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畜牧兽医学报
中国畜牧兽医学会
畜牧兽医学报

中国畜牧兽医学会

文杰

月刊

0366-6964

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010-62815987 62816996 62893836

100193

北京海淀区圆明园西路2号

畜牧兽医学报/Journal Acta Veterinaria Et Zootechnica SinicaCSCD北大核心CSTPCD
查看更多>>本学报是中国畜牧兽医学会主办，《畜牧兽医学报》编委会、中国农业科学院畜牧研究所编辑出版的全国性的畜牧兽医学术刊物。创刊于1956年7月，刊登较高水平的学术论文和企业研究报告以及对生产实践具指导性、启发性的文章。为全国中文核心期刊、中国自然科学核心期刊，并被国内外重要引文数据库及文摘性期刊收录。主要栏目包括畜牧和兽医两大学科。
正式出版
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    水禽StAR基因克隆、表达及其对睾丸发育的影响

    欧阳宏佳孙敬帅江丹莉潘建秋...
    3013-3022页
    查看更多>>摘要：旨在获取水禽StAR基因的结构和组织表达规律,初步了解其对水禽睾丸发育的影响.本研究选取山麻鸭和狮头鹅的下丘脑和睾丸组织为材料,克隆StA R基因,并采用实时荧光定量PCR方法检测该基因在山麻鸭和狮头鹅不同组织中的表达规律,并进一步比较该基因在不同时期鹅睾丸组织中的表达差异.本试验克隆获得鸭StAR基因3个转录本(dSTAR-A、dSTAR-B和dSTAR-C),dSTAR-A和dSTAR-B编码序列相同,编码283个氨基酸,而dSTAR-C编码238个氨基酸;获得鹅STAR基因两个转录本(gSTAR-A和gSTAR-B),均编码283个氨基酸.比对分析发现,鸭和鹅StAR氨基酸序列与其他禽类的同源性较高,在物种间的保守性高.StA R基因在鸭和鹅的各个组织中均有表达,其中在睾丸中表达量最高,在腹脂、胸肌和腿肌也有较高的表达水平.比较不同时期公鹅的睾丸,发现该基因在3岁龄时表达水平极显著高于1和52日龄(P<0.01),且在成年公鹅繁殖期的表达水平极显著高于休产期(P<0.01).结果表明,StA R基因可能是鹅睾丸发育所必需的关键基因,并参与成年公鹅繁殖性能的调控.

    水禽StAR基因克隆基因表达繁殖

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    影响江苏地区荷斯坦牛体细胞数变化模式的非遗传因素分析

    梁艳张强高启松王海洋...
    3023-3032页
    查看更多>>摘要：旨在探究江苏地区荷斯坦牛体细胞数变化模式的影响因素.本研究通过对江苏地区12个奶牛场2017—2019年荷斯坦牛253706条DHI测定日SCC记录进行分析,在划分9种SCC变化模式基础上,利用最小二乘法探究不同牧场规模、胎次、产犊季节、产犊间隔和305天产奶量对荷斯坦牛SCC变化模式的影响.结果表明,SCC模式在各因素不同水平间分布均有极显著差异(P<0.01).其中,较低-维持模式在5000头以上的牧场比例最高,较低-感染模式的比例最低;感染-维持模式在1000头以下的牧场比例最高,较低-维持模式的比例最低.较低-维持模式在1胎牛的比例最高,感染-痊愈模式的比例最低;较低-感染模式在5胎牛的比例最高,较低-维持模式的比例最低.较低-感染模式在春季产犊时奶牛的比例最高,较低-维持模式的比例最低;易感-降低模式在夏季产犊时奶牛的比例最高,较低-感染模式的比例最低.较低-感染模式在产犊间隔为441 d以上的奶牛比例最高,较低-感染模式在产犊间隔为300～400 d的奶牛比例最低.较低-感染模式在305天产奶量为3000～5000 kg的奶牛比例最高;较低-维持模式在305天产奶量为9001～11000 kg的奶牛比例最高,感染-痊愈模式的比例最低.上述结果表明,不同牧场规模、胎次、产犊季节、产犊间隔和305天产奶量对荷斯坦牛SCC变化模式的分布均有一定影响,该结果为荷斯坦牛隐性乳房炎的预测提供了参考.

