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期刊信息/Journal information
南方农业学报
广西壮族自治区农业科学院
南方农业学报

广西壮族自治区农业科学院

李杨瑞

月刊

2095-1191

nfnyxb@163.com

0771-3243905、3244920

530007

广西南宁市大学东路174号

南方农业学报/Journal Journal of Southern AgricultureCSCD北大核心CSTPCD
查看更多>>本刊是由广西农业科学院主办的综合性农业科技期刊，主要报道农业科研新成果、新技术、新方法，农业生产新经验、新产业等。
正式出版
收录年代

    我国甘蔗梢叶综合利用技术研究与应用

    谢彩锋刘治华姚慎刚赵红葵...
    1765-1777页
    查看更多>>摘要：作为甘蔗糖业的大宗副产物，甘蔗梢叶产量大且营养活性成分丰富，是优质的可再生资源。然而我国甘蔗梢叶综合利用率低，且高附加值产品少，未能充分发挥其优质资源优势。因此，文章结合甘蔗梢叶营养与肥效等特性，概述我国目前主要开发及产业化应用的甘蔗梢叶综合利用技术，包括制备反刍动物饲料、作锅炉燃料、粉碎还田或与滤泥混合堆沤还田、制备甘蔗梢叶饮料及提取活性物质等工作原理、研究及应用现状，并分析存在的主要问题，如高营养价值饲料仍处于起步阶段，综合利用产值低;锅炉燃料化技术推广应用缺乏关键理论与技术支撑;粉碎还田可能会增加甘蔗病虫鼠害风险;甘蔗梢叶饮料规模化生产缺乏适宜清净方法;活性物质的提取率低等。同时介绍近年新兴的甘蔗梢叶综合利用技术，如作中药材、畜禽养殖发酵床垫料及生产水产动物饲料、制备活性炭及其功能材料等。认为未来我国甘蔗梢叶发展应结合我国糖业主要发展趋势和相关产业发展需求，重点完善甘蔗梢叶制备发酵蛋白饲料、高腐质化肥料、中药材、活性炭及功能材料、饮料，以及活性物质提取等综合利用技术的关键理论研究并实现技术升级，加快这些技术推广应用;同时强化甘蔗梢叶新的综合利用技术开发，开发甘蔗梢叶新的应用途径，为早日实现我国甘蔗梢叶高端化利用打下理论基础或提供技术支撑。

    甘蔗梢叶综合利用肥料饲料中药材

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    宫内发育迟缓猪胎盘SLC7A2基因过表达对滋养层细胞增殖和迁移的影响

    胡光玲伍治敏张才在杨振清...
    1778-1786页
    查看更多>>摘要：[目的]探究溶质载体家族7成员2基因(SCL7A2)在正常初生重(NBW)和宫内发育迟缓(IUGR)猪胎盘中的表达差异，明确SCL7A2基因过表达对猪滋养层细胞(pTr2)增殖和迁移的影响，为揭示猪IUGR的发生发展机制提供参考依据。[方法]采用实时荧光定量PCR检测NBW和IUGR胎盘中SLC7A2基因相对表达量，通过免疫组织化学试验分析NBW和IUGR胎盘组织中SLC7A2蛋白的定位分布及表达情况，利用CCK-8试验检测SLC7A2基因过表达对pTr2细胞增殖能力的影响，并以细胞划痕试验检测SLC7A2基因过表达对pTr2细胞迁移能力的影响。[结果]IUGR胎盘中的SLC7A2基因相对表达量极显著高于NBW胎盘(P＜0。01，下同);SLC7A2蛋白在仔猪胎盘的滋养层细胞和血管内皮细胞中均有表达，且IUGR胎盘中的SLC7A2蛋白表达水平显著高于NBW胎盘(P＜0。05，下同)。以构建的SLC7A2基因过表达载体(Vector-SLC7A2+)转染pTr2细胞，细胞中的SLC7A2基因相对表达量较pEGFP-C1阴性对照载体(Vector-NC)转染组极显著上调，但pEGFP-C1的相对表达量与Vector-NC转染组无显著差异(P＞0。05)。以Vector-SLC7A2+和Vector-NC分别转染pTr2细胞后，Vector-SLC7A2+转染组的pTr2细胞增殖效果在转染后12、24、48和72 h显著或极显著低于Vector-NC转染组，pTr2细胞迁移率则表现为Vector-SLC7A2+转染组极显著低于Vector-NC转染组，表明SLC7A2基因过表达能有效抑制pTr2细胞的增殖和迁移能力。[结论]SLC7A2基因过表达会抑制猪胎盘滋养层细胞的增殖与迁移，影响胎盘的形态发育和母—胎间的营养转运效率，进而诱发猪IUGR的发生发展。

