查看更多>>摘要:为获得大口黑鲈(Micropterus salmoides)雌性化逆转的最适参数,建立伪雌鱼性别诱导和全雄苗种创制技术,采用15日龄(days post hatching,dph)且体长为(1.00±0.01)cm的大口黑鲈幼鱼为实验对象,投喂拌有17β-雌二醇(17β-estradiol,17β-E2)或曲洛斯坦(trilostane,TR)的人工配合饲料,3个实验组饲料分别含有30 mg/kg 17β-E2、30 mg/kg TR 和 20 mg/kg 17β-E2+10 mg/kg TR(依次命名为 E30、TR30 和 E20TR10),对照组饲料不含 17β-E2 和 TR(命名为C),60 d后停止投喂外源激素,分析饲喂17β-E2和TR对大口黑鲈生长性能、雌性比例、性腺发育的影响;12月龄时,采集各实验组伪雌鱼和对照组雌雄鱼血液和性腺组织,检测性类固醇类激素含量、dmrt1和cyp19a1a基因表达水平及卵巢发育形态.结果表明,饲喂外源雌性激素60 d后,E30和E20TR10组的体长和体重显著低于C组(P<0.05),TR30组的体长和体重高于对照组但无显著差异(P>0.05),E30、TR30和E20TR10组雌性比例分别为100.00%、0%、100.00%,C组雌性比例为53.33%;性腺组织切片结果显示,C组卵巢有大量初级卵母细胞,E30和E20TR10组遗传雄鱼出现卵巢腔、卵原细胞和卵母细胞,而TR30组雄鱼未发生性逆转;12月龄时,各实验组伪雌鱼比例未发生变化,C组雌性比例为46.67%;E30和E20TR10组伪雌鱼的卵巢发育迟滞,处于Ⅱ期;此外,E30和E20TR10组伪雌鱼血清中雌二醇(estradilol,E2)含量显著高于对照组雄鱼(P<0.05),TR30组低于对照组雄鱼,但无显著差异(P>0.05),各实验组血清中睾酮(testosterone,T)含量显著高于对照组雌鱼(P<0.05).与对照组雄鱼相比,E30和E20TR10组伪雌鱼cyp19a1a表达量显著上调(P<0.05),dmrt1表达量显著下调(P<0.05).综上所述,本研究投喂30 mg/kg TR未获得伪雌鱼,而投喂30 mg/kg 17β-E2和20 mg/kg 17β-E2+10 mg/kg TR实验组均可获得大口黑鲈伪雌鱼.12月龄伪雌鱼卵巢处于Ⅱ期,血清中E2含量及卵巢中cyp19a1a表达量均未到达正常雌鱼水平,导致卵巢发育迟滞.