查看更多>>摘要:目的 探讨1,25(OH)2D3介导维生素D受体(VDR)表达对髓核细胞氧化应激损伤的影响.方法 将人椎间盘髓核细胞随机分为对照组、H2O2组(400 µmol·L-1 H2O2)、1,25(OH)2D3组[100.00 nmol·L-1 1,25(OH)2D3+400μmol·L-1H2O2],1,25(OH)2D3+si-NC 组[100.00 nmol·L-1 1,25(OH)2D3+400 μmol·L-1 H2 O2+si-NC],1,25(OH)2 D3+si-VDR 组[100.00 nmol·L-1 1,25(OH)2D3+400 μmol·L-1H2O2+si-VDR].以噻唑蓝(MTT)法检测细胞存活率,以蛋白质印迹法检测各组细胞蛋白表达水平,以流式细胞术、JC-1荧光探针法、DCFH-DA探针法分别检测细胞凋亡、线粒体膜电位、活性氧(ROS)水平,以试剂盒检测丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)水平.结果 对照组、H2O2组、1,25(OH)2D3组、1,25(OH)2D3+si-NC 组和 1,25(OH)2 D3+si-VDR组的细胞存活率分别为(100.00±2.43)%、(63.79±5.21)%、(90.11±7.24)%、(88.79±6.48)%和(55.31±4.65)%,VDR 蛋白相对表达水平分别为 0.79±0.06、0.28±0.03、0.68±0.05、0.69±0.06和0.34±0.04,细胞 凋亡率 分别为(4.12±0.26)%、(19.37±1.21)%、(8.49±0.57)%、(8.23±0.60)%和(14.68±1.37)%,线粒体膜电位水平分别为(100.00±4.31)%、(49.46±5.02)%、(82.14±7.02)%、(83.14±5.12)%和(67.16±5.48)%,ROS 水平分别为 1.79±0.12、7.98±0.51、3.87±0.34、3.92±0.22 和5.79±0.28,Beclin-1 蛋白相对表达水平分别为 0.86±0.09、0.35±0.04、0.76±0.07、0.75±0.08和0.46±0.05,LC3-Ⅱ/LC3 Ⅰ 蛋白相对表达水平分别为 1.00±0.07、0.25±0.04、0.78±0.07、0.85±0.08 和 0.42±0.05.H2O2组的上述指标与对照组比较,1,25(OH)2D3组的上述指标与H2O2组比较,1,25(OH)2D3+si-VDR组的上述指标与1,25(OH)2D3+si-NC组比较,在统计学上差异均有统计学意义(均P<0.05).结论 1,25(OH)2D3可能上调VDR表达促进髓核细胞自噬、抑制细胞凋亡,发挥抗氧化应激损伤.