⅱ型胶原(Col-Ⅱ)、Ⅹ型胶原(Col-Ⅹ)、聚集蛋白聚糖(Aggrecan)、性别决定区Y框蛋白9(SOX9)、血管内皮生长因子(VEGF)、增殖细胞核抗原(PCNA)、Nel样1型分子(Nell-1)、Runt相关转录因子2(Runx2)、印度刺猬因子(Ihh)、补缀同源物1(Ptch-1)、GLI家族锌指蛋白1(Gli-1)和刺猬因子相互作用蛋白1(Hhip-1)mRNA表达水平,采用Western blotting法检测各组细胞中Nell-1、Runx2和Ihh蛋白表达水平.ATDC5细胞分为对照组、环巴胺组、拉应力组和环巴胺+拉应力组,采用 RT-qPCR法检测各组细胞中 Nell-1、Ihh、Ptch-1、Gli-1和Hhip-1 mRNA表达水平,采用Western blotting法检测各组细胞中 Nell-1和Ihh蛋白表达水平.结果:与对照组比较,2 000 μstrain/2 h组细胞中Col-Ⅱ、Col-Ⅹ、Aggrecan、SOX9、VEGF和PCNA mRNA表达水平均明显升高(P<0.01).在对细胞施加2 000 μstrain不同加力时间(1、2和4 h)或不同力值(1 000、2 000和3 000 μstrain)2 h的拉应力后,与对照组比较,随时间的延长或力值的增加其他各组细胞中Runx2 mRNA表达水平逐渐升高(P<0.01),Nell-1、Ihh、Ptch-1、Gli-1 和Hhip-1 mRNA表达水平逐渐升高(P<0.01),且在2 000 μstrain/2 h时达到最高,随后出现回落但仍明显高于对照组(P<0.01).Western blotting检测,各组细胞中Nell-1、Runx2和Ihh蛋白表达水平与mRNA表达水平变化趋势一致.环巴胺预处理后,与对照组比较,环巴胺组细胞中Ihh、Ptch-1、Gli-1和Hhip-1 mRNA表达水平均明显降低(P<0.01),拉应力组和环巴胺+拉应力组细胞中Nell-1、Ihh、Ptch-1、Gli-1和Hhip-1 mRNA表达水平明显升高(P<0.01);与环巴胺组比较,环巴胺+拉应力组细胞中Nell-1、Ihh、Ptch-1、Gli-1和Hhip-1 mRNA表达水平明显升高(P<0.01);与拉应力组比较,环巴胺+拉应力组细胞中Ihh、Ptch-1、Gli-1和Hhip-1 mRNA表达水平明显降低(P<0.01).与对照组比较,环巴胺组细胞中Ihh蛋白表达水平明显降低(P<0.01),Nell-1蛋白表达水平差异无统计学意义(P>0.05),拉应力组和环巴胺+拉应力组细胞中Nell-1 和Ihh蛋白表达水平明显升高(P<0.01);与环巴胺组比较,拉应力组和环巴胺+拉应力组细胞中Nell-1和Ihh蛋白表达水平明显升高(P<0.01);与拉应力组比较,环巴胺+拉应力组细胞中Nell-1和Ihh蛋白表达水平差异均无统计学意义(P>0.05).结论:在生理性拉应力刺激下,Nell-1可在上游激活Ihh信号通路,进而调控ATDC5软骨细胞的分化.

