查看更多>>摘要:目的 探索辅酶Q10(CoQ10)通过烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)/谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)信号通路,抑制发育高峰期大鼠在七氟醚重复暴露下引发的海马组织铁死亡和其对神经功能的影响.方法 出生后7d(P7)的Sprague-Dawley大鼠141只,置于麻醉箱中吸入2%七氟醚4 h/d,一共3 d,作为七氟醚重复暴露的动物模型.采用随机数字表法将其中138只大鼠分为6组(每组23只):空白对照组(A组,30%O2和70%N2混合气体4h/d,共3d)、重复麻醉组(B组,2%七氟醚4h/d,共3d)、空白对照+CoQ10模拟剂预处理组(C组,30%O2和70%N2混合气体4 h/d+CoQ10模拟剂预处理,共3d)、重复麻醉+CoQ10模拟剂预处理组(D组,2%七氟醚4h/d+CoQ10模拟剂预处理,共3d)、空白对照+CoQ10抑制剂预处理组(E组,30%O2和70%N2混合气体4 h/d+CoQ10抑制剂预处理,共3d)、重复麻醉+CoQ10抑制剂预处理组(F组,2%七氟醚4 h/d+CoQ10抑制剂预处理,共3d);剩余3只归为单次麻醉组(B-1组,2%七氟醚4h,仅用作血气检测).每组在实验完成后,首先取3只大鼠左心室取血进行血气分析验证实验动物模型的安全性;除B-1组外,每组取6只大鼠断头取脑,分离海马组织,应用试剂盒采用比色法进行亚铁离子(Fe2+)和谷胱甘肽(GSH)的检测、酶联免疫吸附测定(ELISA)法进行4-羟基壬烯醛(4-HNE)的检测;每组另取6只大鼠,用免疫印迹法(Western blot)检测GPX4、NADPH蛋白水平.每组剩余8只大鼠长期饲养,在大鼠成长至第4周、第20周时进行Morris水迷宫实验,通过定位航行实验中到达平台的游泳距离和空间探索实验中穿越原平台所在位置次数、原平台所在象限的游泳时间、第一次穿越原平台位置所需的时间验证大鼠成长后的学习记忆能力.结果 各组大鼠二氧化碳总量(TCO2)、pH值、动脉血氧分压(PaO2)、动脉血二氧化碳分压(PaCO2)、碳酸氢根(HCO-3)、脉搏血氧饱和度(SpO2)均在正常范围内,差异无统计学意义(均P>0.05).与A组比较,B组海马组织Fe2+、4-HNE含量较高(均P<0.05),GSH含量较低(P<0.05),GPX4、NADPH蛋白水平较低(均P<0.05),大鼠穿越原平台所在位置次数较少(P<0.05),原平台所在象限的游泳时间较短(P<0.05),第1次穿越原平台位置所需的时间较长(P<0.05).与B组比较:D组海马组织Fe2+、4-HNE含量较低(均P<0.05),GSH含量较高(P<0.05),GPX4、NADPH蛋白水平较高(均P<0.05),大鼠穿越原平台所在位置次数较多(P<0.05),原平台所在象限的游泳时间较长(P<0.05),第1次穿越原平台位置所需的时间较短(P<0.05);F组海马组织Fe2+、4-HNE含量较高(均P<0.05),GSH含量较低(P<0.05),GPX4、NADPH蛋白水平较低(均P<0.05),大鼠穿越原平台所在位置次数较少(P<0.05),原平台所在象限的游泳时间较短(P<0.05),第1次穿越原平台位置所需的时间较长(P<0.05).结论 P7大鼠重复暴露于七氟醚会出现铁死亡及成长后学习记忆能力的下降.CoQ10通过NADPH/GPX4通路可抑制七氟醚重复暴露所导致的铁死亡,具有神经保护作用.