查看更多>>摘要：目的 从上皮屏障损伤和上皮间质转化角度探讨葛根芩连汤加味方治疗溃疡性结肠炎的可能作用机制.方法 将60只雄性C57BL/6J小鼠随机分为空白组、模型组、西药对照组和葛根芩连汤加味方低、中、高剂量组,每组10只.除空白组外其余各组小鼠采用3％葡聚糖硫酸钠自由饮用7天诱导结肠炎模型,造模第1天开始葛根芩连汤加味方低、中、高剂量组分别给予葛根芩连汤加味方6、12、24 g/(kg·d)灌胃,西药对照组给予5-氨基水杨酸100 mg/(kg·d)灌胃,空白组和模型组小鼠给予10 ml/kg蒸馏水灌胃,每日1次,共7天.每天记录小鼠体质量并进行疾病活动指数(DAI)评分.末次给药后24 h麻醉小鼠并取结肠观察结肠长度,应用HE染色观察结肠组织病理变化并进行病理组织学评分,Masson染色检测结肠胶原纤维面积占比,免疫荧光观察结肠黏膜上皮F-肌动蛋白(F-actin)分布表达,免疫组化检测紧密连接蛋白1(ZO-1)、闭合蛋白(Occludin)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)表达.结果 与空白组同时间比较,造模第7天模型组小鼠体质量百分比明显下降、DAI评分明显升高(P＜0.01);与模型组同时间比较,西药对照组和葛根芩连汤加味方各剂量组小鼠的体质量下降,西药对照组和葛根芩连汤高剂量组DA1评分降低(P＜0.05或P＜0.01);与葛根芩连汤低剂量组同时间比较,葛根芩连汤高剂量组和西药对照组小鼠体质量明显增加(P＜0.05).与空白组比较,模型组小鼠结肠长度明显缩短,病理组织学评分、胶原面积占比明显升高,F-actin平均荧光强度降低,结肠组织ZO-1、Occludin、E-cadherin蛋白水平下降,Vimentin蛋白水平升高(P＜0.01).与模型组比较,各给药组小鼠结肠长度明显增加,病理组织学评分、胶原面积占比降低,ZO-1、Occludin、E-cadherin蛋白水平升高,Vimentin水平降低;西药对照组和葛根芩连汤加味方中、高剂量组F-actin平均荧光强度增加(P＜0.05或P＜0.01).与葛根芩连汤加味方低剂量组比较,葛根芩连汤加味方中剂量组及西药对照组胶原纤维面积占比降低;葛根芩连汤加味方中剂量组F-actin平均荧光强度升高;西药对照组ZO-1、E-cadherin蛋白水平升高,葛根芩连汤加味方高剂量组ZO-1蛋白水平升高(P＜0.05).与葛根芩连汤加味方中剂量组比较,葛根芩连汤加味方高剂量组与西药对照组ZO-1蛋白水平升高(P＜0.05).与葛根芩连汤加味方高剂量组比较,西药对照组E-cadherin、Vimentin蛋白水平均升高(P＜0.05).结论 葛根芩连汤加味方能够减轻溃疡性结肠炎模型小鼠结肠炎症及黏膜屏障损伤,抑制上皮间质转化进程,可能是其作用机制之一.
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