查看更多>>摘要：目的 探究半夏有效成分环阿屯醇对小鼠心肌缺血再灌注损伤(Myocardial ischemia reperfusion injury,MIRI)的影响及作用机制.方法 在体外实验中,从 1～3 日龄的SD雄性大鼠乳鼠上提取原代心肌细胞,分为对照(Control)组、缺氧/复氧(Hy-poxia/Reoxygenation,H/R)组、环阿屯醇低剂量组(3 μmol·L-1)、环阿屯醇高剂量组(10 μmol·L-1)和SB203580 组.各组预给药干预后,在缺氧培养箱中缺氧培养 3 h,正常培养箱中复氧培养 3 h复制缺氧/复氧模型.利用CCK-8 检测各组心肌细胞活力,流式法检测细胞凋亡率,Western blot 检测 p38 MAPK、p-p38 MAPK 的表达水平.在体内实验中,将 7 周龄的雄性C57BL/6J小鼠随机分为对照(Control)组,缺血/再灌注损伤(Ischemia/Reperfusion,I/R)组,环阿屯醇低、中、高(0.2、0.5、1.0 mg·kg-1)剂量组.手术前 7 d 连续给药,通过小鼠心脏冠状动脉左前降支(Left anterior descending artery,LAD)结扎30 min,再灌注 24 h的方式制备MIRI模型.小动物超声心动图检测左心室射血分数(Left ventricular ejection fraction,LVEF)、小鼠心输出量(Cardiac output,CO)、左室缩短分数(Left ventricular fractional shortening,LVFS);TTC染色法检测各组小鼠心脏的缺血梗死面积的变化;HE 染色法观察各组小鼠心肌组织的变化;Western blot 检测小鼠心肌组织中 p38 MAPK、p-p38 MAPK、IL-6及TNF-α的表达水平;ELISA法检测小鼠血清肌酸激酶同工酶(CK-MB)、乳酸脱氢酶(LDH)、肌钙蛋白I(cTnI)、细胞白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平.结果 体外实验中,与 H/R 组相比,环阿屯醇预处理组和SB203580 组的心肌细胞活力有明显提高(P<0.05),细胞凋亡率有所下降(P<0.05),可以下调IL-6 表达水平(P<0.01),降低p-p38 MAPK/p38 MAPK的比值(P<0.05,P<0.01).体内实验证明,与I/R组相比,中、高剂量环阿屯醇预处理可以显著提高LVEF、LVFS及CO值(P<0.05,P<0.01),减少心肌缺血梗死面积(P<0.05),提高心肌功能,有效保护心肌组织纤维,下调小鼠血清中CK-MB、LDH、cTnI、IL-6 和 TNF-α 水平(P<0.05);环阿屯醇高剂量组降低 p-p38 MAPK/p38 MAPK 的比值(P<0.05),减少IL-6和TNF-α的表达水平(P<0.05).结论 环阿屯醇预处理可以保护小鼠心功能,减轻MIRI,其作用机制可能与抑制p38 MAPK磷酸化,减轻炎性反应有关.
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