查看更多>>摘要：目的 评价丹酚酸B(Sal B)对脓毒症小鼠血管平滑肌细胞(VSMC)炎症反应的影响及circACTA2在其中的作用.方法 在体实验:健康雄性C57BL/6小鼠81只,6～8周龄,采用随机数字表法分为3组(n=27):假手术组、脓毒症组和Sal B组.采用盲肠结扎穿孔法制作脓毒症模型.模型制备成功后,Sal B组腹腔注射Sal B 7 mg/kg,1次/d,连续2 d.每组随机取20只小鼠用于造模后7 d内测定SBP、DBP、MAP、全血乳酸(Lac)浓度,记录生存情况.造模后48 h时每组随机取7只小鼠,取动脉血管组织,采用免疫荧光染色法测定IL-1β表达,分别采用Western blot法和qRT-PCR法测定IL-1β、TNF-α、IL-6及其mRNA的表达,采用qRT-PCR法测定circACTA2的表达.细胞实验:小鼠动脉VSMC培养后,采用随机数字表法分为6组(n=3):对照组(C组)、LPS组、Sal B组、si-circACTA2+C 组、si-circACTA2+LPS 组和 si-circACTA2+Sal B 组.LPS 组采用 LPS(终浓度1 μg/ml)、Sal B 组采用 LPS(终浓度 1 μg/ml)和 Sal B(终浓度 5 µmol/L)孵育 24 h.si-circACTA2+C组仅用 si-circACTA2 转染 VSMC.si-circACTA2 转染 VSMC 24 h 后,si-circACTA2+LPS 组用 LPS(终浓度 1 µg/ml)、si-circACTA2+Sal B 组采用 LPS(终浓度 1 µg/ml)和 Sal B(终浓度 5 µmol/L)孵育24 h.分别采用Western blot法和qRT-PCR法测定IL-1β、TNF-α、IL-6及其mRNA的表达,采用qRT-PCR法测定circACTA2的表达.结果 在体实验:与假手术组相比,脓毒症组SBP、DBP及MAP降低,全血Lac浓度升高,7 d生存率降低,动脉血管组织IL-1β、TNF-α和IL-6及其mRNA表达上调,circACTA2表达下调(P＜0.05),IL-1β荧光增强.与脓毒症组相比,Sal B组SBP、DBP及MAP升高,全血Lac浓度降低,7 d生存率升高,动脉血管组织IL-1β、TNF-α和IL-6及其mRNA表达下调,circACTA2表达上调(P＜0.05),IL-1β荧光减弱.细胞实验:与C组相比,LPS组IL-1 β、TNF-α和IL-6及其mRNA表达上调,circACTA2表达下调(P＜0.05).与LPS组相比,Sal B组IL-1β、TNF-α和IL-6及其 mRNA 表达下调,circACTA2 表达上调(P＜0.05).与 si-circACTA2+C 组相比,si-circACTA2+LPS组 IL-1β、TNF-α 和 IL-6 及其 mRNA 表达上调(P＜0.05).与 si-circACTA2+LPS 组相比,si-circACTA2+Sal B组IL-1β、TNF-α和IL-6及其mRNA表达差异无统计学意义(P＞0.05).结论 Sal B可减轻脓毒症小鼠VSMC炎症反应,机制可能与促进circACTA2表达有关.
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