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期刊信息/Journal information
农业生物技术学报
中国农业大学 中国农业生物技术学会
农业生物技术学报

中国农业大学 中国农业生物技术学会

武维华

月刊

1674-7968

nsjxb@cau.edu.cn

010-62733684

100193

北京海淀区圆明园西路2号中国农业大学生命科学楼1053室

农业生物技术学报/Journal Journal of Agricultural BiotechnologyCSCD北大核心CSTPCD
查看更多>>《农业生物技术学报》创刊于1993年，由中华人民共和国教育部主管，中国农业大学与中国农业生物技术学会共同主办，是一份为农业生物技术研究与发展提供服务的科学期刊。现任主编武维华院士，著名的植物生理学与生物化学家。主要刊登与农业科学有关的植物、动物、微生物及林业、海洋等学科在组织、器官、细胞、染色体、蛋白质、基因、酶、发酵工程等不同水平上的农业生物技术研究成果；刊登与农业有关的遗传与育种、生理、生化与分子生物学、环境与生态、医学、病理学等与基础与应用基础研究成果。
正式出版
收录年代

    牙鲆NTF3基因克隆与表达分析

    陈志鹏朱颖王磊胡国斌...
    732-740页
    查看更多>>摘要：造成牙鲆(Paralichthys olivaceus)工厂化养殖中大规模死亡的主要病原之一是迟缓爱德华氏菌(Edwardsiella tarda),其有感染力极强、致死率极高的特点,严重影响牙鲆水产养殖产业的健康发展.神经营养因子3(neurotrophin3,NTF3)是一种神经营养因子,可能参与免疫系统的调节.为研究NTF3在牙鲆先天免疫中的功能,本研究克隆了牙鲆NTF3基因的全长cDNA序列,其长度为1411 bp,其中,5'非编码区长89 bp,3'非编码区长428 bp,ORF长894 bp.基因ORF编码297个氨基酸.预测分子量(molecular weight,Mw)约为33.73 ku,理论等电点为9.56.同源比对发现,NTF3基因在不同物种间的相似度较高,牙鲆与高体鰤(Seriola dumerili)NTF3基因的同源性最高,为90.91％.NTF3基因在牙鲆健康组织(血液,肝脏,脾脏,肾脏,肠,皮肤,鳃,心脏和脑)中均有表达,皮肤中的表达量最高,血液中次之.为进一步探究牙鲆感染迟缓爱德华氏菌过程中NTF3相对表达量的变化,本研究对健康牙鲆进行了迟缓爱德华氏菌感染实验,比较了NTF3在4种组织(脾脏,肝脏,肠,肾脏)不同感染时间点的相对表达量,在脾脏、肝脏、肠中,牙鲆感染迟缓爱德华氏菌后NTF3基因的表达量均出现上调,但在肾脏中,NTF3的表达量呈现下调趋势.上述结果表明,NTF3基因参与了牙鲆抵抗迟缓爱德华氏菌感染的免疫过程,而病菌感染后不同组织中NTF3基因的相对表达量差异的结果为今后更深入研究NTF3基因在牙鲆免疫应答过程中发挥的作用提供了基础研究数据.