    生理性拉应力软骨细胞Nel样1型分子印度刺猬因子信号通路Runt相关转录因子2

      原文链接:
    • 维普
    • 万方数据

    桔梗元参汤对过敏性哮喘小鼠气道炎症和黏液分泌的影响及其机制

    唐红梅李月蛟王星王志彬...
    10-17页
    查看更多>>摘要：目的:探讨桔梗元参汤(JGYST)对过敏性哮喘小鼠气道组织炎症和黏液分泌的影响,并阐明其相关作用机制.方法:40 只雄性C57BL/J小鼠随机分为对照组、JGYST组、卵清蛋白(OVA)组及OVA+JGYST组.OVA组和OVA+JGYST组小鼠用50 μg OVA腹腔注射致敏,每周2次,致敏后连续 7 d用OVA 20 μg滴鼻激发哮喘;OVA+JGYST组小鼠每次OVA激发前 1 h用JGYST 200 μL灌胃,共灌胃7次;对照组用相同剂量的PBS缓冲液腹腔注射、滴鼻和灌胃;JGYST组小鼠用相同剂量PBS缓冲液腹腔注射和滴鼻,用相同剂量JGYST灌胃.采用HE染色和过碘酸-雪夫(PAS)染色观察各组小鼠肺组织病理形态表现并计算炎症评分和PAS评分,流式细胞术检测各组小鼠肺组织中嗜酸性粒细胞、中性粒细胞、辅助性T淋巴细胞 1(Th1)、辅助性T淋巴细胞 2(Th2)和树突状细胞(DCs)数及成熟DCs百分率和活性氧(ROS)水平,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测各组小鼠肺组织中白细胞介素4(IL-4)、白细胞介素10(IL-10)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)mRNA表达水平.结果:HE染色和PAS染色,对照组小鼠气道和肺泡结构完整、无炎症细胞浸润,无黏液分泌;与对照组比较,OVA组小鼠气道组织周围有大量炎症细胞浸润,炎症评分和PAS评分明显升高(P<0.01);与OVA组比较,JGYST组和OVA+JGYST组小鼠气道组织炎症细胞浸润减少,炎症评分和PAS评分明显降低(P<0.01).流式细胞术检测,与对照组比较,OVA组小鼠肺组织中嗜酸性粒细胞、Th2和DCs数均明显增加(P<0.05或P<0.01),成熟DCs百分率和ROS水平均明显升高(P<0.01);与OVA组比较,JGYST组和OVA+JGYST组小鼠肺组织中嗜酸性粒细胞、Th2 和DCs数均明显减少(P<0.01),成熟DCs百分率和ROS水平均明显降低(P<0.01).RT-qPCR法检测,与对照组比较,OVA组小鼠肺组织中IL-4、IL-10和TNF-α mRNA表达水平升高(P<0.01);与OVA组比较,JGYST组和OVA+JGYST组小鼠肺组织中IL-4和TNF-α mRNA表达水平降低(P<0.01),IL-10 mRNA表达水平升高(P<0.01).结论:JGYST可以减轻过敏性哮喘小鼠气道组织炎症和黏液分泌,其作用机制可能与其减少Th2细胞和DCs数量,降低ROS水平和促炎细胞因子表达水平同时升高抗炎细胞因子表达水平有关.

    桔梗元参汤哮喘气道炎症活性氧细胞因子

      原文链接:
    • 维普
    • 万方数据

    PD-L1对人口腔鳞状细胞癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响

    曾洁俞雪燕罗婷徐江...
    18-24页
    查看更多>>摘要：目的:探讨程序性细胞死亡配体1(PD-L1)在口腔鳞状细胞癌(OSCC)细胞中的表达及其对OSCC CAL27细胞生物学行为的影响,阐明其可能的作用机制.方法:采用Western blotting法检测口腔上皮HOK细胞和OSCC CAL27、TCA8113和SCC15细胞中PD-L1蛋白表达水平.免疫荧光染色法检测CAL27细胞中PD-L1蛋白表达和定位情况.将CAL27细胞分为对照组(转染si-NC)和si-PD-L1组(转染si-PD-L1),Western blotting法检测2组细胞干扰效率,CCK-8法检测不同时间点2组细胞增殖活性,平板克隆实验检测2组细胞克隆形成数,细胞划痕愈合实验检测2组细胞划痕愈合率,Transwell小室实验检测2组细胞中迁移和侵袭细胞数.结果:OSCC细胞中PD-L1蛋白表达水平均高于HOK细胞(P<0.05或P<0.01),PD-L1在CAL27细胞的细胞质和细胞核中均有表达.CCK-8法和平板克隆实验,与对照组比较,不同时间点si-PD-L1 组CAL27 细胞增殖活性明显降低(P<0.05或P<0.01),克隆形成数明显减少(P<0.01).细胞划痕愈合实验,与对照组比较,si-PD-L1组CAL27细胞划痕愈合率明显降低(P<0.05或P<0.01).Transwell小室实验,与对照组比较,si-PD-L1组CAL27细胞中迁移和侵袭细胞明显减少(P<0.01).结论:PD-L1在OSCC细胞中的表达高于口腔正常上皮细胞,敲低PD-L1表达可抑制OSCC细胞增殖、克隆形成及迁移和侵袭能力.

