本发明公开了一种利用原生质体不对称融合技术获得香蕉体细胞杂种的方法,该方法是采用将香蕉胚性悬浮细胞在酶解液中进行酶解获得原生质体,受体原生质体用碘乙酰胺进行处理,供体原生质体用紫外灯进行照射处理,将供体原生质体和受体原生质体混合后,用聚乙二醇法进行融合。融合产物悬浮于原生质体液体培养基中进行看护培养,获得的细胞团转移到体胚诱导培养基上进行培养至体胚萌发进行培养即获得完整的体细胞杂种植株。本发明只有融合产物能够再生植株,减少了在培养过程中的工作量及获得苗后的筛选、鉴定的工作量;同时本发明所采用的培养基配方简单,便宜,解决了香蕉原生质体融合后融合产物培养过于繁琐的问题。