查看更多>>摘要:目的 探讨miR-17-5p通过调控PTEN/Akt通路介导乳腺癌细胞顺铂(DDP)耐药的作用.方法 采用DDP浓度梯度递增培养MCF-7/DDP耐药细胞株,通过RT-qPCR检测MCF-7及MCF-7/DDP耐药细胞中miR-17-5p含量.将MCF-7细胞分为miR-NC组和miR-17-5p组,分别转染miR-NC及miR-17-5p mimics质粒;将MCF-7/DDP 耐药细胞分为 anti-miR-NC 组和 anti-miR-17-5p 组,分别转染 anti-miR-NC 及 anti-miR-17-5p 质粒.通过 RT-qPCR检测转染效率,MTT法评估转染后各组细胞对DDP的敏感性,Transwell法用于获取miR-17-5p对乳腺癌细胞侵袭能力的直接作用,流式细胞术检测细胞凋亡率.双荧光素酶报告基因实验验证miR-17-5p和PTEN的靶向关系,Western blot法检测miR-17-5p调控下细胞凋亡和PTEN/Akt通路关键蛋白的变化.结果 相较MCF-7细胞,MCF-7/DDP耐药细胞中miR-17-5p表达量异常升高,PTEN表达量降低(P<0.01),PTEN作为靶基因受miR-17-5p调控.与miR-NC组相比,miR-17-5p组增殖抑制率显著降低,侵袭细胞数增加,凋亡率下降(均P<0.05),PTEN/Akt通路中抑癌蛋白 PTEN、p21、p27 表达降低,p-Akt308、p-Akt473、cyclin D1 表达升高(P<0.01).与 anti-miR-NC 组相比,anti-miR-17-5p组增殖抑制率提高,侵袭细胞数减少,凋亡率上升(均P<0.05),抑癌蛋白PTEN、p21、p27表达升高,p-Akt308、p-Akt473、cyclin D1表达降低(P<0.01).结论 敲低miR-17-5p可有效提高乳腺癌细胞的DDP敏感性,减弱其侵袭能力,诱导其凋亡,这可能与miR-17-5p对PTEN/Akt通路的调控作用有关.