    猪SLC7A2基因胎盘宫内发育迟缓(IUGR)营养转运

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    柔嫩艾美耳球虫感染鸡盲肠内容物非靶向代谢组学分析

    翟少钦闫志强陈春林朱买勋...
    1787-1797页
    查看更多>>摘要：[目的]基于非靶向代谢组学探究感染柔嫩艾美耳球虫(Eimeria tenella)后鸡盲肠内容物中代谢物的变化差异，为识别和鉴定鸡球虫病潜在的生物标志物及治疗靶点提供参考依据。[方法]将60羽健康罗曼粉鸡随机分为正常组和模型组，每组30羽，模型组经口灌服柔嫩艾美耳球虫孢子化卵囊(1 × 104个/羽)，正常组经口灌服等体积生理盐水，连续灌服5 d，然后解剖试验鸡，无菌采集鸡盲肠内容物，基于非靶向代谢组学分析正常组和模型组鸡盲肠内容物，筛选出显著差异代谢物进行KEEG代谢通路富集分析。[结果]从模型组与正常组的鸡盲肠内容物中共筛选到253种显著差异代谢物，其中，上调表达的显著差异代谢物有184种，包含L-酪氨酸、L-蛋氨酸、L-谷氨酰胺、牛磺酸、花生四烯酸、二十二碳六烯酸乙酯、胆碱和磷酸胆碱等;下调表达的显著差异代谢物有69种，包括脱氧腺苷、L-缬氨酸、N-(5-氨基戊基)乙酰胺和N-乙酰-L-谷氨酸等。正离子模式下，主要有牛磺酸、磷酸胆碱、甜菜碱、L-亮氨酸、L-谷氨酰胺、胆碱、神经鞘氨醇和L-色氨酸等20种代谢物上调表达;负离子模式下，主要有花生四烯酸、牛磺酸、L-苯丙氨酸、L-亮氨酸、琥珀酸、黄嘌呤、尿嘧啶和L-谷氨酰胺等20种代谢物上调表达。鸡盲肠内容物显著差异代谢物主要被富集到ABC转运蛋白、氨酰tRNA生物合成、赖氨酸降解、嘧啶代谢、嘌呤代谢、不饱和脂肪酸生物合成等20条KEEG代谢通路上。[结论]柔嫩艾美耳球虫感染后鸡盲肠代谢物发生显著变化，主要影响ABC转运蛋白、氨酰tRNA生物合成、氨基酸代谢、嘧啶代谢和嘌呤代谢等代谢通路。因此，牛磺酸、磷酸胆碱、L-谷氨酰胺、花生四烯酸等显著差异代谢物可作为潜在的生物标志物，用于鸡球虫病诊断检测。

    鸡柔嫩艾美耳球虫盲肠内容物差异代谢物非靶向代谢组学

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    猪德尔塔冠状病毒N蛋白原核表达及其多克隆抗体制备

