一种生物活性肽—丝素肽的制备方法,属于食品生物技术领域。本发明以下脚蚕茧或废蚕丝为原料,经0.3-1.0%(w/v)的Na<SUB>2</SUB>CO<SUB>3</SUB>溶液精练后,用20-60%(w/w)的CaCl<SUB>2</SUB>溶液加热溶解得溶丝液,在pH2.5-12.0,30-80℃下用蛋白酶对溶丝液进行酶水解反应,再用纳滤技术脱除酶解液中高浓度的CaCl<SUB>2</SUB>盐,浓缩液进行喷雾干燥,即制得产品丝素肽粉末。本发明优点是处理量大,脱盐率高,分离条件温和,流程简单及能耗较低,可实现工业化生产,制备高纯度的丝素肽粉末,用于功能性食品的开发。