查看更多>>摘要：背景 中医药治疗腹泻具有疗效迅速、不良反应少、费用低廉等优势.连翘具有清热解毒、消肿散结的功效,目前就其治疗腹泻方面的研究鲜有报道.目的 观察连翘叶乙醇提取物(FS ext)对小鼠蓖麻油性腹泻的影响,并研究其对家兔离体空肠平滑肌自发性收缩的影响及其作用机制.方法 2018年6—12月,于四川省南充市采集连翘叶并经提取得到FS ext,采用高效液相色谱法分析FS ext的化学成分;取60只禁食4 h(可自由饮水)的小鼠随机分为0.5 g/kg FS ext试验组、1.0 g/kg FS ext试验组、2.0 g/kg FS ext试验组、4.0 g/kg FS ext试验组、8.0 g/kg FS ext试验组、16.0 g/kg FS ext试验组,每组10只,分别给予0.5 g/kg、1.0 g/kg、2.0 g/kg、4.0 g/kg、8.0 g/kg、16.0 g/kg的FS ext进行灌胃,记录14 d内小鼠的死亡情况和毒性迹象,建立相应的剂量-效应曲线,从而确定FS ext的半数致死剂量(LD50),以确定其安全性.另取50只小鼠随机分成阴性组、阳性组、0.25 g/kg FS ext试验组、0.50 g/kg FS ext试验组、1.00 g/kg FS ext试验组,每组10只,阴性组给予0.9％氯化钠溶液(20 ml/kg)灌胃,阳性组给予洛哌丁胺(4 mg/kg)灌胃,0.25 g/kg FS ext试验组、0.50 g/kg FS ext试验组、1.00 g/kg FS ext试验组分别给予0.25、0.50、1.00 g/kg FS ext.给药30 min后,小鼠均给予蓖麻油0.4 ml灌胃,观察4 h内以下指标:初始半固体粪便时间,固体、半固体、液体粪便数量.采用腹泻指数(EI)评估腹泻的严重程度.取42只健康家兔,制备离体空肠平滑肌,观察FS ext对离体空肠平滑肌自发性收缩的影响:分别用乙酰胆碱(ACh,10μmol/L)和氯化钾(KCl,60 mmol/L)预处理离体空肠平滑肌,来探究FS ext对其诱导的离体空肠平滑肌自发性收缩的影响;用含FS ext或维拉帕米(1μmol/L)的无Ca2+高K+台式液预处理离体空肠平滑肌,然后累计CaCl2进一步研究其机制.结果 FS ext中主要含连翘苷和连翘酯苷A等化学成分;小鼠按不同剂量的FS ext进行灌胃后,在观察期内未出现任何死亡或毒性迹象.阳性组初始半固体粪便时间长于阴性组、0.25 g/kg FS ext试验组、0.50 g/kg FS ext试验组(P<0.05);1.00 g/kg FS ext试验组初始半固体粪便时间长于阴性组、0.25 g/kg FS ext试验组(P<0.05).阴性组EI高于阳性组、1.00 g/kg FS ext试验组(P<0.05);0.25 g/kg FS ext试验组、0.50 g/kg FS ext试验组EI高于阳性组(P<0.05).FS ext(0.01～10.00 mg/ml)以剂量依赖性的方式抑制家兔离体空肠平滑肌的自发性收缩,并抑制由ACh和KCl诱导的空肠收缩,同时,FS ext也能抑制CaCl2诱导的空肠平滑肌自发性收缩,并使CaCl2量-效关系曲线右下移,与维拉帕米引起的CaCl2量-效关系曲线变化类似.结论 FS ext有明显的抗小鼠蓖麻油性腹泻作用,并能抑制家兔离体空肠平滑肌的自发性收缩及ACh和KCl诱导的空肠收缩,其机制可能与阻断M受体和抑制L-型钙离子通道有关.
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