    赵梓桥张昆丽张春红翟少伦...
    1798-1806页
    查看更多>>摘要：[目的]构建猪德尔塔冠状病毒(Porcine deltacoronavirus，PDCoV)核衣壳(N)蛋白原核表达系统并制备多克隆抗体，为新型疫苗、诊断试剂研发及PDCoV致病机制的深入研究提供基础。[方法]提取PDCoV HeN17株RNA，经RT-PCR扩增，将N基因克隆至pGEX-6P-1载体构建重组原核表达质粒，转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞并进行IPTG诱导表达。利用Glutathione Sepharose 4B亲和层析纯化重组蛋白，采用3C蛋白酶去除标签。以纯化后的N蛋白为免疫原免疫3月龄新西兰大白兔制备多克隆抗体，采用间接酶联免疫吸附测定(ELISA)法测定抗体效价，并通过Western blotting、间接免疫荧光试验(IFA)和免疫沉淀(IP)试验对其进行鉴定。[结果]成功构建原核表达载体pGEX-6p-1-PDCoV-N，获得的PDCoV-N-GST重组蛋白主要以可溶性形式表达，大小约69 kD，经去除GST标签可获得单一目的蛋白条带，经测定蛋白浓度为12。6 mg/mL，获得的PDCoV-N蛋白能与PDCoV阳性血清反应产生单一特异性条带。制备的兔源抗PDCoV-N多克隆抗体效价达1:4096000，可特异性识别pCAGGS-Flag-N转染HEK-293T细胞中表达的Flag-N蛋白和PDCoV感染LLC-PK1细胞中表达的PDCoV-N蛋白，且能检测到PDCoV-N真核表达载体pCAGGS-Flag-N转染HEK-293T细胞中表达的PDCoV-N蛋白。[结论]成功构建高效PDCoV-N原核表达系统，获得纯度好、浓度高且免疫原性佳的PDCoV-N蛋白，制备的兔源抗PDCoV-N多克隆抗体效价高，具有较强亲和力和特异性，可用于Western blotting、IFA和IP检测。

    猪德尔塔冠状病毒(PDCoV)N蛋白原核表达多克隆抗体

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    鼠源ATP5B基因克隆及其原核和真核表达载体构建

    段辰星黄袁慧闵开骏李晓宁...
    1807-1816页
    查看更多>>摘要：[目的]克隆鼠源ATP5B基因，构建其原核和真核表达载体，为研究ATP5B蛋白功能及其在病毒感染过程中的作用机制提供基础。[方法]克隆鼠源ATP5B基因编码区(CDS)，运用ProtParam、ProtScale和SignalP-5。0等对ATP5B蛋白进行生物信息学分析。采用同源重组方法构建原核表达载体pGEX-4T-1-ATP5B-Flag和真核表达载体pcDNA3。0-ATP5B-F1ag。以原核表达载体pGEX-4T-1-ATP5B-F1ag转化大肠杆菌BL21感受态细胞，利用IPTG进行诱导表达，分析最适诱导温度和IPTG浓度。以真核表达载体pcDNA3。0-ATP5B-Flag转染HEK-293T细胞，通过Western blotting和间接免疫荧光试验(IFA)检测ATP5B蛋白在细胞中的表达及分布情况。[结果]鼠源ATP5B基因CDS长1590 bp，鼠源ATP5B蛋白由529个氨基酸残基构成，分子量为55 kD，理论等电点(pI)为5。21，属于稳定的疏水性蛋白，无跨膜结构域和信号肽，不属于分泌蛋白;鼠源ATP5B蛋白二级结构中α-螺旋占43。67％，无规则卷曲占32。51％，β-转角占9。45％，延伸链占14。37％。原核表达载体pGEX-4T-1-ATP5B-Flag经IPTG诱导后，通过考马斯亮蓝染色和Western blotting在81 kD处成功检测到融合蛋白，且主要以包涵体形式表达，诱导条件以30 ℃、0。5 mmol/L IPTG的效果更好。以真核表达载体pcDNA3。(-ATP5B-Flag转染HEK-293T细胞后，在55 kD处检测到Flag标签特异性条带，即ATP5B蛋白在HEK-293T细胞中成功表达，IFA检测结果表明该蛋白主要定位在细胞质中。[结论]成功构建鼠源ATP5B基因原核和真核表达载体，原核表达载体表达出的融合蛋白主要以包涵体形式存在，只有少量可溶蛋白，真核表达的ATP5B蛋白主要定位在细胞质中。鼠源ATP5B蛋白是理化性质稳定的疏水性蛋白，无信号肽位点，不属于分泌蛋白。