    SCC变化模式非遗传因素荷斯坦牛

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    AMPK激活剂在绵羊精液冷冻保存中的作用研究

    汪棋汪长建魏宗友陆汉希...
    3033-3045页
    查看更多>>摘要：旨在研究AMPK激活剂二甲双胍(metformin,Met)和阿卡地新(acadesine,AICAR)对绵羊精液冷冻保存效果的影响.本研究首先在冷冻基础稀释液中分别添加不同浓度(0、100、200、300、400、500μmol·L-1)的M et和AICAR,冷冻解冻后根据精子活力、运动性能和结构完整性指标筛选出最佳的添加浓度(400μmol·L-1 Met、200μmol·L-1 AICAR);然后分别使用不同的冷冻稀释液(对照组:稀释液;Met组:含400μmol·L-1 Met的稀释液;AICAR组:含200μmol·L-1 AICAR的稀释液)冷冻精液,解冻后检测精子中AM PK蛋白表达、顶体酶活性、代谢指标、线粒体功能以及抗氧化酶活性.结果表明,稀释液中添加400μmol·L-1 Met和200μmol·L-1 AICAR均可显著提高解冻后精子活力、运动性能及精子结构完整性(P<0.05),其中400μmol·L-1 Met组精子总活力达43.20％,顶体完整率为91％,质膜完整率为46％.与对照组相比,Met组和AICAR组解冻后精子中AMPK磷酸化水平显著升高(P<0.05);顶体酶活性显著提高(P<0.05);丙酮酸水平显著下降(P<0.05),乳酸脱氢酶活性、乳酸以及ATP含量均显著升高(P<0.05);与对照组相比,Met和AICAR组稀释液更有利于维持线粒体膜电位(P<0.05),提高ATP酶(P<0.05)以及抗氧化酶的活性(P<0.05).添加适当浓度的AMPK激活剂可以提高绵羊精液冷冻保存的效果.

    绵羊精液冷冻保存AMPK激活剂精液品质

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    牛卵泡颗粒细胞CART相互作用蛋白鉴定及受体筛选

    成俊丽郝庆玲侯淑宁朱芷葳...
    3046-3056页
    查看更多>>摘要：旨在筛选牛卵泡发育关键负调控因子可卡因-苯丙胺调节转录肽(cocaine and amphetamine regulated tran-script peptide,CART)的相互作用蛋白及其受体.本研究采集3头健康母牛双侧卵巢,分离卵泡后刮取颗粒细胞(granulosa cells,GCs)混样;采用跨膜蛋白Extraction试剂盒提取膜蛋白,运用Protein G琼脂糖磁珠与重组CART蛋白、Anti-CART抗体共孵育(n=3);洗脱CART-蛋白复合物进行二级质谱(LC-MS/MS)分析;获得的蛋白经可信度过滤,利用生物信息学技术对其进行功能聚类分析,通过CELLO V2.5软件对蛋白进行亚细胞定位和跨膜区分析;获得7次跨膜的G蛋白偶联受体(G-protein-coupled receptors,GPCRs),经ProtScale软件分析其胞内外结构区段特点,符合神经肽与受体结合结构特点的GPCR作为CART的候选受体.抽提的膜蛋白经免疫亲和层析(n=3)后,分别鉴定出149、557和298个相互作用蛋白,经筛选剔除重复蛋白,共鉴定出620个蛋白.多数据库集功能富集分析表明,CART相互作用蛋白包含参与信号传导活性的GNAS、GNG8和JUP,参与类固醇生物合成的HSD3B,参与细胞凋亡或增殖调节的OPA1和S100A11,参与Notch信号通路的ERH,这些蛋白或信号通路均与牛卵泡发育密切相关.亚细胞定位和跨膜区分析共获得膜蛋白156个,占总蛋白数的20.53％;其中7次跨膜的GPCRs有8个.经TMHMM分析表明,8个GPCRs中仅ZMPSTE24、HM13和GPR108的N端在胞外,C端在胞内,与神经肽受体的结构特征一致;经PredictProtein结合位点分析表明,ZMPSTE24在5～6跨膜区间的胞内环存在G蛋白结合的位点.ZMPSTE24作为CART的候选受体,有待于分子互作和功能试验进一步加以验证.本研究为牛卵泡CART受体的鉴定奠定了基础,对丰富牛卵泡发育调控理论具有重要意义.

