目的 探究在亚抑菌浓度抗生素作用下,高毒力肺炎克雷伯菌毒力基因表达水平的变化.方法 采用纸片扩散法、Vitek-2 compact法测定菌株对临床常见抗菌药物的敏感性,并用微量肉汤稀释法检测菌株对头孢西丁和阿米卡星的MIC值.聚合酶链式反应(PCR)对荚膜血清型(K1、K2、K5、K20、K54、K57)及毒力相关基因(rmpA、aerobactin、kfu、alls、magA、wcaG 、qmH、mrkD)进行检测.根据菌株对两种药物的MIC值,配制1/2MIC、1/4MIC、1/8MIC亚抑菌浓度抗生素梯度.运用qRT-PCR检测1/2MIC、1/4MIC、1/8MIC浓度头孢西丁、阿米卡星对菌株处理后毒力基因相对表达量的改变,SPSS软件16.0版本对其差异进行比较分析,通过基质辅助激光解吸电离飞行质谱(MALDI-TOF MS)及ERIC-PCR检测菌株之间的同源性.结果 共收集57株高毒力肺炎克雷伯菌,对大多数临床常用抗生素保持敏感,PCR结果显示K1型有17株,K2型21株,K20型2株,K57型8株,有9株未检出血清型.rmpA、aerobactin基因检测全部阳性,wcaG、kfu、magA 3个基因分别检出17株、21株、16株.fimH、mrkD全部阳性.亚抑菌浓度头孢西丁及阿米卡星作用下,与对照组相比,3种浓度(1/2MIC、1/4MIC、1/8MIC)的2个抗生素对2种毒力基因均有明显的抑制作用(P＜0.05),头孢西丁的抑制程度最高.3种浓度抑制程度相比,以1/2MIC抗生素抑制效果最强.结论 高毒力肺炎克雷伯菌对临床常用抗生素有较高的敏感性,血清型K1、K2是高毒力肺炎克雷伯菌的常见血清型,在亚抑菌浓度头孢西丁、阿米卡星作用下,rmpA、aerobactin毒力基因表达下降.
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