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期刊信息/Journal information
农业生物技术学报
中国农业大学 中国农业生物技术学会
农业生物技术学报

中国农业大学 中国农业生物技术学会

武维华

月刊

1674-7968

nsjxb@cau.edu.cn

010-62733684

100193

北京海淀区圆明园西路2号中国农业大学生命科学楼1053室

农业生物技术学报/Journal Journal of Agricultural BiotechnologyCSCD北大核心CSTPCD
查看更多>>《农业生物技术学报》创刊于1993年，由中华人民共和国教育部主管，中国农业大学与中国农业生物技术学会共同主办，是一份为农业生物技术研究与发展提供服务的科学期刊。现任主编武维华院士，著名的植物生理学与生物化学家。主要刊登与农业科学有关的植物、动物、微生物及林业、海洋等学科在组织、器官、细胞、染色体、蛋白质、基因、酶、发酵工程等不同水平上的农业生物技术研究成果；刊登与农业有关的遗传与育种、生理、生化与分子生物学、环境与生态、医学、病理学等与基础与应用基础研究成果。
正式出版
收录年代

    黄芪根腐致病尖孢镰刀菌实时荧光定量PCR检测体系的建立及应用

    赵丽梅赵利田洪岭高芬...
    720-729页
    查看更多>>摘要：尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum)是引起蒙古黄芪(Astragalus membranaceus var.mongholicus,AMM)根腐病的优势致病菌之一.为了快速准确地检测和定量黄芪植株及其种植地土壤中的尖孢镰刀菌,根据延长因子(elongation factor-1α,EF-1α)序列设计引物并验证其特异性,进而建立该病菌的实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR,qRT-PCR)检测体系,并运用该体系对黄芪和土壤样本内的尖孢镰刀菌进行检测.结果表明,设计的引物FaeF2/FaeR2特异性良好;所建体系对黄芪中尖孢镰刀菌DNA的检测灵敏度为0.896 pg/μL,土壤中尖孢镰刀菌孢子量的检测限度为102个分生孢子/g;标准曲线的相关系数分别为0.998和0.973;重复性评价显示该方法可靠、稳定.利用qRT-PCR方法对黄芪和土壤样本进行检测,接种发病样本、疑似发病样本和土壤样本中,尖孢镰刀菌的总检出率分别为100%、66.7%和43.75%;尖孢镰刀菌在黄芪中的定殖量与病情指数正相关,且相同种植年限下,发病土壤中尖孢镰刀菌孢子数显著大于健康土壤.综上结果表明,所建方法适用于黄芪及土壤中尖孢镰刀菌的检测.本研究可为黄芪根腐病的快速诊断、准确评价及土壤预警提供技术支持.

    蒙古黄芪根腐病尖孢镰刀菌实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测体系

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    基于ORF3蛋白抗体的鹅圆环病毒间接ELISA检测方法的建立

    付环茹赵敏江锦秀陈翠腾...
    730-738页
    查看更多>>摘要：鹅圆环病毒(Goose circovirus,GoCV)是一种潜在的免疫抑制病原,主要感染宿主淋巴细胞,导致免疫功能下降,易造成其他病原继发感染,给养鹅(Anser cygnoides orientalis)业带来极大危害.为建立鹅圆环病毒血清学抗体的间接ELISA方法,本研究将GoCV的ORF3基因插入到原核表达载体pET-32a(+),构建重组质粒pET-32a-ORF3,经表达条件优化,以Ni柱亲和层析纯化目的蛋白,SDS-PAGE和Western blot分析表明,获得的重组ORF3蛋白具有良好的生物学活性.以纯化后的重组ORF3蛋白作为包被抗原,通过优化各反应条件建立了GoCV间接ELISA抗体检测方法.优化后的间接ELISA检测条件为:重组ORF3蛋白的最佳包被浓度为2.00 μg/mL、待检血清稀释度为1∶80、酶标二抗最佳稀释度分别为1∶4000(羊抗鸡HRP-IgG)和1∶8000(羊抗鸭HRP-IgG).采用建立的间接ELISA方法对鹅细小病毒(Goose parvovirus,GPV)、鹅源禽坦布苏病毒(Avian tembusu virus,ATmV)、鹅源H9N2亚型禽流感病毒(H9N2 subtype avian influenza virus,AIV)、鹅呼肠孤病毒(Goose reovirus,GRV)、新型鹅星状病毒(Goose astrovirus,GoAstV)、GoCV等鹅源阳性血清进行检测,结果显示,仅GoCV阳性血清为阳性结果,其他病原阳性血清检测结果均为阴性,特异性较强;重复性较好,批内和批间变异系数均小于5%.流行病学调查结果显示,福建和广东地区鸭(Anatinae)群中均存在GoCV跨种感染.本研究建立的检测GoCV血清抗体的间接ELISA方法特异性强、重复性好,可用于GoCV感染的诊断及流行病学调查研究.

    鹅圆环病毒(GoCV)ORF3蛋白原核表达间接ELISA流行病调查

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