查看更多>>摘要:目的 探究复合壳聚糖(chitosan,CS)水凝胶对于传统聚丙烯(polypropylene,PP)网片修复腹壁缺损的改善效果与机制.方法 通过物理交联方式制备CS水凝胶,并将其与PP网片复合,制备CS水凝胶/PP网片复合材料,采用大体观察、正置金相显微镜观察、扫描电镜观察及水接触角检测方法对复合材料内部结构、亲水性等进行表征.通过成纤维细胞(NIH-3T3)浸润实验和人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)管形成实验检测复合材料(实验组)抗细胞黏附和支持细胞长入的性能,以单纯细胞作为对照组.最后取18只8~10周龄SD大鼠建立双侧腹壁缺损模型(1.5 cm×1.0 cm),两侧分别使用复合材料(实验组)和PP网片(对照组)修补缺损,通过大体观察、组织学染色(HE染色和Masson染色)和免疫组织化学染色(CD31、CD68)探究其促进伤口愈合、抗粘连、血管生成和抗炎等性能.结果 复合材料呈浅黄色透明固态,厚度2~3 mm,PP网片牢固包裹在水凝胶中;扫描电镜观察示,水凝胶具有100~300 pm的连通孔隙,形成多孔结构;表面接触角测量结果示,CS水凝胶表现出良好亲水性,而PP网片则高度疏水.在体外细胞培养实验中,DAPI染色示,实验组阳性细胞数量在培养1 d时较少,而对照组细胞覆盖了整个孔板;培养3 d,实验组材料能够减少细胞黏附同时支持细胞长入.HUVECs管形成实验示,实验组细胞数量增加且有形成管的趋势,而对照组细胞分布稀疏,未见迁移.大鼠腹壁缺损修复实验结果示,术后1周,实验组已有组织和血管长入,术后4周完整性恢复良好,肌肉和血管再生明显;而对照组则有粘连且缺损未愈合.HE染色示,实验组细胞浸润较弱,且细胞密度在术后2、4周显著高于对照组(P<0.05).Masson染色示,与对照组相比,实验组胶原纤维排列整齐,术后2周胶原含量显著增高(P<0.05),而术后4周两组胶原含量相近(P>0.05).免疫组织化学染色示,实验组CD31阳性细胞均匀分布于肌肉层间,而对照组缺损明显,术后2周CD31阳性细胞比明显高于对照组(P<0.05);术后2、4周,实验组CD68阳性细胞比显著低于对照组(P<0.05).结论 CS水凝胶对于抗粘连和伤口愈合有积极作用,可以在愈合过程中抗炎和促血管生成,为解决与腹部粘连和重建问题提供了有希望的策略.