一种高效的酿酒酵母无痕基因敲除方法及其应用

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中文摘要：本发明公布了一种在酿酒酵母中高效无痕敲除的方法，并通过对该无痕基因敲除系统中的正向同源序列、半乳糖浓度及半乳糖诱导时间进行优化，第二步同源重组的概率达到6.86×10?4。以酿酒酵母AY15的单倍体α5为出发菌株，BAT2基因为靶基因，实现对野生酿酒酵母菌株基因BAT2高效的无痕敲除，通过白酒发酵实验，改造菌株的正丙醇、异丁醇和异戊醇含量亲本菌株相比分别降低了20.32％、47.85％和23.14％，达到了低产高级醇的目的。该方法可广泛应用于酵母及其他微生物的基因改造，由于所获得的突变株不残留任何外源基因，可以安全的用于工业生产，为直接在工业菌株中进行基因敲除提供了有益的参考。

申请号：

CN201810748064.8

公开号：

CN109136254A

专利类型：

发明专利

申请日：

2018-07-10

公开日：

2019-01-04

IPC分类：

C12N15/81(20060101)

申请人：

天津科技大学

发明人：

陈叶福、王建辉、杜丽平、张翠英、马立娟、肖冬光、郭学武、李凭、董健、于爱群

主申请人地址：

300457 天津市滨海新区经济技术开发区第13大街9号

国别省市代码：

中国(CN)