本发明公开了百香果病毒介导的基因沉默体系的构建方法及其应用,构建方法是:(1)提取百香果嫩叶的RNA,反转录获得cDNA;(2)选择百香果PePDS基因为干扰片段;(3)设计PePDS扩增的特异性上、下游引物,并进行cDNA片段PCR扩增,纯化后获得PePDS基因干扰片段;(4)将纯化的PePDS基因干扰片段通过重组反应同步连接到植物病毒pTRV2载体上,构建得到百香果PePDS基因沉默体系(pTRV1,pTRV2?PePDS),命名为TRV?PePDS。本发明构建的TRV?PePDS可应用到农杆菌转化和百香果叶片浸染过程中,并表现出了明显的沉默效率。本发明能够快速高效获得转基因植株,稳定性强,操作简单。实现了快速降低目的基因表达水平的目的,达到敲除目的基因的效果,加快百香果功能基因组学的研究进程。