    牙鲆迟缓爱德华氏菌神经营养因子3(NTF3)基因表达

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    尼罗罗非鱼促性腺激素受体基因的克隆及表达分析

    李楠喻杰肖炜陈炳霖...
    741-752页
    查看更多>>摘要：卵泡刺激素受体(follicle-stimulating hormone receptor,FSHR)和促黄体生成素受体(luteinizing hormone receptor,LHR)同属于促性腺激素受体(gonadotropic hormone receptors,GtHR),在鱼类的繁殖活动中具有调节作用.尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)具有生长快,繁殖周期短的特点,并且具有较高的经济价值,为了探究GtHR与尼罗罗非鱼繁殖活动的关联,本研究使用cDNA末端快速扩增技术(rapid amplification of cDNA ends,RACE)和同源克隆技术获得了尼罗罗非鱼FSHR和LHR的cDNA序列全长,并通过设置不同催产素注射实验,测定2个基因在卵巢和精巢中的表达变化以及雌鱼血清中雌二醇(17α-estradiol,E2)和雄鱼血清中睾酮(testosterone,T)的浓度变化.结果显示,尼罗罗非鱼FSHR的cDNA全长2577 bp,编码701个氨基酸;LHR的cDNA全长3177 bp,编码693个氨基酸.qRT-PCR结果表明,2个基因均在性腺中高表达.催产素注射后,伴随着雌鱼血清中E2和雄鱼血清中T浓度的变化,性腺中FSHR呈现先升高后降低的表达模式,LHR呈现先升高后降低再升高的表达模式,且注射组FSHR和LHR在多个时间的表达量显著高于对照组,此外,催产素组合注射组2个基因表达量高于单一注射组.上述结果表明,FSHR和LHR可能参与尼罗罗非鱼繁殖活动;不同的催产素注射均能影响尼罗罗非鱼FSHR和LHR的表达,且催产素组合效果优于单一催产素.本研究为进一步阐明FSHR和LHR的生理功能和分子机制提供了基础资料,同时为尼罗罗非鱼生殖调控提供参考.

    尼罗罗非鱼卵泡刺激素受体(FSHR)促黄体生成素受体(LHR)序列分析基因表达

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    虹鳟体色相关基因mitfa的克隆和表达分析

    吴深基黄进强李永娟张倩...
    753-763页
    查看更多>>摘要：小眼畸形相关转录因子a基因(microphtalmia-associated transcription factor,mitfa)在动物体色形成过程中发挥重要的作用.为探讨mitfa基因在虹鳟(Oncorhynchus mykiss)体色变异中的调控作用,本研究采用cDNA末端快速扩增(rapid amplification of cDNA ends,RACE)技术首次获得了虹鳟mitfa基因的cDNA全长序列,并对其进行了生物信息学分析,同时利用qRT-PCR分析了野生型虹鳟(虹鳟)与黄色突变型虹鳟(金鳟)体色发生不同时期和不同组织中mitfa基因的表达差异.结果显示,虹鳟mitfa基因(GenBank No.MT813117)的cDNA全长序列2700 bp,其中开放阅读框1212 bp,编码403个氨基酸,5'UTR 114 bp,3'UTR 1374 bp;序列分析发现,虹鳟Mitfa蛋白序列与其他鱼类的同源性高于禽类、两栖类以及哺乳类,且基本螺旋-环-螺旋-亮氨酸拉链(basic helix-loop-helix-leucine zipper,bHLHZip)结构域在脊椎动物中高度保守;系统进化分析显示,虹鳟与褐鳟(Salmo trutta)的亲缘关系最近,与其他鱼类亲缘关系次之,与禽类、两栖类以及哺乳类亲缘关系最远;qRT-PCR分析表明,mitfa基因在虹鳟与金鳟胚胎及出膜后各时期均有不同程度的表达,均在受精期、4细胞期、16细胞期和桑葚期有较高的表达且显著高于其他各时期(P<0.05);虹鳟与金鳟相同时期的差异表达结果显示,该基因在受精期、16细胞期、桑葚期、囊胚期、体节期、心跳期、3 dph(days post hatch)、5 dph、7 dph、10 dph、1 M(month post hatch)和12 M背部皮肤中的表达差异极显著(P<0.01);mitfa基因在12月龄虹鳟和金鳟各组织中也均有表达,且都在背部皮肤中的表达量最高,在腹部的皮肤和肌肉、背部肌肉和眼中也有较高表达,其他组织该基因的表达相对较低.本研究结果表明,mitfa基因可能参与虹鳟色素细胞的形成过程,并与其体色变异密切相关.本研究结果为虹鳟体色变异分子调控机制研究及其体色遗传改良提供了基础资料.

