查看更多>>摘要:目的 探讨丁酸钠(NaB)联合索拉非尼(Sora)是否协同诱导铁死亡抑制肝癌细胞增殖及其机制.方法 CCK8、平板克隆实验和倒置光学显微镜观察探讨NaB或(和)Sora对HepG2肝癌细胞增殖活性的影响;GSH法和C11-BODIPY 581/591检测NaB或(和)Sora是否诱导HepG2细胞发生铁死亡;公共数据库TCGA分析肝癌组织与正常组织中YAP基因表达差异;Western blotting检测NaB或(和)Sora对HepG2细胞中YAP蛋白表达及其磷酸化水平的影响.结果 CCK8结果显示,2 mmol/L NaB联合Sora可显著降低HepG2肝癌细胞对Sora的IC50(P<0.001),联合指数法证实Sora与NaB联合具有协同作用(CI<1),铁死亡抑制剂(Fer-1)和YAP激活剂(XMU)则可逆转NaB联合Sora对HepG2细胞的增殖抑制作用(P<0.001、P<0.001);平板克隆实验结果显示,相较NaB或Sora单独处理,NaB联合Sora可显著抑制HepG2细胞克隆球形成(P<0.01,P<0.01);形态学观察结果显示,NaB或Sora单独处理均可使HepG2细胞分散,形态皱缩且数量减少,而两者联合处理可加剧这一现象;GSH法和C11-BODIPY 581/591检测结果显示,较NaB或Sora单独处理,NaB联合Sora可进一步降低细胞内GSH水平(P<0.001,P<0.05)和脂质ROS水平(P<0.05,P<0.01),Fer-1和XMU可逆转NaB联合Sora对HepG2细胞内GSH水平的下调作用(P<0.001,P<0.01)和脂质ROS水平的上调作用(P<0.01,P<0.05);TCGA分析结果显示,肝癌组织与正常组织相比YAP mRNA高表达(P<0.001);Western blotting结果显示,较NaB或Sora单独处理,NaB联合Sora进一步下调HepG2细胞YAP蛋白表达水平(P<0.05,P<0.05),上调YAP蛋白磷酸化水平(P<0.05,P<0.01).结论 NaB联合Sora可能通过抑制YAP诱导铁死亡,进而协同抑制肝癌细胞增殖.