查看更多>>摘要：目的 从母胎界面酸性微环境下免疫耐受角度探讨寿胎丸治疗复发性流产(RSA)的可能机制.方法 雌性CBA/J小鼠随机分为正常组、模型组、地屈孕酮组、寿胎丸组,每组15只.正常组和模型组小鼠给予0.2 ml/d蒸馏水灌胃,寿胎丸组给予寿胎丸水煎液0.15 g/(10g·d)灌胃,地屈孕酮组给予地屈孕酮片0.44 mg/(10g·d)灌胃.灌胃14天后,正常组CBA/J雌性小鼠与BALB/c雄性小鼠2:1合笼,其余各组CBA/J雌性小鼠与DBA/2雄性小鼠2:1合笼建立RSA小鼠模型.次日雌性小鼠清晨做阴道涂片,以阴道涂片出现大量精子并见到阴道栓作为妊娠第1天.见栓后按照之前的给药方式继续给药,直至妊娠第10天.各组雌鼠在妊娠第10天取母胎界面组织,乳酸脱氢酶比色法检测乳酸(LA)含量;qPCR法、Western blot法分别检测免疫相关因子白细胞介素4(IL-4)、γ干扰素(IFN-γ)、转化生长因子β1(TGF-β1)、叉头转录因子(Foxp3)mRNA和蛋白表达;流式细胞术检测辅助性T淋巴细胞1(Th1)、辅助性T淋巴细胞2(Th2)、调节性T细胞(Treg)、经典巨噬细胞(M1)、替代巨噬细胞(M2)的数量.采用双变量Pearson检验分析LA含量与 Th1、Th2、Treg、M1、M2数量相关性,以及LA含量与 IL-4、IFN-γ、TGF-β1、Foxp3蛋白和mRNA 的相关性.结果 妊娠第10天,与正常组比较,模型组LA含量降低,母胎界面组织中IL-4、TGF-β1、Foxp3蛋白及mRNA表达降低,IFN-γ蛋白及mRNA表达升高,Th1和M1细胞数量增多,Th2、Treg、M2细胞数量减少(P＜0.05或P＜0.01).与模型组比较,寿胎丸组及地屈孕酮组LA含量升高,母胎界面组织中IL-4、TGF-β1、Foxp3蛋白及mRNA表达升高,IFN-γ蛋白及mRNA表达降低,Th1和M1细胞数量减少,Th2、Treg和M2细胞数量增多(P＜0.05或P＜0.01).LA含量与Th2、Treg、M2细胞数量,IL-4、TGF-β1、Foxp3蛋白及mRNA表达呈正相关(P＜0.05或P＜0.01);LA含量与Th1、M1细胞数量,IFN-γ蛋白及mRNA表达呈负相关(P＜0.05或P＜0.01).结论 寿胎丸可能通过调控RSA模型小鼠母胎界面酸性微环境中免疫相关因子的表达,从而提高免疫耐受,发挥其保胎作用.
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