    口腔鳞状细胞癌程序性细胞死亡配体1细胞增殖细胞迁移细胞侵袭

      原文链接:
    • 维普
    • 万方数据

    白屈菜红碱对人卵巢癌SKOV3细胞迁移、侵袭和上皮-间质转化的影响

    周佳邱智东林喆律广富...
    25-32页
    查看更多>>摘要：目的:探讨白屈菜红碱(CHE)对人卵巢癌SKOV3细胞迁移、侵袭和上皮-间质转化(EMT)的抑制作用,阐明其相关作用机制.方法:体外培养SKOV3细胞,分为对照组和2.5、5.0、10.0、20.0及40.0 μmol·L-1 CHE组,采用噻唑蓝(MTT)法检测各组细胞增殖抑制率.体外培养SKOV3细胞,分为对照组、转移生长因子β1(TGF-β1)组、TGF-β1+5 μmol·L-1 CHE组和TGF-β1+10 μmol·L-1 CHE组,采用细胞划痕实验检测各组细胞迁移率,Transwell小室实验检测各组细胞中迁移细胞数和侵袭细胞数,Westren blotting法检测各组细胞中E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)蛋白表达水平,免疫荧光染色法检测各组细胞中E-cadherin和N-cadherin荧光强度.结果:MTT法,与对照组比较,5.0、10.0、20.0和 40.0 μmol·L-1 CHE组细胞增殖抑制率明显升高(P<0.05或P<0.01).细胞划痕实验,与对照组比较,TGF-β1组细胞迁移率明显升高(P<0.01);与TGF-β1组比较,TGF-β1+5 μmol·L-1 CHE组和 TGF-β 1+ 10 μmol·L-1 CHE组细胞迁移率明显降低(P<0.01).Transwell小室实验,与对照组比较,TGF-β1组细胞中迁移细胞数和侵袭细胞数明显增加(P<0.05);与TGF-β1 组比较,TGF-β1+5 μmol·L-1 CHE组和TGF-β1+10 μmol·L-1 CHE组细胞中迁移细胞数和侵袭细胞数明显减少(P<0.01).Westren blotting法,与对照组比较,TGF-β1组细胞中E-cadherin蛋白表达水平明显降低(P<0.01),N-cadherin和Vimentin蛋白表达水平明显升高(P<0.05或P<0.01);与TGF-β1组比较,TGF-β1+ 5 μmol·L-1 CHE组和TGF-β1+10 μmol·L-1 CHE组细胞中E-cadherin蛋白表达水平明显升高(P<0.01),N-cadherin和Vimentin蛋白表达水平明显降低(P<0.01).免疫荧光染色,与对照组比较,TGF-β1组细胞中E-cadherin荧光强度明显降低,N-cadherin荧光强度明显升高;与TGF-β1组比较,TGF-β1+5 μmol·L-1 CHE组和TGF-β1+10 μmol·L-1 CHE组细胞中E-cadherin荧光强度明显升高,N-cadherin荧光强度明显降低.结论:CHE能够抑制人卵巢癌SKOV3 细胞增殖、迁移、侵袭和EMT.

