摘要
本发明涉及基因工程与应用微生物发酵领域，提供一种高产虫草素的酵母工程菌及其构建方法与应用。本发明虫草素工程酵母的构建过程主要包括利用特有虫草素生物合成模块在酵母基因组中的酶融合组装和多拷贝整合；甲醇同化途径在细胞质和过氧化物酶体中的强化以提高碳代谢流供给；改造糖酵解途径和磷酸戊糖途径以强化辅因子NADPH和能量载体ATP的供给；改造腺苷和3’?AMP合成途径以强化前体物的供给。通过分段式发酵方法，在发酵144h后虫草素产量达到8.1g/L，发酵时间至168h时，虫草素产量可达到19.5g/L。本发明提供的途径模块化技术促使虫草素生产效率大幅提升，且实现了以甲醇为碳源的虫草素绿色化生产工艺。
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