查看更多>>摘要:目的 观察并初步探讨黄芪甲苷(AS-A)干预碘酸钠(NaIO3)诱导的光感受器退行性病变的效应及相关机制.方法 6~8周龄健康雄性C57BL/6J小鼠60只,随机分为正常对照组(NC组)、NaIO3组、AS-A组,每组20只.建模前30 min,AS-A组按100mg/kg的剂量腹腔注射100μlAS-A;30 min后,NaIO3组、AS-A组小鼠按30mg/kg的剂量腹腔注射100μlNaIO3.其后,AS-A组小鼠每天早晚间隔12h给药2次,直到实验结束.建模后1d,紧密连接蛋白(ZO-1)染色观察视网膜色素上皮(RPE)细胞结构;实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)检测各组小鼠视网膜趋化因子配体2(Ccl2)、白细胞介素1β(Il-1β)、混合谱系激酶结构域样蛋白(Mlkl)、受体相互作用蛋白激酶3(Ripk3)、肿瘤坏死因子(Tnf)等基因的mRNA相对表达量.建模后3d,免疫组织化学染色观察各组小鼠视网膜中离子钙接头蛋白1(Iba1)、神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)阳性表达;原位末端标记(TUNEL)法检测各组小鼠视网膜光感受器细胞的死亡情况.建模后4d,采用眼底彩色照相、光相干断层扫描(OCT)检查观察各组小鼠眼底形态;苏木精-伊红染色(HE)观察各组小鼠视网膜形态结构.两组间比较采用独立样本t检验;三组间比较采用单因素方差分析.结果 眼底彩色照相、OCT检查发现,NaIO3组小鼠眼底可见大量散在黄白色玻璃膜疣样结构,RPE层出现大量强反射区;AS-A组RPE层中强反射区数量减少.ZO-1染色结果显示,NaIO3组RPE细胞膜上ZO-1大量丢失;AS-A组ZO-1均匀分布于RPE细胞膜上.HE染色结果显示,NaIO3组RPE层可见圆形黑色沉积物,光感受器内外节结构严重受损,外核层(ONL)细胞层核数显著减少;AS-A组RPE层色素整齐,光感受器内外节结构完整,ONL细胞核层数显著增加.TUNEL检测结果显示,NaIO3组ONL可见大量TUNEL阳性细胞核,AS-A组视网膜ONL中TUNEL阳性细胞核数量显著减少,差异有统计学意义(t=2.66,P<0.05).qPCR检测结果显示,与AS-A组比较,NaIO3组视网膜中Mlkl、Ripk3、Ccl2、Il-1β、TnfmRNA相对表达量显著升高,差异有统计学意义(F=39.18、10.66、53.51、41.40、24.13,P<0.001).免疫组织化学染色结果显示,与NC组、AS-A组比较,NaIO3组视网膜中GFAP阳性表达显著升高,差异有统计学意义(F=9.62,P<0.05).结论 AS-A能有效抑制NaIO3诱导的光感受器退行性病变,其效应部分与抑制光感受器死亡和神经炎症反应,维护视网膜稳态相关.