    白屈菜红碱卵巢肿瘤上皮-间质转化转化生长因子β1细胞迁移细胞侵袭

      原文链接:
    • 维普
    • 万方数据

    APOE多态性在炎症因子诱导的神经毒性反应性星形胶质细胞中的差异作用

    王岩李晓慧季瑶崔理立...
    33-41页
    查看更多>>摘要：目的:探讨载脂蛋白E(APOE)基因多态性在神经毒性反应性星形胶质细胞中的差异作用,为阿尔茨海默病(AD)发病机制的研究提供理论依据.方法:体外分离培养APOE基因敲除小鼠(APOE-/-)原代皮层星形胶质细胞,免疫荧光染色法鉴定细胞纯度.构建人APOE3和APOE4重组过表达质粒,分别转染至原代APOE-/-星形胶质细胞中,以APOE-/-原代细胞为对照,采用Western blotting法检测细胞中APOE和神经胶质酸性蛋白(GFAP)蛋白表达水平,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测细胞培养上清中APOE水平.采用白细胞介素 1α(IL-1α)、肿瘤坏死因子(TNF)和补体C1q联合刺激转染APOE3和转染APOE4 的原代星形胶质细胞制备炎症模型,分为APOE3+PBS组、APOE4+PBS组、APOE3+IL-1α+TNF+CC1q组和APOE4+IL-1α+ TNF+C1q组,采用细胞免疫荧光染色法观察各组细胞形态表现,采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测各组细胞中磷脂酰肌醇蛋白聚糖4(Gpc4)、磷脂酰肌醇蛋白聚糖6(Gpc6)、血小板反应蛋白1(Thbs1)、血小板反应蛋白 2(Thbs2)、酸性分泌蛋白类似蛋白1(Sparcl1)、胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)、C3和 S100钙结合蛋白B(S100B)mRNA表达水平,微球吞噬实验检测各组细胞吞噬能力,Western blotting法检测各组细胞中B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)和含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶 3(Caspase-3)蛋白表达水平.结果:与APOE-/-组比较,转染APOE3 和APOE4 组细胞中APOE和GFAP蛋白表达水平及细胞培养上清中APOE水平明显升高(P<0.01).荧光显微镜下观察,分 别 与 APOE3+PBS 组 和 APOE4+PBS 组 比 较,APOE3+IL-1α +TNF+Cq1 组 和APOE4+IL-1α+TNF+Cq1组星形胶质细胞突起变短,胞体变大;与APOE3+IL-1α+TNF+Cq1组比较,APOE4+IL-1α+TNF+Cq1 组星形胶质细胞突起更短.分别与APOE3+PBS组和APOE4+ PBS组比较,APOE3+IL-1α+TNF+Cq1组和APOE4+IL-1α+TNF+Cq1组细胞中Gpc4、Gpc6、Thbs1、Thbs2和Sparcl1 mRNA表达水平明显降低(P<0.01);与APOE3+IL-1α+TNF+Cq1组比较,APOE4+IL-1α+TNF+Cq1组细胞中Gpc4、Gpc6、Thbs1、Thbs2和Sparcl1 mRNA表达水平明显降低(P<0.05或P<0.01).分 别 与 APOE3+PBS 组 和 APOE4+PBS 组 比 较,APOE3+ IL-1α+TNF+Cq1组和APOE4+IL-1α+TNF+Cq1组细胞中GDNF mRNA表达水平明显降低(P<0.01),C3和S100B mRNA表达水平明显升高(P<0.01);与APOE3+IL-1α+TNF+Cq1组比较,APOE4+IL-1α+TNF+Cq1 组细胞中GDNF mRNA表达水平明显降低(P<0.05),C3和S100B mRNA表达水平明显升高(P<0.05).分别与APOE3+PBS组和APOE4+PBS组比较,APOE3+ IL-1α+TNF+Cq1组和APOE4+IL-1α+TNF+Cq1 组细胞吞噬微珠数量明显减少;与APOE3+ IL-1α +TNF+Cq1 组比较,APOE4+IL-1α+TNF+Cq1 组细胞吞噬微珠数量明显减少.分别与APOE3+PBS 组和 APOE4+PBS 组比较,APOE3+IL-1α +TNF+Cq1 组和 APOE4+IL-1α + TNF+Cq1组细胞中Bcl-2蛋白表达水平明显降低(P<0.05或P<0.01),Caspase-3蛋白表达水平明显升高(P<0.01);与APOE3+IL-1α+TNF+Cq1组比较,APOE4+IL-1α+TNF+Cq1组细胞中Bcl-2蛋白表达水平明显降低(P<0.01),Caspase-3蛋白表达水平明显升高(P<0.05).结论:APOE4基因型比APOE3诱导炎症因子能力更强,可诱导神经毒性反应性星形胶质细胞表型,增加神经毒性,影响星形胶质细胞凋亡,从而加剧神经元损伤.

