查看更多>>摘要:背景 阿尔茨海默病(AD)是一种常见且不可逆转的神经退行性脑疾病,严重影响患者的生活品质和生存质量,目前仍缺乏有效的治疗方法延缓或阻止疾病进展.中药及其活性成分在防治AD方面具有重要潜力.目的 探讨茯苓酸(PA)对AD大鼠认知障碍及核因子E2 相关因子 2(Nrf2)/溶质载体家族 7A11(SLC7A11)/谷胱甘肽过氧化物酶 4(GPX4)信号通路的影响.方法 2022 年 1-9 月将 75 只 6~8 周龄雄性SPF级SD大鼠依据随机数字表法分为对照组(Control组)、AD模型组(Model组)、PA治疗组(PA组),PA+Nrf2 抑制剂组(PA+ML385组),除Control组外制备AD大鼠模型.造模成功后,PA组腹腔注射 50 mg/kg PA,PA+ML385 组腹腔注射 50 mg/kg PA+30 mg/kg Nrf2 抑制剂ML385,Control组与Model组腹腔注射等量 0.9%氯化钠溶液.末次给药 24 h后进行Morris水迷宫实验,第 2、4、6 天进行定位航行实验,记录大鼠到达平台的时间(逃避潜伏期),第 7 天移走平台,记录大鼠在 120 s内滞留平台时间和穿越平台次数.Nissl染色后观察各组大鼠海马神经元病理变化,普鲁士蓝染色检测海马组织铁沉积,免疫荧光染色检测海马神经元GPX4 表达,检测海马组织谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)、Fe2+含量,蛋白质印迹法(Western blotting)检测大鼠海马组织Nrf2、SLC7A11、GPX4 蛋白表达.结果 末次给药第 2、4、6 天Model组逃避潜伏期高于Control组、PA组,PA+ML385 组高于PA组,差异有统计学意义(P<0.05);Model组平台停留时间、穿越平台次数低于Control组、PA组,PA+ML385 组低于PA组,差异有统计学意义(P<0.05).Nissl染色结果示Model组神经元坏死严重,细胞核皱缩,尼氏体数目减少;PA组神经元坏死减少,排列紧密且尼氏体增多;PA+ML385 组神经元损伤明显加重,尼氏体数目减少.普鲁士蓝染色结果示Model组铁沉积较Control组增加,与Model组比较,PA组铁沉积减少,PA+ML385 组较PA组铁沉积增多.免疫荧光染色结果示Model组绿色荧光减弱,GPX4 阳性细胞减少,PA组细胞绿色荧光较Model组增强,GPX4 阳性细胞增多,PA+ML385 组较PA组GPX4 阳性细胞减少.Model组GSH低于Control组、PA组,PA+ML385 组低于PA组,差异有统计学意义(P<0.05);Model组MDA、Fe2+高于Control组、PA组,PA+ML385 组高于PA组,差异均有统计学意义(P<0.05).Model组Nrf2、SLC7A11、GPX4 蛋白相对表达量低于Control组、PA组,PA+ML385 组低于PA组,差异有统计学意义(P<0.05).结论 PA可改善AD大鼠认知障碍,其机制可能与通过激活Nrf2/SLC7A11/GPX4 信号通路抑制铁死亡有关.