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期刊信息/Journal information
农业生物技术学报
中国农业大学 中国农业生物技术学会
农业生物技术学报

中国农业大学 中国农业生物技术学会

武维华

月刊

1674-7968

nsjxb@cau.edu.cn

010-62733684

100193

北京海淀区圆明园西路2号中国农业大学生命科学楼1053室

农业生物技术学报/Journal Journal of Agricultural BiotechnologyCSCD北大核心CSTPCD
查看更多>>《农业生物技术学报》创刊于1993年，由中华人民共和国教育部主管，中国农业大学与中国农业生物技术学会共同主办，是一份为农业生物技术研究与发展提供服务的科学期刊。现任主编武维华院士，著名的植物生理学与生物化学家。主要刊登与农业科学有关的植物、动物、微生物及林业、海洋等学科在组织、器官、细胞、染色体、蛋白质、基因、酶、发酵工程等不同水平上的农业生物技术研究成果；刊登与农业有关的遗传与育种、生理、生化与分子生物学、环境与生态、医学、病理学等与基础与应用基础研究成果。
正式出版
收录年代

    香鱼LECT2双抗体夹心ELISA法的建立及初步应用

    许立琼史雨红陈炯
    1703-1714页
    查看更多>>摘要：白细胞衍生趋化因子(leucocyte cell-derived chemotaxin 2,LECT2)的表达量对鱼类健康状态具有指示作用.本研究利用毕赤酵母(Pichia pastoris)表达香鱼(Plecoglossus altivelis)重组PaLECT2蛋白(recombinant PaLECT2,rPaLECT2),分别免疫小鼠(Mus musculus)和新西兰白兔(Oryctolagus cuniculus)制备抗血清,再用Protein G亲和层析柱纯化获得抗体.以小鼠抗PaLECT2抗体作为捕获抗体以及辣根过氧化酶(horseradish peroxidase,HRP)标记的兔抗PaLECT2抗体作为检测抗体,通过条件优化建立双抗体夹心酶联免疫吸附法(double-antibody sandwich enzyme-linked immunosorbent assay,DAS-ELISA).最后应用该方法检测嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)感染香鱼的模型和抗生素治疗的预后模型中血清PaLECT2蛋白含量.研究结果显示,小鼠和HRP-兔抗PaLECT2抗体效价分别为1∶12800和1∶25600.当捕获抗体浓度为8 μg/mL而检测抗体稀释比例为1∶1600时,为最佳捕获抗体包被浓度和检测抗体工作浓度.所建DAS-ELISA法的最低检测限为11.22 ng/mL,具有良好的特异性和重复性.应用本方法测得感染组中PaLECT2的含量为(412±31.5)ng/mL,极显著高于健康组(54±7.2)ng/mL(P＜0.001),而治疗组中PaLECT2的含量为(225±56.1)ng/mL,极显著低于感染组(P＜0.01).综上,本研究为PaLECT2蛋白表达水平的定量检测提供了一种更加快捷、标准化的方法,有望应用于香鱼健康状况诊断和监测.

    白细胞衍生趋化因子(LECT2)双抗体夹心ELISA法(DAS-ELISA)香鱼初步应用

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