    虹鳟体色小眼畸形相关转录因子a基因(mitfa)克隆表达分析

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    玉米大斑病菌交配型基因StMAT1-1和StMAT1-2表达与转录活性分析

    杨贝贝杨阳戴冬青刘宁...
    764-771页
    查看更多>>摘要：玉米大斑病菌(Setosphaeria turcica)的遗传变异源于病菌的有性生殖,为进一步探究玉米大斑病菌交配型基因在有性生殖中的作用,本研究对带有不同交配型(mating type,MAT)基因StMAT1-1和StMAT1-2的玉米大斑病菌菌株进行有性态诱导,采用qRT-PCR分析不同交配型菌株在有性态诱导0、15、30和60 d时StMAT1-1和StMAT1-2基因的表达规律,同时通过酵母(Saccharomyces cerevisiae)自激活试验检测不同交配型基因的转录激活活性.结果表明,有性态诱导前,有性态诱导15、30和60 d时StMAT1-1和StMAT1-2基因均有表达,且随着诱导时间延长,交配型基因在不同诱导组合中的表达量也随着时间的增加而显著变化,说明在玉米大斑病菌有性生殖过程中交配型基因起着重要的作用;酵母自激活实验发现,StMAT1-1和StMAT1-2基因编码产物均为转录因子,且具有较高的转录激活活性.研究结果为进一步探究交配型基因在调控玉米大斑病菌有性生殖过程中发挥的关键作用提供参考.

    玉米大斑病菌有性态诱导交配型基因自激活

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    夹竹桃天蛾质型多角体病毒在Sf9细胞系中的增殖研究

    况文东占智高关丽梅王金昌...
    772-779页
    查看更多>>摘要：新型夹竹桃天蛾质型多角体病毒(Daphnis nerii cypovirus-23,DnCPV-23)可杀灭多种天蛾科昆虫,具备开发新型昆虫病毒杀虫剂的潜力.目前,主要利用夹竹桃天蛾(Daphnis nerii)对该病毒进行研究,DnCPV-23在细胞中的复制情况尚不清楚.本研究将DnCPV-23病毒粒子接种至草地贪夜蛾(Spodoptera frugiperda)细胞系Sf9中,分析该病毒在细胞中的复制情况.将病毒感染的细胞置于27℃条件下进行培养,利用光学显微镜观察病毒对Sf9细胞状态的影响;分别提取第1、3和7 d感染细胞的RNA,以其为模板进行反转录获得cDNA,利用qRT-PCR分析DnCPV-23 RNA水平;利用qRT-PCR方法分别对细胞培养上清液和病毒连续传代的细胞进行研究.结果显示,DnCPV-23能较好地适应Sf9细胞且成功感染Sf9细胞,并产生细胞病变效应(cytopathic effect,CPE);在细胞培养上清液中能够检测到病毒片段;病毒能够在Sf9细胞上进行传代.该研究为深入研究DnCPV-23入侵、转录机制、评价病毒毒力提供了良好的细胞模型,同时为新型天蛾科害虫病毒杀虫剂的开发提供一定的参考和依据.

    新型夹竹桃天蛾质型多角体病毒(DnCPV-23)Sf9细胞病毒离体增殖

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    稳定表达蓝舌病病毒VP6蛋白的BHK-21细胞系构建

    李占鸿宋子昂杨振兴李卓然...
    780-788页
    查看更多>>摘要：蓝舌病病毒(Bluetongue virus,BTV)的VP6蛋白(viral structural protein 6)在病毒复制与基因组组装中发挥着重要作用,构建稳定表达BTV VP6蛋白的细胞系,可为VP6蛋白功能研究及基因工程疫苗研制提供基础资料.本研究通过RT-PCR扩增BTV的VP6基因,分别构建出表达VP6蛋白的原核表达质粒pET32-BTV-VP6与真核表达质粒pCDH-BTV-VP6.将pET32-BTV-VP6转入大肠杆菌(Escherichia coli),在16℃进行诱导培养,VP6重组蛋白部分以可溶形式表达,表达量约为总菌体蛋白的24.5％.采用镍离子亲和层析对表达的VP6重组蛋白进行纯化并免疫新西兰兔(Oryctolagus cuniculu),制备抗VP6蛋白的多克隆抗体,抗体效价可达1:12000;Western blot与免疫荧光染色证实,制备的多克隆抗体可与BTV感染细胞产生的VP6蛋白发生特异性结合.将真核表达质粒pCDH-BTV-VP6转染BHK-21细胞,使用嘌呤霉素对转染后的细胞进行连续筛选,构建稳定表达BTV VP6蛋白的细胞系BHK-BTV-VP6;以兔抗VP6多克隆抗体为一抗,进行Western blot与免疫荧光检测,证实VP6蛋白在细胞中稳定表达.本研究实现了BTV VP6重组蛋白在大肠杆菌中的成功表达与纯化,构建了稳定表达BTV VP6蛋白的细胞系,为BTV VP6蛋白功能研究以及新型基因工程疫苗研发提供物质基础.