    牛卵泡可卡因-苯丙胺调节转录肽G蛋白偶联受体质谱分析

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    自噬调节因子Atg5和Beclin1在不同来源小鼠胚胎早期发育过程中的表达分析

    马睿王萌孙莹芮弦...
    3057-3067页
    查看更多>>摘要：旨在探究自噬调节因子Atg5和Beclin1在胚胎早期发育过程中的表达模式及胚胎的不同生产方式对两种因子表达的影响.本研究将6～8周龄雌性小鼠进行超数排卵,分为2组,一组收集小鼠卵母细胞,孤雌激活处理后进行体外培养;另一组超排小鼠与公鼠1:1合笼,第2天收集小鼠受精卵进行体外培养;分别在2细胞期、4～8细胞期、桑葚胚期和囊胚期收集不同阶段小鼠孤雌激活胚胎和自然受精胚胎.提取RNA和蛋白,通过实时荧光定量PCR、Western blot等方法检测自噬关键因子A tg5和Beclin1的表达,通过间接免疫荧光法检测Atg5和Beclin1在小鼠囊胚中的表达定位.结果显示,小鼠自然受精和孤雌激活胚胎在发育各时期均可表达A tg5和Beclin1,表达量在胚胎发育的早期呈现出较高的水平,其中二者的表达在小鼠自然受精胚胎中从2细胞期起逐渐降低,而在孤雌激活胚胎的4～8细胞阶段表达量最高,与同期自然受精胚胎差异极显著(P<0.01);从4细胞期开始,各时期孤雌激活胚胎中Atg5和Beclin1蛋白表达水平均高于自然受精胚胎,差异极显著(P<0.01);在囊胚中,滋养层细胞和内细胞团中均可检测到Atg5和Beclin1蛋白的荧光,但内细胞团中的荧光强度高于滋养层细胞,且Beclin1蛋白在孤雌激活胚胎囊胚内细胞团中荧光强度高于自然受精胚胎.自噬关键因子Atg5和Beclin1在不同来源小鼠胚胎早期发育各时期均有不同程度的表达,提示自噬对早期胚胎发育的调控作用与胚胎的生产方式存在一定关联,研究结果为进一步探索细胞自噬参与哺乳动物胚胎发育的生理调控提供理论依据.

    胚胎发育孤雌激活自然受精自噬

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    咖啡酸对玉米赤霉烯酮诱导小鼠卵巢颗粒细胞凋亡的保护作用

    裴亚萍赵瑾孙娜孙盼盼...
    3068-3075页
    查看更多>>摘要：卵巢颗粒细胞通过与卵母细胞相互作用及其自身分泌作用为卵泡的形成和发育成熟提供特殊的微环境.多种有害刺激可引起颗粒细胞凋亡和代谢失调从而降低卵母细胞质量,对胚胎的形成产生负面影响.玉米赤霉烯酮(zearalenone,ZEA)是畜禽养殖业中常见的造成卵巢颗粒细胞损伤的霉菌毒素,且缺少有效治疗药物.因此,本试验用ZEA造成小鼠卵巢颗粒细胞损伤,探究咖啡酸对ZEA诱导的小鼠卵巢颗粒细胞凋亡的保护作用.通过机械法分离小鼠卵巢颗粒细胞;运用间接免疫荧光法对分离出的细胞进行鉴定;使用MTT法测定咖啡酸对正常小鼠卵巢颗粒细胞活性的影响;选取200、100和50μg·mL-1咖啡酸分别与ZEA共处理颗粒细胞,同时设置细胞对照组和ZEA模型组,24 h后显微镜观察细胞形态及贴壁情况,MTT法检测细胞活力;qRT-PCR技术检测caspase-3 mRNA的表达;Western blot检测cleaved-caspase-3和cleaved-PARP蛋白水平.结果发现,FSHR阳性染色大量出现在试验组细胞胞浆中,提示分离到的细胞是小鼠卵巢颗粒细胞;咖啡酸对卵巢颗粒细胞没有毒性作用且细胞活力均在90％ 以上;与空白对照组细胞相比,ZEA组细胞体积较小,贴壁较差,细胞间隙增大,细胞活力显著降低(P<0.001),caspase-3 mRNA相对表达量以及cleaved-caspase-3和cleaved-PARP蛋白表达水平显著升高(P<0.001),而给予咖啡酸处理后细胞间隙减小,贴壁紧密,细胞活力显著升高(P<0.001),显著降低ZEA诱导的caspase-3 mRNA含量增加(P<0.001),显著降低凋亡相关蛋白cleaved-caspase-3和cleaved-PARP的表达(P<0.001).本研究发现,咖啡酸可通过抑制ZEA诱导的细胞凋亡,恢复颗粒细胞活性.

