一种含动物蚕丝心蛋白基因棉纤维及其基因工 程方法。应用中棉基因组DNA经PCR扩增了E6基因片段,根 据该序列设计引物,用PCR-96孔板方法筛选亚洲棉基因组文 库,得到该基因GAE6-3A克隆,其插入片段长约8kb,上游启动 子长1457bp,该GAE6-3A启动子在棉纤维中特异表达。提取 了蚕的RNA,反转录后扩增克隆了编码蚕丝心蛋白的基因,并将 其装入原核表达载体中获得高效表达后,免疫兔制备蚕丝心蛋 白抗体。进一步构建了由GAE6-3A启动子驱动的丝心蛋白植 物转基因载体,转化棉花,经组织化学染色、PCR及DNA分子杂 交验证蚕丝心蛋白基因已转入棉花中。