查看更多>>摘要:猪德尔塔冠状病毒(Porcine deltacoronavirus,PDCoV)是近年来新发的猪肠道冠状病毒,给养猪业造成了巨大的经济损失.为了解PDCoV感染新生仔猪(Sus scrofa domesticus)的致病性及肠道的病理超微结构变化,本研究对1日龄新生仔猪攻毒PDCoV CHN-GD16-05毒株后的临床表现、剖检与组织病理学变化、组织嗜性、肠道超微结构变化进行观察及分析.结果发现,新生仔猪攻毒PDCoV后第3天出现严重呕吐、腹泻、精神萎靡、嗜睡等临床症状;剖检发现,攻毒仔猪肠道胀气,肠管扩张,肠壁出血变薄甚至透明,肠腔内积聚黄色液体;PDCoV主要感染仔猪的十二指肠、空肠和回肠;荧光定量PCR和蛋白免疫印迹结果显示,空肠中PDCoV核衣壳蛋白(nucleocapsid,N)基因及其蛋白水平均极显著高于十二指肠和回肠(P<0.01);进一步空肠组织切片的苏木精伊红染色结果显示,PDCoV感染后破坏肠绒毛结构,引起弥漫性的肠绒毛萎缩甚至融合,隐窝上皮细胞增殖及隐窝深度增加;电镜观察也发现PDCoV感染后的仔猪肠绒毛萎缩,肠上皮细胞的微绒毛断裂脱落,细胞间紧密连接被破坏,胞质空泡状细胞增多,线粒体数目减少且体积增大;此外,PDCoV感染刺激宿主的抗病毒相关基因表达,促进干扰素α(interferon α,IFN-α)、IFN-β、IFN-λ和其下游干扰素刺激基因黏病毒抗性蛋白1(myxovirus resistance 1,MX-1)、干扰素刺激基因15(interferon-stimulating gene 15,ISG-15)、干扰素诱导的四肽重复蛋白1(interferon induced protein with tetratricopeptide repeats 1,IFIT1)、2'-5'-寡腺苷酸合成酶1(2'-5'-oligoadenylate synthetase 1,OAS1)、2'-5'寡腺苷酸合成酶样蛋白(2'-5'-oligoadenylate synthetase like,OASL)及炎症因子肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor α,TNF-α)、白细胞介素 1β(interleukin 1β,IL-1β)、IL-6、C-C基序趋化因子配体 20(C-C motif chemokine ligand 20,CCL-20)基因的表达.以上结果表明,PDCoV感染新生仔猪后能够迅速入侵小肠,尤其在空肠上皮细胞中大量复制,导致感染的肠上皮细胞变性坏死进而引起肠绒毛萎缩,造成渗透性腹泻.本研究为阐明PDCoV感染仔猪的致病机制提供理论基础.