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红鳍东方鲀IgM重组表达及多克隆抗体制备

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红鳍东方鲀(Takifugu rubripes)是我国重要的海水养殖经济鱼类,探究红鳍东方鲀IgM的结构与功能对其病害防治与免疫系统的研究均有重要意义.本研究克隆获取了红鳍东方鲀IgM的重(H)链恒定(C)区序列(大小为1326 bp),并将获得的IgM序列连接至pET28a表达载体上,利用大肠杆菌BL21进行体外重组表达.SDS-PAGE结果表明:重组蛋白红鳍东方鲀IgM(TrIgM)大小约为62 kDa,重组表达的IgM主要以包涵体形式表达.通过体外复性获得可溶性TrIgM蛋白,将制备的TrIgM蛋白免疫BALB/c小鼠,获得了TrIgM鼠抗血清,Western Blot检测结果表明:制备的鼠抗血清可以与重组TrIgM蛋白和红鳍东方鲀天然血清中的IgM重链蛋白特异性结合.本研究中制备的抗血清可作为检测红鳍东方鲀IgM的特异性抗体,为红鳍东方鲀相关免疫检测提供基础.

王森、黄宇希、彭欢、苏鹏、黎睿君

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大连海洋大学辽宁省海洋动物免疫学与疫病防控重点实验室,辽宁大连116023

大连市海珍品疾病防控重点实验室,辽宁大连116023

大连海洋大学水产与生命学院,辽宁大连116023

大连富谷食品有限公司,辽宁庄河116400

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红鳍东方鲀 IgM 鼠抗红鳍东方鲀IgM多克隆抗体

辽宁省科技厅自然科学基金指导计划大连市高层次人才创新支持计划辽宁省教育厅面上项目

2019-ZD-07332019RQ111LJKZ0703

2022

现代农业科技
安徽省农业科学院

现代农业科技

影响因子:0.355
ISSN:1007-5739
年,卷(期):2022.(10)
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