查看更多>>摘要:为探究饲粮加硒对Diquat诱导的鸡心脏氧化应激和细胞凋亡率的影响,将同一批次(180日龄)的健康且体重[(1.1±0.1)kg]相近的康乐黄鸡40只随机分成4组,经适应性饲养1周后,A、B组饲喂基础饲粮,C、D组饲喂添加亚硒酸钠饲粮(0.5 mg/kg硒),饲喂14 d后,B、C组腹腔注射15 mg/kg BW Diquat,A、D组腹腔注释等量生理盐水,处理4 d后处死所有鸡,采取心脏组织,采用苏木精-伊红(HE)染色方法观察心脏组织病理损伤情况,采用末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记测定法(TUNEL)观察心脏细胞凋亡的情况,采用氧化指标试剂盒测定心脏抗氧化相关指标,采用Western blot和实时荧光定量PCR方法在蛋白和基因水平上进行定量分析.结果表明:HE染色结果显示,与A组相比,B组心肌纤维断裂明显,组织界限模糊不清,而C组断裂的心肌纤维数量明显减少.TUNEL分析结果显示,B组的心脏细胞凋亡率极显著高于A组(P<0.01),C组的心脏细胞凋亡率极显著低于B组(P<0.01).抗氧化测定指标结果显示,B组心脏中的过氧化氢酶(CAT)活性显著低于A组(P<0.05),C组的心脏CAT活性显著高于B组(P<0.05),B组心脏中丙二醛(MAD)的含量显著高于A组(P<0.05),C组的心脏MAD含量极显著低于B组(P<0.01).Western blot结果显示,心脏的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)和核转录因子-κB(NF-κB)蛋白表达量在3组间并无统计学差异(P>0.05).实时荧光定量PCR结果显示,与A组相比,B组心脏中的Caspase-3和NF-κB mRNA相对表达量显著升高(P<0.05),C组心脏中NF-κB和Caspase-3的mRNA相对表达量比B组显著下降(P<0.05).以上研究结果表明,Diquat能够成功诱导康乐黄鸡心脏发生氧化应激和细胞凋亡,而饲喂富硒饲粮鸡心脏的氧化应激和细胞凋亡率都能得到一定程度的改善.