    蓝舌病病毒(BTV)VP6蛋白原核表达细胞系

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    基因组编辑技术在大豆遗传改良中的应用

    陈笑冯献忠
    789-798页
    查看更多>>摘要：大豆(Glycine max)为人类和动物提供丰富的蛋白质和油脂来源,是世界上重要的粮油作物.转基因技术在大豆上的成功商业利用成为生物技术推动农作物生产发展的经典范例;近年来基因组编辑等新一代生物技术的快速发展为进一步改良大豆的农艺性状提供了机遇.当前以CRISPR/Cas技术为代表的基因组编辑技术已经开始应用于大豆的遗传改良,并在改善大豆品质、调控大豆生育期以及提高大豆抗逆性等方面显示出强劲的应用前景.本文从基因组编辑技术的发展、基因组编辑技术在大豆农艺性状改良中的应用和当前面临的主要问题等方面综述本领域的最新研究进展,为开展以基因组编辑技术为工具加速大豆遗传改良方面的工作提供借鉴.

    大豆基因组编辑农艺性状遗传改良

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    真菌富含半胱氨酸小分子量泌出蛋白的研究进展

    张子辉靳晶豪陈孝仁
    799-812页
    查看更多>>摘要：真菌的泌出蛋白中常含有一类富含半胱氨酸的小分子蛋白(small cysteine-rich proteins,SCRs),长度通常不到200个氨基酸,半胱氨酸残基含量约为2％～20％.其中一些成员是植物病原真菌的无毒蛋白,显示出这类蛋白可能在真菌的生活史中起着重要的作用.本文对SCRs的分子结构、细胞定位以及生物学功能进行了综述,尤其是从参与病原真菌的侵染致病与影响真菌的生长发育两方面着重阐述该类蛋白的生物学功能,最后对该类蛋白的研究与发展方向进行了展望.本文为阐明SCRs蛋白在真菌中的生物学功能提供了归纳总结,为进一步厘清其在病原真菌与寄主互作过程中的作用以及为植物真菌病害的防控奠定了基础.

    真菌富含半胱氨酸小蛋白(SCRs)效应蛋白毒性植物免疫

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    基于文献计量的土壤微生物群落研究国际发展态势

    马宁沈其荣张超李想...
    813-824页
    查看更多>>摘要：土壤微生物群落是生态系统的重要组成部分,在调节植物生长、促进土壤结构的形成及维持生态系统功能和稳定性等方面有着不可替代的作用.本研究运用CiteSpace文献可视化软件,对1990～2020年Web of Science核心数据库收录的6909篇关于土壤微生物群落的文献进行数据挖掘,研究结果表明,关于土壤微生物群落研究的发文量呈指数型上升;中国和美国的发文量较多,中美之间多有合作交流;中国科学院虽然首发年限较晚,但在土壤微生物群落研究方面占有重要地位.深度挖掘土壤微生物群落研究方面的高被引文献,结合文献交叉引用分析,推测未来研究方向包括动态微生物群落、温带山地森林土壤、土壤生态系统特征和多种不可培养细菌群等;进一步利用关键词共现网络和突发性检测分析发现当前的研究热点集中于"功能多样性(functional diversity)"、"凋落物分解(litter decomposition)"和"微生物多样性(microbial diversity)"等方向.该研究结果可为土壤微生物群落研究的发展、布局以及技术的创新提供思考与借鉴.

    土壤微生物群落CiteSpace文献计量学可视化分析

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