    咖啡酸玉米赤霉烯酮卵巢颗粒细胞细胞凋亡

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    甘草酸单铵盐预防油酸钠致奶牛原代肝细胞损伤作用的研究

    张才邵琦徐文浩贾哲...
    3076-3086页
    查看更多>>摘要：肝细胞损伤是围产期奶牛脂肪肝病的主要病理特征.本研究旨在探讨甘草酸单铵盐(monoammonium-glycyrrhizinate,MAG)对油酸钠诱导奶牛原代肝细胞损伤的影响.试验以体外培养的肝细胞为研究对象,根据处理不同分为对照组(未做处理的原代肝细胞)和试验组(模型组、M AG组:分别添加0、0.25 mg·L-1的M AG对原代肝细胞预处理12 h,再使用浓度为0.25 mmol·L-1的油酸钠诱导肝细胞脂肪变性),随后用CCK-8法检测肝细胞活性、DAPI染色统计凋亡率,紫外比色法检测上清中ALT、AST的含量,油红O染色结合imageJ面积统计法分析细胞内脂肪沉积水平,实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测样品肝细胞脂代谢相关基因PPARα、SREBP-1c、ChREBP、CPT1、CPT2、MTP和炎症相关基因TNF-α、NF-κB、IL-1β、IL-6、IL-8的mRNA表达水平.试验结果显示,经油酸钠诱导后,0.25 mg·L-1的MAG预处理的肝细胞活性显著高于未经处理的模型组(P<0.05),凋亡率明显降低(P<0.05),培养上清中ALT、AST的释放水平有所降低(P<0.05).MAG组细胞内脂滴数量和平均脂滴面积较模型组明显减少(P<0.05),脂代谢基因ChREBP、PPARα、MTP和炎症相关基因TNF-α、IL-1β、NF-κB、IL-6、IL-8的mRNA表达水平均显著下调(P<0.05).结果表明,MAG能通过抑制脂代谢和炎症因子相关基因的表达,有效减少油酸钠诱导的肝细胞内脂肪的沉积,缓解肝细胞损伤.

    甘草酸单铵盐肝细胞油酸钠炎症脂肪代谢

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    饲粮代谢能和粗蛋白质水平对冬毛生长期雄性水貂生产性能、营养物质消化率、血清生化指标和脏器指数的影响

    韩菲菲钟伟张新宇蔡煕姮...
    3087-3100页
    查看更多>>摘要：本试验旨在探讨饲粮代谢能(metabolic energy,ME)和粗蛋白质(crude protein,CP)水平对雄性水貂生产性能、营养物质消化率、血清生化指标及脏器指数的影响.选取180只(145±5)日龄、体重相近[(1765±26)g]的健康雄性水貂,随机分为6组,每组30个重复,每个重复1只.试验采用2×3双因素设计,C P水平为30.45％ 和34.58％,M E水平为13.11、14.94、16.76 M J·kg-1,饲养试验于2018年9月29日至2018年12月10日完成.结果表明:1)175～213日龄阶段,34.58％C P组水貂体重极显著高于30.45％C P组(P<0.01),且低M E水平13.11 M J·kg-1组水貂体重极显著低于其它M E组(P<0.01);175～190及213日龄阶段,A组(C P 30.08％、M E 13.03 MJ·kg-1)水貂体重极显著低于其余各组(P<0.01),205日龄时,E组(CP 34.86％、ME 15.08 MJ·kg-1)水貂体重较高;2)34.58％CP组水貂鲜皮长和鲜皮重极显著大于30.45％CP组(P<0.01),14.94 MJ·kg-1 ME组水貂的鲜皮长显著大于其他ME组(P<0.05);但16.76 MJ·kg-1 ME组的鲜皮重极显著大于13.11 MJ·kg-1组(P<0.01);E组(CP 34.86％、ME 15.08 MJ·kg-1)水貂的鲜皮长、鲜皮重极显著大于A组(CP 30.08％、ME 13.03 MJ·kg-1)、B组(CP 30.46％、ME 14.80 MJ·kg-1)两组(P<0.01).3)34.58％CP组水貂脂肪消化率极显著大于30.45％CP组(P<0.01);且饲粮ME水平为13.11 MJ·kg-1时,水貂的脂肪消化率极显著低于其它ME组(P<0.01);A组(CP 30.08％、ME 13.03 MJ·kg-1)、D组(CP 34.17％、ME 13.19 MJ·kg-1)水貂的脂肪消化率极显著低于其它各组(P<0.01).4)30.45％CP组水貂血清LDL极显著高于34.58％CP组(P<0.01),但血清HDL极显著低于34.58％CP组(P<0.01);13.11 MJ·kg-1 ME组水貂血清Alb、GLU、CHO、TG和HDL均极显著低于16.76 MJ·kg-1 ME组(P<0.01);C组(CP 30.80％、ME 16.99 MJ·kg-1)、E组(CP 34.86％、ME 15.08 MJ·kg-1)、F组(CP 34.72％、ME 16.53 MJ·kg-1)水貂血清Alb、GLU显著高于其他组(P<0.05);E组(CP34.86％、ME15.08MJ·kg-1)、F组(CP34.72％、ME16.53MJ·kg-1)水貂血清HDL极显著高于其他各组(P<0.01).5)30.45％CP组水貂心脏、肝脏指数显著高于34.58％CP组(P<0.05);13.11 MJ·kg-1 ME组水貂心脏指数显著高于其它各组(P<0.05);A组(CP 30.08％、ME 13.03 MJ·kg-1)水貂的心脏、肝脏指数显著高于E组(CP 34.86％、ME 15.08 MJ·kg-1)(P<0.05).综上所述,当饲粮CP水平为34.86％,M E水平为15.08 M J·kg-1时,水貂可获得较好的生长性能、毛皮品质和较高的营养物质消化率.

