本发明公开了一对用于检测和鉴别果胶杆菌属(Pectobacterium)细菌的引物及其使用方法。引物包括正向引物23SPecF和反向引物23SPecR。一种检测和鉴别Pectobacterium属细菌的方法,用引物对23SPecF和23SPecR进行PCR,能且只能从含有Pectobacterium属细菌基因组DNA的样品中扩增出266bp的核酸片段。因Pectobacterium属细菌有7个拷贝的23SrRNA基因,用引物对23SPecF和23SPecR进行PCR的检测灵敏度是用针对单拷贝基因引物的7倍,能更灵敏地检测Pectobacterium属细菌。