查看更多>>摘要：目的 探究转录因子激活蛋白2家族的成员转录因子激活蛋白2C(TFAP2C)在小鼠磨牙牙胚发育过程中的表达及其影响.方法 实时荧光定量PCR(RT-qPCR)分析胚胎(E)14.5小鼠胚胎各器官及E12.5-E18.5和出生后0～7天的小鼠磨牙牙胚内Tfap2c的相对表达水平,冰冻切片免疫荧光染色显示Tfap2c在小鼠磨牙牙胚内的表达位置.采用牙胚体外培养的方法,探究敲降Tfap2c对小鼠磨牙牙胚发育的影响,RT-qPCR检测成牙本质细胞表达相关基因的相对表达水平.分离并提取小鼠牙胚间充质细胞进行培养,探究敲降Tfap2c对小鼠牙胚间充质细胞的影响,划痕愈合实验检测细胞迁移,细胞计数(CCK-8)法检测细胞增殖.结果 Tfap2c基因在小鼠磨牙牙胚发育早期相对表达水平较高.E13.5,Tfap2c在小鼠磨牙牙胚上皮组织与间充质组织内均有表达,二者的相对表达水平差异无统计学意义(t=1.06,P=0.472).E14.5,Tfap2c在小鼠磨牙牙胚初级釉结附近的间充质组织内表达,小鼠磨牙牙胚间充质组织内Tfap2c的相对表达水平(1.000±0.036)显著高于上皮组织(0.199±0.008)(t=37.29,P＜0.001).体外培养小鼠磨牙牙胚并敲降Tfap2c后,小鼠磨牙牙胚牙尖相对高度(0.708±0.171)及牙尖高度与牙冠高度的比值(0.321±0.068)均显著低于对照组(分别为1.000±0.287和0.483±0.166)(t=2.79,P=0.012;t=2.85,P=0.015);对照组的牙冠相对高度(1.078±0.206)及相对宽度(1.000±0.116)与敲降组的差异均无统计学意义(分别为0.993±0.254和0.999±0.122)(t=0.83,P=0.419;t=0.01,P=0.992).体外培养小鼠磨牙牙胚内敲降Tfap2c,成牙本质细胞表达相关基因Dspp和Dmp1相对表达水平均显著低于对照组(t=15.33,P＜0.001;t=13.81,P＜0.001).在小鼠牙胚间充质细胞内敲降Tfap2c,划痕愈合实验显示,对照组细胞48 h划痕宽度显著小于敲降组(t=29.86,P=0.001);CCK-8法检测显示对照组与敲降组细胞间各时间点吸光度值的差异均无统计学意义(P＞0.05);Tfap2c敲降组牙胚间充质细胞内成牙本质细胞表达相关基因Dspp和Dmp1相对表达水平均显著低于对照组(t=3.86,P=0.031;t=4.36,P=0.022).结论 Tfap2c在小鼠磨牙牙胚发育早期表达,主要表达于小鼠磨牙牙胚间充质组织内,敲降Tfap2c影响小鼠磨牙牙胚牙尖形成,影响牙胚间充质细胞迁移.
NETL
NSTL
万方数据