    阿尔茨海默病星形胶质细胞载脂蛋白E基因多态性细胞凋亡神经毒性

      原文链接:
    • 维普
    • 万方数据

    藁本内酯调控PKD1/HIF-1α/VEGF通路对心力衰竭大鼠的改善作用

    张岚武永新张涛王东伟...
    42-49页
    查看更多>>摘要：目的:探讨藁本内酯对心力衰竭大鼠心功能和血管生成的影响,并分析其对蛋白激酶D1(PKD1)/缺氧诱导因子1α(HIF-1α)/血管内皮生长因子(VEGF)通路的调节作用.方法:SD大鼠随机分为假手术组、模型组、藁本内酯组、PKD1/HIF-1α/VEGF信号通路阻断剂CID755673(CID)组和藁本内酯+CID组,采用冠状动脉左前降支结扎法建立心力衰竭大鼠模型,藁本内酯组大鼠尾静脉注射藁本内酯 20 mg·kg-1,CID组大鼠腹腔注射CID 50 mg·kg-1,藁本内酯+CID组大鼠腹腔注射CID 50 mg·kg-1后尾静脉注射藁本内酯 20 mg·kg-1,每日1次,连续4周.采用心脏超声检查各组大鼠心功能指标,2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色法检测各组大鼠心肌梗死面积百分率,HE染色观察各组大鼠心肌组织病理形态表现,实时荧光定量PCR法(RT-qPCR)法和蛋白印迹法检测各组大鼠缺血区心肌组织中 PKD1、HIF-1α、CD31 和 VEGF mRNA及蛋白表达水平.结果:与假手术组比较,模型组和CID组大鼠心肌细胞形态发生改变,细胞间隙增宽,排列紊乱,可见肌纤维断裂和炎性细胞浸润;藁本内酯组和藁本内酯+CID组大鼠心肌纤维排列相对整齐,心肌纤维断裂相对较少,炎性细胞数减少.与假手术组比较,模型组大鼠左心室射血分数(LVEF)和左心室短轴缩短率(LVFS)降低(P<0.05),左心室收缩末期内径(LVESD)和左心室舒张末期内径(LVEDD)增大(P<0.05),心肌组织中PKD1、HIF-1α、CD31和VEGF mRNA及蛋白表达水平降低(P<0.05);与模型组比较,藁本内酯组大鼠 LVEF和 LVFS升高(P<0.05),LVESD和LVEDD减小(P<0.05),心肌梗死面积百分率降低(P<0.05),心肌组织中PKD1、HIF-1α、CD31和VEGF mRNA及蛋白表达水平升高(P<0.05);与模型组比较,CID组大鼠LVEF和LVFS降低(P<0.05),LVESD和LVEDD增大(P<0.05),心肌梗死面积百分率升高(P<0.05),心肌组织中PKD1、HIF-1α、CD31和VEGF mRNA及蛋白表达水平降低(P<0.05);与藁本内酯组比较,藁本内酯+CID组大鼠LVEF和LVFS明显降低(P<0.05),LVESD和LVEDD增大(P<0.05),心肌梗死面积百分率升高(P<0.05),心肌组织中PKD1、HIF-1α、CD31和VEGF mRNA及蛋白表达水平降低(P<0.05);与CID组比较,藁本内酯+CID组大鼠LVEF和LVFS升高(P<0.05),LVESD和LVEDD减小(P<0.05),心肌梗死面积百分率降低(P<0.05),心肌组织中PKD1、HIF-1α、CD31 和VEGF mRNA及蛋白表达水平升高(P<0.05).结论:藁本内酯可通过激活PKD1/HIF-1α/VEGF通路发挥促进心力衰竭大鼠血管生成、缩小其心肌梗死面积和改善心功能的作用.

