本发明公开了一种应拉木胶质层显微切片的染色方法,包括以下步骤:(1)将阔叶树材倾斜或弯曲的树干或树枝锯成圆盘,确定应拉木区域;(2)在所述步骤(1)确定后的应拉木区域选取木样,经水煮排气、软化后,切取横切面切片置于蒸馏水中洗涤;(3)将步骤(2)洗涤后的切片立即用番红?星蓝乙醇染液或番红?星蓝乙酸染液双重染色进行,染色过程中用梯度乙醇溶液进行脱水,得到脱水染色后的应拉木胶质层显微切片。该染色方法使用番红?星蓝染液对应拉木进行染色,可清晰地将应拉木胶质层与相邻壁层区分开来,便于观察胶质层的微观结构,更有利于对图像按照饱和度和灰值进行处理和分析,为研究应拉木提供更多可行性。