本发明公开了一种能够同时检测人体尿液12种儿茶酚胺及其代谢物和肌酐的样本前处理液、方法及试剂盒。所述前处理液由稀释液I、稀释液II、稀释液III、稀释液IV、淋洗液I、淋洗液II、淋洗液III和淋洗液IV组成；稀释液I为含0.1~5%甲酸的5~50%甲醇；稀释液II为0.5~5%乙酸溶液；所述稀释液III为1X磷酸盐缓冲液；所述稀释液IV为10~100?mM的羟乙基哌嗪乙硫磺酸溶液；淋洗液I为甲醇；淋洗液II为5~50?mM乙酸铵溶液；淋洗液III为5~50%甲醇；所述淋洗液IV为含0.1~5%甲酸的5~50%甲醇。本发明通过对样本前处理液及LC?MS/MS方法条件参数进行优化及简化，从而实现一个SPE?LC?MS/MS法同时萃取及检测尿液中儿茶酚胺及其代谢物和肌酐，可节省时间、降低成本且保证了检测的同质性。
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