    心力衰竭血管再生藁本内酯蛋白激酶D1缺氧诱导因子1α血管内皮生长因子

      原文链接:
    • 维普
    • 万方数据

    小檗碱对人胶质瘤T98G细胞迁移和侵袭的抑制作用及其机制

    孙玉学刘自强吴豪赵黎明...
    50-57页
    查看更多>>摘要：目的:探讨小檗碱(BBR)对人胶质瘤T98G细胞脂肪酸的调控作用及细胞增殖、迁移和侵袭的影响,阐明其潜在的作用机制.方法:对数生长期T98G细胞分为对照组和不同浓度(25、50及100 mg·L-1)BBR组,采用细胞划痕愈合实验检测各组细胞迁移率,Transwell小室实验检测各组细胞侵袭率.对数生长期T98G细胞分为对照组和100 mg·L-1 BBR组,质谱法检测2组细胞中脂肪酸含量.对数生长期T98G细胞分为对照组和不同浓度(50、100 及 150 mg·L-1)BBR组,采用Western blotting法检测各组细胞中磷脂酰肌醇 3-激酶(PI3K)、磷酸化PI3K(p-PI3K)、蛋白激酶B(AKT)、磷酸化AKT(p-AKT)、固醇调节元件结合蛋白 1(SREBP-1)和脂肪酸合成酶(FASN)蛋白表达水平.应用基因沉默技术抑制FASN表达,将对数生长期T98G细胞分为对照组、shFASN1组和shFASN2组,采用Western blotting法检测各组细胞中FASN蛋白表达水平,克隆形成实验检测各组细胞克隆形成情况,细胞划痕愈合实验检测各组细胞迁移率.结果:与对照组比较,不同浓度BBR组细胞迁移率和侵袭率呈浓度依赖性降低(P<0.01),100 mg·L-1 BBR组细胞中各类脂肪酸含量明显降低(P<0.01).与对照组比较,150 mg·L-1 BBR组细胞中p-PI3K、p-AKT、SREBP-1和FASN蛋白表达水平均明显降低(P<0.05或P<0.01),100和 150 mg·L-1 BBR组细胞中SREBP-1蛋白表达水平明显降低(P<0.01).抑制FASN表达后,与对照组比较,shFASN1组和shFASN2组细胞中FASN蛋白表达水平均明显降低(P<0.01),且shFASN2组细胞中FASN蛋白表达水平低于shFASN1组(P<0.05);与对照组比较,shFASN1组和shFASN2组细胞中克隆形成数明显减少,细胞迁移率明显降低(P<0.01),且 shFASN2 组细胞迁移率明显低于 shFASN1 组(P<0.05).结论:BBR通过降低细胞中PI3K/AKT/SREBP-1/FASN通路相关蛋白的表达干扰胶质瘤T98G细胞中脂肪酸合成,进而降低其迁移和侵袭能力.