    鼠源ATP5B基因基因克隆生物信息学分析表达载体构建

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    吉富罗非鱼IRF9基因克隆及表达特征分析

    韩鹏夫彭文童桂香纪月鑫...
    1817-1827页
    查看更多>>摘要：[目的]明确吉富罗非鱼(Oreochromis niloticus)干扰素调节因子9基因(OnIRF9)的结构特征和组织表达模式，以及无乳链球菌感染和Poly(I∶C)刺激后的免疫应答情况，为揭示IRF9在罗非鱼免疫应答中的作用机制提供理论依据，进而丰富鱼类的IRF免疫学知识。[方法]通过RACE扩增OnIRF9基因cDNA序列，通过ExPASy、SMART、SignalP-5。0、TMHMM-2。0和Euk-mPLoc 2。0等在线软件进行生物信息学分析，并采用实时荧光定量PCR检测OnIRF9基因在健康吉富罗非鱼组织中的表达特征及无乳链球菌感染和Poly(I∶C)刺激后的表达变化。[结果]OnIRF9基因cDNA序列全长1828 bp，包含50 bp的5'端非编码区(5'-UTR)、485 bp的3'端非编码区(3'-UTR)和1293 bp的开放阅读框(ORF)，共编码430个氨基酸残基。OnIRF9蛋白分子量为48。42 kD，理论等电点(pI)为6。23，含有IRF典型的DBD结构域和IAD结构域，不含信号肽和跨膜结构域。OnIRF9氨基酸序列与其他硬骨鱼类IRF9氨基酸序列的相似性为56。2％～95。7％，其中与美妊丽鱼IRF9氨基酸序列的相似性最高(95。7％);基于IRF9氨基酸序列相似性构建的系统发育进化树也显示，吉富罗非鱼与其他参考鱼类聚为一簇，尤其与美妊丽鱼的亲缘关系最近。OnIRF9基因在健康吉富罗非鱼脑、血液、肌肉、肝脏、皮肤、心脏、脾脏、头肾、肠道和鳃组织中均有表达，以脑组织中的相对表达量最高，显著高于其他组织(P＜0。05)，而鳃组织中的相对表达量最低。经无乳链球菌感染和Poly(I∶C)刺激后，OnIRF9基因在吉富罗非脾脏、头肾和脑组织中的相对表达量在6 h内均极显著上升(P＜0。01)，但其相对表达量达到峰值的时间并不一致，提示OnIRF9基因在各组织中响应免疫应答时可能具有互补协调性。[结论]OnIRF9具有IRF典型的结构域(DBD和IAD)，尤其是DBD结构域的功能在脊椎动物中较保守;OnIRF9基因在中枢神经系统中发挥重要作用，且参与吉富罗非鱼抵御病原体入侵的免疫应答反应。

    吉富罗非鱼干扰素调节因子9(IRF9)无乳链球菌Poly(I∶C)免疫应答

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    广西北部湾织锦巴非蛤中培和养成期生长特性的比较

    刘一鸣徐炳杰王超奇杨凌...
    1828-1842页
    查看更多>>摘要：[目的]探明织锦巴非蛤(Paphia textile)在广西北部湾海域中培和养成期的适养密度和生长规律，为开展织锦巴非蛤规模化及高效养殖提供参考依据。[方法]于2022年1月—2023年7月分别在北海市营盘镇沙虫坪海区、防城港市白龙珍珠湾海区、钦州市犀牛脚镇渔港海区滩涂进行中培、养成及网笼吊养试验，比较织锦巴非蛤在不同海区、不同养殖密度下的生长性能差异，并通过幂函数回归分析法建立织锦巴非蛤的壳长—体质量异速生长方程。[结果]织锦巴非蛤在北海市营盘镇沙虫坪海区、防城港市白龙珍珠湾海区、钦州市犀牛脚镇渔港海区的适宜中培密度分别为2000、2000和1000粒/筐，北海市营盘镇沙虫坪海区织锦巴非蛤的各项生长指标及存活率均优于防城港市白龙珍珠湾海区和钦州市犀牛脚镇渔港海区，且随中培密度的增加呈下降趋势。养成期3个海区的织锦巴非蛤适宜养成密度分别为60、50和40粒/筐，相同密度组的生长指标及存活率均表现为北海市营盘镇沙虫坪海区＞防城港市白龙珍珠湾海区＞钦州市犀牛脚镇渔港海区。防城港市白龙珍珠湾海区网笼吊养模式下，织锦巴非蛤各项生长指标和存活率均随吊养密度的增加呈下降趋势，网笼吊养密度不宜超过50粒/笼。3个海区中培期3月龄织锦巴非蛤壳长与体质量的生长关系表现为正异速生长(快速生长)，而海区养成期9月龄和网笼吊养期的18月龄织锦巴非蛤表现为负异速生长(慢速生长)。[结论]在广西北部湾海域低潮区采用筐式底播模式进行织锦巴非蛤中培和养成具有可行性，且养殖效果以北海市营盘镇沙虫坪海区最佳，适宜中培密度为2000粒/筐，养成密度为60粒/筐。此外，15月龄织锦巴非蛤适宜在防城港白龙珍珠湾海区进行网笼吊养，能改善底播模式下织锦巴非蛤易受捕食者和夏季高温的影响。

