查看更多>>摘要:目的 探究复方大黄散外敷联合针刺对类风湿关节炎大鼠关节滑膜超微结构、病理性血管生成及肾素血管紧张素系统(Ras)/蛋白激酶(Raf)信号通路的影响.方法 选取SPF级SD大鼠100只,按随机数字表法分为正常组、模型组、针刺组、外敷组、联合组,每组20只.除正常组外,其余各组大鼠双侧足跖部注射弗氏完全佐剂建立类风湿关节炎模型.造模后1周,针刺组针刺"阴陵泉""三阴交",留针30 min,连续干预6d,7d为1个疗程,共干预3个疗程.外敷组大鼠右后足跖部及踝关节外敷复方大黄散,10 g/次,2次/d,7 d为1个疗程,共干预3个疗程;联合组为针刺与复方大黄散外敷联合干预,共干预3个疗程.正常组和模型组不进行干预.采用ELISA法测定各组大鼠血清TNF-α、IL-1β水平,透射电镜观察滑膜细胞超微结构,HE染色观察滑膜组织形态,免疫组化检测滑膜组织中VEGF及血管内皮细胞生长因子受体2(VEGFR2)表达,Western blot法和RT-qPCR分别检测滑膜组织中Ras、Raf蛋白及mRNA表达.结果 与模型组比较,针刺组和外敷组大鼠血清TNF-α、IL-1β水平降低(P<0.05),滑膜组织VEGF、VEGFR2表达降低(P<0.05),Ras、Raf蛋白及mRNA表达降低(P<0.05);与针刺组和外敷组比较,联合组大鼠血清TNF-α、IL-1β水平降低(P<0.05),滑膜组织VEGF、VEGFR2阳性表达降低(P<0.05),Ras、Raf蛋白及mRNA表达降低(P<0.05).电镜结果显示,正常组关节滑膜细胞核膜良好,模型组核膜破坏严重,针刺组和外敷组均有不同程度改善,其中以联合组改善最为显著.HE染色显示,正常组大鼠关节滑膜组织正常,模型组关节滑膜组织有大量炎症细胞浸润,针刺组与外敷组关节滑膜损伤轻微改善,联合组大鼠病理损伤明显减轻.结论 复方大黄散外敷联合针刺可调节类风湿关节炎模型大鼠血管生成相关因子,调节Ras/Raf信号通路,改善滑膜细胞超微结构.