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期刊信息/Journal information
农业生物技术学报
中国农业大学 中国农业生物技术学会
农业生物技术学报

中国农业大学 中国农业生物技术学会

武维华

月刊

1674-7968

nsjxb@cau.edu.cn

010-62733684

100193

北京海淀区圆明园西路2号中国农业大学生命科学楼1053室

农业生物技术学报/Journal Journal of Agricultural BiotechnologyCSCD北大核心CSTPCD
查看更多>>《农业生物技术学报》创刊于1993年,由中华人民共和国教育部主管,中国农业大学与中国农业生物技术学会共同主办,是一份为农业生物技术研究与发展提供服务的科学期刊。现任主编武维华院士,著名的植物生理学与生物化学家。主要刊登与农业科学有关的植物、动物、微生物及林业、海洋等学科在组织、器官、细胞、染色体、蛋白质、基因、酶、发酵工程等不同水平上的农业生物技术研究成果;刊登与农业有关的遗传与育种、生理、生化与分子生物学、环境与生态、医学、病理学等与基础与应用基础研究成果。
正式出版
收录年代

    表达E7蛋白的重组减毒李斯特菌在小鼠宫颈癌模型中的治疗效果

    潘晓欣崔明珠罗亚如孙静...
    1206-1215页
    查看更多>>摘要:单核细胞增多性李斯特菌(Listeria monocytogenes)是一种能在细胞间迁徙繁殖并能促进抗原特异性CD4+和CD8+ T细胞增殖产生适应性细胞免疫的优质候选疫苗活载体.本课题组发现新型减毒李斯特菌(attenuated Listeria monocytogenes,LAM)较野生型李斯特菌的溶血能力和增殖能力均显著降低的同时仍可正常分泌李斯特菌溶血素O(Listeriolysin O,LLO)蛋白.为了研究LAM的安全性及其对宫颈癌特异性抗原E7蛋白的递送与免疫效果,本研究在小鼠(Mus musculus)模型上检测了LAM的毒力,并对LAM-E7重组菌株在小鼠宫颈癌免疫治疗和预防中的作用进行了评价.结果显示,LAM对小鼠的毒力是野生型李斯特菌毒力的1/8709,且小鼠脏器中的LAM可在一周内被清除.本研究通过同源重组的方法将E7基因整合到LAM基因组上,PCR鉴定结果显示,LAM-E7菌株构建成功.Western blot结果显示,E7蛋白能够与LLO在重组菌株中融合表达并释放.通过对LAM-E7的体外生长能力和溶血活性分析发现,融合后对LAM的生长能力和溶血能力无显著影响,表明E7蛋白的融合不会影响LAM的安全性.通过腹部皮下注射方式构建小鼠宫颈癌模型发现,LAM-E7组小鼠肿瘤平均体积(161.1202 mm3)显著小于LAM组(349.4625 mm3)和PBS组(512.4149 mm3)(P<0.01),说明接种LAM-E7对肿瘤生长具有显著的抑制作用.经免疫预防试验发现,LAM-E7组小鼠肿瘤平均体积(3.86 mm3)显著小于LAM组(172.67 mm3)和PBS组(57.38 mm3)(P<0.001),表明LAM-E7对宫颈癌有一定的预防效果.本研究证实LAM-E7对小鼠宫颈癌具有良好的治疗和预防效果,为减毒李斯特菌作为疫苗载体用于宫颈癌治疗提供了新的思路,也为今后宫颈癌治疗疫苗的研发提供数据支持.

    减毒李斯特菌宫颈癌免疫治疗载体疫苗

    展示口蹄疫病毒优势中和表位的铁蛋白纳米颗粒制备及其在小鼠模型上的免疫原性评价

    卢炳州茹毅郝荣增李亚军...
    1216-1226页
    查看更多>>摘要:蛋白纳米颗粒能够在表面展现多拷贝抗原,模拟病毒的结构形态,更有利于免疫细胞摄取和促进抗原递呈,从而增强疫苗保护效力.本研究旨在利用大肠杆菌(Escherichia coli)表达系统制备展示口蹄疫病毒(Foot-and-mouth disease virus,FMDV)优势中和表位的铁蛋白纳米颗粒,并评估其免疫原性.首先以幽门螺杆菌(Helicobacter pylori)铁蛋白序列为基础,将FMDV优势中和表位序列插入铁蛋白第33和34位氨基酸之间,同时将耶尔森氏菌属(Yersinia)T细胞表位序列插入铁蛋白氨基酸序列的氨基末端,构建具有铁蛋白序列、B细胞表位(优势中和表位)和T细胞表位的重组表达质粒pET28a-FBT,以仅插入铁蛋白序列的重组质粒pET28a-Fer作为对照.将重组质粒转入大肠杆菌感受态细胞,经诱导表达和分子筛层析纯化获得目的蛋白,利用SDS-PAGE、Western blot、粒径分析和透射电镜进行鉴定,进一步免疫BALB/c小鼠(Mus musculus)评价免疫原性.结果显示,利用大肠杆菌表达系统成功制备的铁蛋白纳米颗粒FBT可与FMDV阳性血清发生特异性反应;FBT免疫14d即产生血清抗体,并持续升高,在免疫35d中和抗体效价最高可达1∶128;同时,FBT免疫小鼠的脾淋巴细胞增殖水平和白介素2(interleukin 2,IL-2)、IL-4、IL-10、干扰素-γ(interferon-γ,IFN-γ)分泌水平显著高于对照组(P<0.05).本研究制备了展示FMDV中和表位且具有良好免疫原性的铁蛋白纳米颗粒,为新型口蹄疫基因工程疫苗的研制提供技术支持.

    铁蛋白纳米颗粒口蹄疫病毒(FMDV)中和表位T细胞表位免疫原性

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