    小檗碱胶质瘤脂肪酸细胞迁移细胞侵袭

      原文链接:
    • 维普
    • 万方数据

    基于筒鞘蛇菰治疗高尿酸血症的网络药理学分析及其对高尿酸细胞模型和高尿酸血症模型小鼠的治疗作用

    刘丽黄林生赵永恒曹文洁...
    58-70页
    查看更多>>摘要：目的:基于网络药理学、分子对接和体内外高尿酸模型实验探讨筒鞘蛇菰治疗高尿酸血症(HUA)的作用,阐明其活性成分的主要作用靶点和信号通路相关机制.方法:通过台湾中医药资料库、本草组鉴数据库、化学专业数据库、TargetNet数据库、SwissTargetPrediction数据库、GeneCards数据库、药物靶点数据库(TTD)、DrugBank数据库、DisGeNET数据库、人类在线孟德尔遗传(OMIM)数据库和Venny数据库获取筒鞘蛇菰治疗HUA的潜在靶点;利用STRING数据库和Cytoscape软件构建筒鞘蛇菰活性成分-预测靶点网络和蛋白-蛋白互作(PPI)网络,并进行拓扑分析筛选筒鞘蛇菰主要活性成分和核心靶点,采用R软件进行基因本体论(GO)功能和京都基因组与基因百科全书(KEGG)信号通路富集分析,采用AutoDock Vina软件进行分子对接验证.NRK-52E细胞分为空白对照组、空白给药组、模型组和不同浓度(2.0、10.0 及 50.0 μmol·L-1)圣草酚(EDT)组,模型组和不同浓度EDT组细胞采用腺苷诱导制备高尿酸细胞模型,采用高效液相色谱(HPLC)法检测各组细胞培养上清液中尿酸(UA)水平.雄性ICR小鼠随机分为空白对照组、空白给药组、模型组和EDT组,后2组小鼠制备HUA模型,采用试剂盒检测各组小鼠血清中UA、肌酐(Cr)和血尿素氮(BUN)水平;取小鼠两侧肾组织,称质量,计算各组小鼠肾脏指数;TUNEL染色法观察各组小鼠肾组织中细胞凋亡情况;Western blotting法检测各组小鼠肾组织中蛋白激酶B(AKT)、磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)、磷脂酰肌醇 3-激酶(PI3K)、磷酸化磷脂酰肌醇3-激酶(p-PI3K)、B细胞淋巴瘤 2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)和基质金属蛋白酶 9(MMP-9)蛋白表达水平.结果:筛选得到筒鞘蛇菰6种活性成分,涉及 116 个交集靶点,14个核心靶点.富集分析得到1 828个GO条目和145条信号通路.分子对接结果,EDT与MMP-9具有较好的结合活性.高尿酸细胞实验,与空白对照组比较,模型组细胞中UA水平明显升高(P<0.01);与模型组比较,2.0、10.0和50.0 μmol·L-1 EDT组细胞中UA水平明显降低(P<0.01).与空白对照组比较,模型组小鼠血清中UA、Cr和BUN水平及肾脏指数明显升高(P<0.01);与模型组比较,EDT组小鼠血清中 UA、Cr和BUN水平及肾脏指数明显降低(P<0.05或P<0.01).与空白对照组比较,模型组小鼠肾组织中可见大量凋亡细胞;与模型组比较,EDT组小鼠肾组织中凋亡细胞数明显减少.与空白对照组比较,模型组小鼠肾组织中p-AKT/AKT及p-PI3K/PI3K比值和Bcl-2蛋白表达水平明显降低(P<0.05或P<0.01),Bax和MMP-9蛋白表达水平明显升高(P<0.01);与模型组比较,EDT组小鼠肾组织中p-AKT/AKT及p-PI3K/PI3K比值和Bcl-2蛋白表达水平明显升高(P<0.05或P<0.01),Bax和MMP-9蛋白表达水平明显降低(P<0.01).结论:筒鞘蛇菰活性成分EDT具有降UA作用,且可能通过激活PI3K/AKT信号通路抑制细胞凋亡并缓解肾损伤.

    网络药理学筒鞘蛇菰圣草酚高尿酸血症肾损伤

      原文链接:
    • 维普
    • 万方数据

    关节腔内注射脂肪干细胞对颞下颌关节骨关节炎模型兔关节软骨破坏的修复作用及其机制

    何静孙高李男男帕丽孜·阿不力克木...
    71-78页
    查看更多>>摘要：目的:探讨关节腔内注射脂肪干细胞(ADSCs)对颞下颌关节骨关节炎(TMJOA)模型兔关节软骨破坏的修复作用,并阐明其可能的作用机制.方法:27只兔随机分为对照组、模型组和ADSCs组.提取兔ADSCs进行培养,采用碘乙酸钠(MIA)注射法制备兔TMJOA模型.ADSCs组TMJOA模型兔颞下颌关节腔内连续2次注射1.0×106 mL-1ADSCs,对照组和模型组兔颞下颌关节腔内注射等量生理盐水,8周后取各组兔颞下颌关节行显微CT(Micro-CT)扫描,分析各组兔髁突组织的骨体积分数(BV/TV)、骨表面积/骨体积比(BS/BV)、骨小梁厚度(Tb.Th)、骨小梁间距(Tb.Sp)和骨小梁数(Tb.N),HE染色观察各组兔髁突组织病理形态表现,免疫组织化学染色法检测各组兔髁突组织中SRY相关高迁移率族盒基因9(SOX9)、基质金属蛋白酶13(MMP-13)和血管内皮生长因子(VEGF)的定位情况和蛋白表达水平,Western blotting法检测各组兔髁突组织中SOX9、MMP-13和VEGF蛋白表达水平.结果:Micro-CT扫描,与对照组比较,模型组兔髁突组织的BV/TV、Tb.Th 和Tb.N明显降低(P<0.05),BS/BV和Tb.Sp明显升高(P<0.05);与模型组比较,ADSCs组兔髁突组织的BV/TV、Tb.Th 和Tb.N明显升高(P<0.05),BS/BV和Tb.Sp明显降低(P<0.05).HE染色,对照组兔髁突软骨表面光滑,层次清晰,结构完整;与对照组比较,模型组兔髁突表面不规则,肥大层增厚,出现细胞缺失区和细胞簇状区;与模型组比较,ADSCs组兔髁突组织病理损伤明显减轻.免疫组织化学染色,与对照组和ADSCs组比较,模型组兔髁突组织中棕褐色颗粒增多,主要集中在肥大层,特别是骨软骨结合部位,髁突组织中SOX9、MMP-13和VEGF蛋白表达水平明显升高(P<0.05);与模型组比较,ADSCs组兔髁突组织肥大层和骨软骨结合部位棕褐色颗粒明显减少,髁突组织中SOX9、MMP-13和VEGF蛋白表达水平明显降低(P<0.05).Western blotting法,与对照组比较,模型组兔髁突组织中SOX9、MMP-13和VEGF蛋白表达水平明显升高(P<0.05);与模型组比较,ADSCs组兔髁突组织中SOX9、MMP-13和VEGF蛋白表达水平明显降低(P<0.05).结论:关节腔内注射ADSCs可有效修复TMJOA的软骨破坏,减轻软骨损伤,减缓骨关节炎进展.