    织锦巴非蛤养殖密度筐式底播网笼吊养异速生长广西北部湾

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    马链球菌兽疫亚种重组表面蛋白rSeseC-02147免疫效力评价

    林永进冯佩然杨亚林郭政...
    1843-1853页
    查看更多>>摘要：[目的]通过原核表达系统制备马链球菌兽疫亚种(SEZ)重组表面蛋白rSeseC-02147，并系统评价其抵御SEZ感染的免疫效力，为SEZ亚单位疫苗的研发提供候选抗原。[方法]构建原核表达载体pCold Ⅰ-SeseC-02147，转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞后进行异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导，纯化回收重组蛋白rSeseC-02147并免疫BALB/c小鼠，以SEZ灭活疫苗为阳性对照、PBS为阴性对照，二免后第14 d于小鼠颌下静脉采集血清，分别采用Western blotting和酶联免疫吸附试验(ELISA)检测重组蛋白rSeseC-02147反应原性及小鼠血清抗体效价和抗体亚型属性;并通过小鼠免疫保护试验、腹腔灌洗液细菌载量测定及脏器组织病理学观察，系统评估重组蛋白rSeseC-02147对小鼠的免疫保护力。[结果]构建的原核表达载体pCold Ⅰ-SeseC-02147经IPTG诱导能成功表达获得重组蛋白rSeseC-02147，其纯化后的浓度为2。86 mg/mL。重组蛋白rSeseC-02147能与免疫组和阳性对照组小鼠血清发生特异性反应，而与阴性对照组小鼠血清未发生特异性反应，表明重组蛋白rSeseC-02147具有良好的反应原性与特异性;以重组蛋白rSeseC-02147免疫小鼠产生的血清抗体效价远高于SEZ灭活疫苗，且IgG1亚型极显著高于IgG2a亚型(P＜0。01，下同)。重组蛋白rSeseC-02147可为小鼠提供抵御SEZ感染的免疫保护力，攻毒后14 d内的存活率60％;此外，重组蛋白rSeseC-02147免疫小鼠后的腹腔灌洗液细菌载量极显著低于阴性对照组小鼠，且肺脏、肾脏和脾脏等组织的病理损伤程度较轻。[结论]通过原核表达系统制备获得的重组蛋白rSeseC-02147具有良好的特异性与反应原性，通过抑制SEZ增殖及减轻SEZ对机体脏器的损伤而发挥免疫保护作用。可见，重组蛋白rSeseC-02147具有开发成SEZ亚单位疫苗的潜力。

    马链球菌兽疫亚种(SEZ)表面蛋白SeseC-02147基因免疫效力亚单位疫苗

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    家蚕体内细菌感染模型建立及不同菌株的协同致病特征分析

