查看更多>>摘要：[目的]探明花椒精油对番茄链格孢菌(Alternaria alternata)的抑菌效果及作用机制,以期为利用花椒精油作为植物源熏蒸剂进行茄果类蔬菜链格孢腐烂病的生物防治提供理论依据.[方法]以番茄链格孢菌菌株HJF-1为试验对象,设不同浓度(40、80、120、160和200 μg/mL)花椒精油及其3种主要成分芳樟醇、柠檬烯、月桂烯熏蒸HJF-1菌丝试验,以无菌水处理作为空白对照,评价不同物质对番茄链格孢菌的抑菌效果.通过显微镜观察、生理生化检测及离体接种等方法,进一步分析花椒精油和芳樟醇对病原菌的菌丝形态、孢子萌发、芽管长度、细胞膜完整性及致病力的影响,阐明花椒精油和芳樟醇熏蒸对番茄链格孢腐烂病菌的抑菌效果及作用机制.[结果]不同浓度的花椒精油及其3种主要成分熏蒸后,HJF-1菌落直径与对照之间存在明显差异,熏蒸抑菌效果表现为花椒精油＞芳樟醇＞月桂烯＞柠檬烯,花椒精油和芳樟醇的抑菌效果相对较强,二者的最小抑菌浓度(MIC)均为160 μg/mL.不同浓度花椒精油和芳樟醇熏蒸处理的菌丝生长抑制率存在显著差异(P＜0.05,下同),以200 μg/mL的浓度熏蒸72 h后,其菌丝生长抑制率分别达99.10％和99.00％.熏蒸浓度与生长抑制率呈剂量效应关系,花椒精油和芳樟醇对菌株HJF-1的半致死浓度(EC50)分别为85.98和89.84 μg/mL.花椒精油和芳樟醇熏蒸处理不仅能显著降低孢子萌发率,还可显著抑制孢子芽管伸长,以浓度为200 μg/mL花椒精油和芳樟醇熏蒸6 h后,菌孢子萌发率最低,分别为1.0％和1.2％,此时孢子芽管长度也最小,分别为9.2和10.8 μm.此外,花椒精油和芳樟醇还能引起病原菌畸形和细胞膜氧化破损,导致菌丝丙二醛含量在熏蒸12 h时上升至6.3和4.0 nmol/mL;熏蒸24 h时,胞外可溶性蛋白含量分别上升至11.9和9.1μg/L,胞外可溶性糖含量分别上升至263.8和237.2 μg/L,最终在熏蒸72 h时导致胞外相对电导率达最大值,分别为62.5％和50.5％.离体试验结果表明,2xMIC的花椒精油及芳樟醇熏蒸72 h可大幅降低链格孢菌的致病力,对链格孢腐烂病的相对防效分别达83.9％和75.6％.[结论]花椒精油及其主要成分芳樟醇通过抑制链格孢菌菌丝生长和孢子萌发而阻断病原菌侵染及延缓扩展,破坏细胞表面完整性而引起胞内物质渗漏及细胞功能紊乱,最终导致病原菌致病力降低.
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