    颞下颌关节骨关节炎脂肪干细胞软骨损伤软骨修复

      原文链接:
    • 维普
    • 万方数据

    人脐带间充质干细胞培养上清对米非司酮处理的人子宫内膜基质细胞存活、凋亡和子宫内膜容受性的影响

    武梦雪陈士玲刘艳米旭光...
    79-87页
    查看更多>>摘要：目的:探讨人脐带间充质干细胞培养上清(hUCMSCs-Sup)对米非司酮(Ms)处理的人子宫内膜基质细胞(hEndoSCs)增殖、凋亡和子宫内膜容受性的影响,并阐明其可能的作用机制.方法:体外培养hEndoSCs,分为对照组和40、60、80及100 μmol·L-1 Ms组,MTT法检测各组细胞存活率.hEndoSCs分为对照组、40 μmol·L-1 Ms组和60 μmol·L-1 Ms组,流式细胞术检测各组细胞凋亡率,Western blotting法检测各组细胞中凋亡相关蛋白B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)和Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白表达水平并计算Bcl-2/Bax比值.hUCMSCs-Sup作用后,hEndoSCs分为对照组、Ms组、Ms+hUCMSCs-Sup组和Ms+hUCMSCs-Sup+3-甲基腺嘌呤(3-MA)组,MTT法检测各组细胞存活率,流式细胞术检测各组细胞凋亡率,Western blotting法检测各组细胞中微管相关蛋白 1 轻链3B-Ⅱ(LC3B-Ⅱ)和微管相关蛋白1轻链3B-Ⅰ(LC3B-Ⅰ)蛋白表达水平并计算LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ比值,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测各组细胞中子宫内膜容受性标志分子mRNA表达水平.结果:与对照组比较,40、60、80和100 μmol·L-1 Ms组细胞存活率明显降低(P<0.05),且具有时间和剂量依赖性.与对照组比较,40和60 μmol·L-1 Ms组细胞凋亡率明显升高(P<0.05),细胞中Bcl-2/Bax比值明显降低(P<0.05).hUCMSCs-Sup作用后,与对照组比较,Ms组细胞存活率和细胞中LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ比值明显降低(P<0.05),细胞凋亡率明显升高(P<0.05),细胞中同源框基因A10(HOXA10)、白血病抑制因子(LIF)和整合素亚基β3(ITGB3)mRNA表达水平明显降低(P<0.05);与Ms组比较,Ms+hUCMSCs-Sup组细胞存活率和细胞中LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ比值明显升高(P<0.05),细胞凋亡率明显降低(P<0.05),细胞中HOXA10、LIF和ITGb3 mRNA表达水平表达明显升高(P<0.05);与Ms+hUCMSCs-Sup组比较,Ms+hUCMSCs-Sup+3-MA组细胞存活率和细胞中LC3B-Ⅱ/LC3B-Ⅰ比值明显降低(P<0.05).结论:hUCMSCs-Sup可提高Ms处理后hEndoSCs的存活率,降低其凋亡率,提高子宫内膜容受性,其机制可能与hUCMSCs-Sup激活hEndoSCs自噬有关.

    脐带间充质干细胞人子宫内膜基质细胞细胞凋亡细胞自噬子宫内膜容受性

      原文链接:
    • 维普
    • 万方数据