    代谢能粗蛋白质冬毛生长期水貂生产性能营养物质消化率血清生化指标脏器指数

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    1种检测弓形虫急性感染的夹心ELISA方法

    李祎王先梅杨旭邓均华...
    3101-3110页
    查看更多>>摘要：弓形虫(Toxoplasmagondii)是一种人畜共患机会性致病原虫,其急性感染可导致宿主产生明显的临床症状和严重的病理损伤.弓形虫致密颗粒蛋白1(dense granuleprotein 1,GRA1)是一种良好的诊断抗原,也是弓形虫急性感染的标志物循环抗原(circulating antigen,CAg)的重要组分.本研究利用TgGRA1单克隆抗体建立双抗体夹心ELISA方法,为急性弓形虫感染的检测提供依据.将免疫GRA1-His的小鼠脾细胞与SP2/0进行融合,筛选出能稳定分泌抗体的杂交瘤细胞.选择其中一种单抗与HRP标记后的鼠源GRA1多抗配对,建立1种双抗体夹心ELISA方法,检测人工感染弓形虫的猪和小鼠血清样品,并将检测效果与巢式PCR(nest PCR,nPCR)和商品化试剂盒进行比较.结果筛选到4株杂交瘤细胞,腹水效价为106～107,亚型均为IgG1;IFA和Western blot结果显示,4株单抗均具有良好的反应性和特异性.选择1G2单抗和HRP标记多抗配对,建立了循环抗原双抗体夹心ELISA方法,最低能够检测到血清中1.563 ng·mL-1 GRA1抗原,或者100 ng·mL-1 ESA.该方法与nPCR相比具有较高的一致性,较市售商品化试剂盒更为准确可靠.本研究第1次将GRA1抗原作为急性弓形虫感染的诊断指标,建立相应的检测方法,成功地在人工感染样品中检测到弓形虫急性感染,可为弓形虫急性感染的诊断提供参考,对临床上急性弓形虫病的治疗有指导意义.

    弓形虫急性感染GRA1单克隆抗体循环抗原双抗体夹心ELISA

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    柔嫩艾美耳球虫延伸因子1α特性与功能初步分析

    梁珊珊朱顺海赵其平黄兵...
    3111-3121页
    查看更多>>摘要：鸡球虫病在世界范围内对家禽业具有重大的经济影响,导致高死亡率、低增长、低生产力和高防治成本.由于球虫耐药性问题严峻,球虫病的防治重点倾向于研究方便安全,并且与活疫苗相比更容易生产的亚单位疫苗.因此,迫切需要新的方法来有效地控制球虫病,包括寻找特定的分子靶标.本文以柔嫩艾美耳球虫孢子化卵囊cD-NA第一链为模板,扩增了延伸因子1α(EtEF1α)的ORF序列,生物信息学分析显示,该基因编码450个氨基酸,预测相对分子质量为49.1 ku,等电点为4.7;编码的蛋白无信号肽和跨膜结构域,但都含有N-肉豆蔻酰化位点.qRT-PCR和Western blot分析EtEF1α在虫体不同发育阶段的mRNA转录水平和蛋白翻译水平,结果显示,EtEF1α在子孢子(Spz)和裂殖子(Mrz)的mRNA转录水平高于未孢子化卵囊(UO)和孢子化卵囊(SO),翻译水平在UO和M rz高表达;间接免疫定位发现,EtEF1α主要定位于Spz一端和整个M rz,随着虫体在细胞内发育,荧光强度逐渐增强.分泌试验显示该蛋白为分泌蛋白,但不是由微线体分泌的.入侵抑制试验结果表明,兔抗r EtEF1α多克隆抗体能抑制子孢子入侵D F-1细胞,抑制率约为22％.综上表明,该蛋白可能参与了虫体在宿主细胞内的生长发育和子孢子入侵宿主细胞的过程.

    柔嫩艾美耳球虫延伸因子1α特性分析入侵

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