    范仕弘邵榆岚张永红罗家福...
    1854-1862页
    查看更多>>摘要：[目的]建立家蚕体内细菌感染模型，揭示不同细菌协同感染家蚕的致病力，明确云南蚕区家蚕细菌病的发病原因及其规律，为指导家蚕生产过程中细菌病的防治提供科学依据。[方法]从家蚕龄期、感染浓度和感染方法3个因素出发构建家蚕体内细菌感染模型，然后选用从云南地区自然发病蚕体中分离获得的5株肠道致病菌[Mamma-liicoccus sciuri(葡萄球菌属)、粘质沙雷氏菌(Serratia marcescens)、弗氏柠檬酸杆菌(Citrobacter freundii)、Klebsiella variicola(克雷伯菌属)和Pseudomonas soli(假单胞菌属)]，开展5种单菌感染及17种组合协同感染试验。[结果]通过建立家蚕体内细菌感染模型发现，家蚕群体添食细菌比单头添食的存活率低;细菌感染浓度选择时建议二龄期家蚕感染选用5。0 OD/mL、四龄期和五龄期家蚕感染选用10。0 OD/mL。选取的5株细菌对家蚕均具有致病力，整体上表现为随着细菌感染时间的延长，家蚕存活率逐渐降低;小蚕期感染细菌对家蚕的影响更明显，至五龄期有大量家蚕发病死亡，与养蚕过程中的细菌病发生规律相同。无论是小龄期感染还是大龄期感染，细菌协同感染的家蚕存活率总体上低于单菌感染，尤其是粘质沙雷氏菌参与的协同感染，至上蔟期的家蚕存活率均较低。此外，无论是二龄期感染还是四龄期感染，夏季家蚕的存活率总体上均高于春季家蚕，说明云南蚕区夏季家蚕的抗病力优于春季家蚕。[结论]5株分离自云南地区自然发病蚕体的病原菌对家蚕产生明显致病性，其致病性与感染龄期、感染浓度、不同细菌组合及感染季节等均有关，总体上具体表现为小蚕期感染较大蚕期感染对家蚕的影响更明显，细菌协同感染比单菌感染的危害更严重，且夏季家蚕感染后的存活率高于春季家蚕。

    家蚕肠道致病菌细菌感染模型存活率协同感染

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    柯乐猪XDH基因多态性鉴定及其对繁殖性状的影响

    向进熊力李维谢婷婷...
    1863-1872页
    查看更多>>摘要：[目的]明确黄嘌呤脱氢酶基因(XDH)单核苷酸多态性(SNP)位点与柯乐猪繁殖性状的关联性，为加速柯乐猪的育种进程提供理论依据。[方法]选取87头健康经产柯乐母猪为研究对象，采用Sanger测序法筛查出XDH基因SNP位点，利用SPSS 22。0中的一般线性模型(GLM)分析SNP位点与柯乐猪繁殖性状指标(产活仔数、初生窝重、平均初生重、断奶仔猪数、断奶窝重及平均断奶重)的关联性，并通过RNAfold web server、ExPASy-ProtParam、NovoPro和SWISS-MODEL等在线软件进行生物信息学分析。[结果]在柯乐猪XDH基因上共筛选获得12个SNPs位点，分别是第33 内含子上的g。108047658C＞G和g。108047680C＞A位点，第34内含子上的g。108048009C＞T、g。108048044T＞C、g。108048046T＞C、g。108048047C＞T、g。108048054C＞T、g。108048153A＞T、g。108048208A＞G、g。108048212T＞C 和g。108048242C＞T位点，第34外显子上的g。1 08047915G＞A位点。12个SNPs位点均存在3种基因型，属于中度多态位点(0。25＜PIC＜0。50);g。108048047C＞T、g。108048208A＞G、g。108048242C＞T、g。108048044T＞C、g。108048046T＞C和g。108048212T＞C位点的基因型分布符合Hardy-Weinberg平衡状态(PHWE＞0。05)，其余6个SNPs位点的基因型分布则显著偏离Hardy-Weinberg平衡状态(PHWE＜0。05)。除g。108047658C＞G位点与g。108047680C＞A位点、g。108048044T＞C位点与g。108048046T＞C位点、g。108048046T＞C位点与g。108048047C＞T位点间存在强连锁不平衡关系外，其余各SNP位点间均不存在强连锁不平衡关系。g。108047658C＞G和g。108047915G＞A位点对柯乐猪产活仔数的影响达显著水平(P＜0。05，下同)，g。108047658C＞G位点表现为CG基因型个体的产活仔数显著高于GG基因型个体，g。108047915G＞A位点表现为AG基因型个体的产活仔数显著高于AA基因型个体。g。108047915G＞A位点突变导致柯乐猪XDH基因mRNA二级结构发生改变，最小自由能由-1508。90 kcal/mol上升到-1507。80 kcal/mol;且XDH基因等位基因G的突变还导致其编码蛋白分子式、相对分子量、理论等电点(pI)、不稳定系数及蛋白高级结构发生改变。[结论]柯乐猪XDH基因第33内含子g。108047658C＞G位点和第34外显子g。108047915G＞A位点对其产活仔数的影响达显著水平，可作为柯乐猪繁殖性状改良的潜在分子辅助标记。

    柯乐猪XDH基因SNP位点繁殖性状产活仔数

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